Infecciones intramamarias: prevalencia en raza Carora

INTRODUCCIÓN

En Venezuela existe actualmente un gran interés en mejorar la producción de leche de vaca (Bos taurus), ya que es un país deficitario, tanto en cantidad, como en los aspectos relacionados con la calidad de la leche. No obstante, las condiciones ambientales tropicales que existen en el país dificultan la explotación, en el régimen de pastoreo, de razas especializadas en la producción de leche, como la Holstein y el Pardo Suizo, dado que estas razas presentan graves problemas de adaptación a las altas temperaturas, humedades y cargas parasitarias. Por este motivo, la mayor parte de la leche que se obtiene en Venezuela procede principalmente de vacas mestizas con cebú (Bos indicus) y también, de razas autóctonas, que si bien tienen menores niveles productivos, poseen una buena adaptación a las extremas condiciones ambientales tropicales [29]. Sin embargo, en la actualidad apenas existe información sobre la calidad higiénico-sanitaria de la leche producida en las granjas que explotan la raza Carora y más concretamente, sobre la presencia de mastitis en los rebaños. Esto se debe a varios motivos. En primer lugar, porque la industria paga la leche a los ganaderos solamente en función del contenido en grasa y del volumen de leche comercializada, pero en los laboratorios de análisis (de las propias industrias) no se realiza el contaje de gérmenes. En segundo lugar, porque no se desarrolla un programa de control de mamitis que incluya análisis bacteriológicos de muestras de leche. En tercer lugar, porque en Venezuela tampoco se dispone de trabajos previos de investigación sobre la prevalencia, incidencia y etiología de las infecciones intramamarias (IIM) en las explotaciones de la citada raza.

La mastitis es un proceso inflamatorio de la glándula mamaria, en el cual el sistema inmune de la vaca trata de luchar contra un agente infeccioso, alojado en el interior de la misma. La mastitis, se puede clasificar como: clínica y subclínica. En la forma clínica aparecen cambios en la leche, en la ubre o en el propio animal detectables a simple vista. La mastitis subclínica no es apreciable a simple vista, ya que no hay cambios fácilmente detectables en la leche o en la ubre [4, 19, 38]. Mayoritariamente, la mastitis es producida por bacterias que se introducen en la glándula a través del canal del pezón, las cuales se multiplican dentro del tejido produciendo IIM [8]. Por este motivo, a la mastitis se le considera una enfermedad infecciosa y está reconocida como la enfermedad que mayor pérdida económica causa en los rebaños lecheros [20]. Está patología continua siendo la razón principal de eliminación de vacas, estimado en 26,5% de los casos mastitis clínica, lo cual va en detrimento del progreso genético alcanzado [15, 28]. Por lo antes expuesto, el objetivo de presente trabajo fue evaluar incidencia y prevalencia de IIM en vacas de raza Carora en sistemas de pastoreo y estabulación.

MATERIALES Y MÉTODOS

Diseño del estudio

El estudio se llevó a cabo en 10 explotaciones pertenecientes a la Asociación Venezolana de Criadores de Ganado Carora (ASOCRICA). En la mitad de ellas las vacas estaban estabuladas permanentemente, mientras que en la otra mitad, los animales se mantenían a pastoreo. Todas las explotaciones elegidas tenían más de 80 vacas.

Con objeto de poder separar los efectos “estación” (época del año), “estado de lactación” y “número de lactación” de las vacas, se planteó un estudio observacional que consistió en realizar tres controles (Febrero-marzo, junio-julio, noviembre) de 51 animales de cada explotación distribuidos de acuerdo a la edad y días (d) de lactancia. En el primer control los animales fueron elegidos al azar, de entre todos los que reunían las características de número y estado de lactación, especificados en la TABLA I.

En la segunda evaluación, cuatro meses después del primero, inicialmente se intentaron muestrear las mismas vacas del primer control. Sin embargo, también fue necesario incorporar nuevos animales para sustituir a los que ya no se encontraban en lactación, bien sea por haber pasado al periodo seco o eliminadas por cualquier causa, por lo tanto ya no estaban al inicio de la lactancia. Así de esta manera mantiene el plan de muestreo explicitado en la tabla anterior. Esta misma planificación del muestreo se siguió en la tercera evaluación.

Análisis bacteriológico

Este análisis se llevó a cabo para identificar la presencia de gérmenes causantes de IIM a nivel de ubre. Las muestras de leche se tomaban antes del ordeño, recogiendo una mezcla de leche de los cuatro pezones de cada animal [38]. Previamente se limpiaba el extremo de cada pezón con algodón empapado en alcohol isopropilico al 70%; a continuación se eliminaban los primeros chorros y se recogían unos 2 mL. de cada pezón (total unos 7-8 mL.) en un único tubo estéril de unos 10 mL. de capacidad. Con el objeto de disminuir los riesgos de contaminación en la recogida de las muestras, los pezones de la ubre se limpiaban comenzando desde los más alejados hasta los más cercanos al operario: posterior izquierdo, anterior izquierdo, posterior derecho y anterior derecho, mientras que la toma de la muestra se llevaba a cabo en orden inverso anterior derecho, posterior derecho, anterior izquierdo y posterior izquierdo [28].

TABLA I NÚMERO DE VACAS MUESTREADAS EN CADA CONTROL, SEGÚN NÚMERO Y ESTADO DE LACTACIÓN

Las muestras se mantuvieron en refrigeración (4-8°C) en una nevera Samsung®, modelo RT29FARLDWW de 10,8 pies cúbicos, un máximo de 6 horas, mientras eran transportadas hasta el laboratorio. A continuación fueron llevadas a -20°C en un congelador Electrolux® modelo EFUA38W3MLW, durante una semana, como máximo, antes de proceder a su análisis. Para realizar la siembra en medio de cultivo, las muestras se temperaban previamente con agua a 37°C hasta alcanzar una temperatura de 18-20°C en un baño María de temperatura regulable marca Memmert modelo, WNB 10, Hong Kong. Luego, con un asa de platino calibrada se sembraban mediante frotis, 0,01 mL de leche en placas petri con agar-sangre, agar sal manitol y agar McConkey. Las placas se incubaban a 37°C en una estufa marca Acequilabs® modelo IN-2003, Colombia durante tres d, realizando lecturas diarias. La identificación a nivel de grandes grupos bacterianos se realizó de acuerdo a: características de las colonias en cada medio de cultivo, resultados de la tinción Gram y pruebas de catalasa, coagulasa, fermentadores o no en agar-esculina y la prueba de CAMP [24]. Los criterios utilizados para identificar los principales grupos bacterianos se han resumido en la TABLA II.

Análisis estadístico

Con los resultados del análisis bacteriológico se calculó la tasa de incidencia y prevalencia de las IIM, por explotación y de forma separada, según el número y estado de lactación. La prevalencia de mastitis se determinó como el número de vacas con IIM en una evaluación (en porcentaje del total de vacas muestreadas en esa evaluación). La incidencia se calculó como la aparición de nuevos casos de mastitis entre dos evaluaciones (en porcentaje del número de vacas que estaban sanas en el primer control). Los resultados fueron analizados estadísticamente mediante el test de Ji² cuadrado (X²) utilizando el PROC FREQ del paquete estadístico SAS [39].

TABLA II CRITERIOS UTILIZADOS PARA IDENTIFICAR LOS PRINCIPALES GRUPOS BACTERIANOS RESPONSABLES DE PROVOCAR IIM

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

La prevalencia media de IIM obtenida según los siguientes factores: control, número de lactación, estado de lactación y sistema de explotación, se presentan en la TABLA III, la cual no difirió significativamente en los tres controles realizados (Febrero: 25,9; julio: 27,1%; noviembre: 25,9%). Sin embargo, también fue similar según el número de lactación de las vacas (primer parto: 25,8%; segundos o más partos: 26,6% y su estado de lactación (Inicio: 28,3%; Mitad 25,0%; Final 25,7%). El sistema de explotación afectó significativamente (P< 0,001) la prevalencia, siendo ésta inferior en el sistema de estabulación (19,9%) que en el sistema de pastoreo (32,7%). Este aspecto también puede ser observado en la FIG.1, donde se aprecia que, las granjas con sistema de estabulación (granjas 1 a 5) presentan una prevalencia media entre el 10 y el 26,8%, mientras que en las de pastoreo (granjas 6 a 10) la prevalencia varió desde el 16,3 al 49,7%.

La incidencia media de IIM durante la lactación fue del 24,5%. Por granjas, la incidencia media durante todo el experimento presentó una gran variabilidad, con un valor mínimo del 9,1% en la granja 5 y un valor máximo del 50,0% en la granja 9 (FIG. 2).

La incidencia de IIM durante la lactación no varió significativamente según el control (Febrero-julio: 24,1%; julio-noviembre: 25,0%), el número de lactación (primíparas: 27,1%; multíparas: 22,7%), el estado de lactación (inicio-mitad: 22,0%; mitad-final: 28,1%) y el sistema de explotación (estabulación: 21,7%; pastoreo: 27,9%.

Por otra parte, las curaciones de IIM durante la lactación tuvieron una media, del 33,8%, y también presentaron una gran variabilidad en las explotaciones muestreadas (FIG. 3). En la TABLA IV se observa que, estas curaciones fueron significativamente (P< 0,001) más elevadas entre los controles de febrero-julio (43,0%) que entre julio-noviembre (19,1%) y también fueron significativamente más elevadas (P< 0,001) durante la primera mitad de la lactación (inicio-mitad: 43%) que en la segunda mitad de la lactación (mitad-final: 19,1%). Por el contrario, las curaciones de IIM durante la lactación no variaron significativamente según el número de lactación de los animales (primíparas: 32,7%; multíparas: 34,8%) ni el sistema de explotación (estabulación: 31,1%; pastoreo: 35,7%). Estas diferencias no fueron significativas, dado el escaso número de animales controlados en esta fase (final de la lactación-principio de la siguiente lactación: 45 vacas infectadas al final de la lactación (TABLA IV).

FIGURA 1. PREVALENCIA MEDIA DE IIM EN CADA UNA DE LAS 10 GRANJAS MUESTREADAS.

FIGURA 2. INCIDENCIA DE IIM DURANTE LA LACTACIÓN EN CADA UNA DE LAS 10 GRANJAS MUESTREADAS, OBTENIDA A PARTIR DE LOS TRES CONTROLES REALIZADOS

TABLA III PREVALENCIA DE IIM SEGÚN LA ÉPOCA DE LA EVALUACIÓN, EL NÚMERO Y ESTADO DELACTACIÓN DE LAS VACAS Y EL SISTEMA DE EXPLOTACIÓN UTILIZADO EN LAS 10 GRANJAS MUESTREADAS

FIGURA 3. CURACIONES DE IIM DURANTE LA LACTACIÓN EN CADA UNA DE LAS 10 GRANJAS MUESTREADAS.

TABLA IV CURACIONES DE IIM DURANTE LA LACTACIÓN, SEGÚN LA ÉPOCA DEL CONTROL, EL NÚMERO Y ESTADO DE LACTACIÓN DE LAS VACAS Y EL SISTEMA DE EXPLOTACIÓN UTILIZADO EN LAS 10 GRANJAS MUESTREADAS

Los valores medios de prevalencia (26,3%) e incidencia durante la lactación (24,5%) de IIM por ubre obtenidos en este estudio han sido similares a los encontrados en otros trabajos realizados en Venezuela, mayoritariamente con vacas mestizas (cruces de Cebú con Holstein, Pardo Suizo o Carora). Faria y col. y Londoño [17, 34] hallaron una prevalencia del 25 y del 29%, respectivamente, mientras que otros obtuvieron una incidencia media de IIM del 22,2 y 22,9%, respectivamente [4, 5]. No obstante, se debe puntualizar que, en la bibliografía también se puede encontrar, en los mismos cruces citados anteriormente, valores más elevados de prevalencia [5, 16, 33] e incidencia de IIM [10, 13, 23, 26].

En la mayoría de los trabajos realizados con vacas de raza Frisona/Holstein, la prevalencia de mastitis subclínica es más elevada a la encontrada en el presente trabajo, situándose entre el 30 y el 50% de las vacas afectadas en países como Holanda [31, 32], Italia [15], Méjico [12], EUA [43], Finlandia [30] y España [11].

El hecho de que la prevalencia de IIM fuera significativamente más elevada en las granjas en pastoreo (32,7% de media, variando entre un 24,5 y un 49,7%) que en las estabuladas (19,9% de media, variando entre un 9,9 y un 26,8%) podría estar asociado a diferencias en las prácticas relacionadas con un adecuado plan de control de mastitis que incluía tratamiento de vacas secas con antibióticos a base de cloxacilina y ampicilina (Masticilina Secado de Bayer®). Efectivamente, se puede destacar que, en algunas explotaciones que estaban en pastoreo (granjas 6 y 9) se observaron fallas en la rutina de ordeño, dado que no aplicaban pre-sellado y secaban los pezones con paños varias vacas, en lugar de utilizar toallas desechables individuales por vaca. Además, en tres granjas (6, 8 y 9) no se realizaba adecuadamente el tratamiento de vacas secas y la eliminación de vacas con mastitis crónica. Por otra parte se puede destacar que, en otras investigaciones también se ha observado una mayor prevalencia en las granjas que practican el pastoreo, respecto a las estabuladas [1, 7, 16, 18, 19, 22, 35, 41].

En el presente trabajo no se determinó que la prevalencia global de IIM variara significativamente con el estado de lactación, lo cual coincide con lo encontrado por Osteras y col. [24]. Así mismo, el hecho que la incidencia de IIM tampoco variara significativamente con el estado de lactación, discrepa de otros trabajos realizados en el entorno [7] y en otros países [9, 37], en los que se indica que la incidencia de mastitis tiende a disminuir a medida que avanza la lactación, siendo especialmente elevada al principio de la misma (primer mes).

Por otra parte, también es difícil explicar el hecho de que la prevalencia de IIM fuera similar en las vacas de primera y posteriores lactaciones, ya que la mayoría de autores encuentran que la citada prevalencia aumenta con el número de lactación [3, 5, 10, 40] debido a la mayor exposición de los animales a los gérmenes causantes de mastitis [36].

En este trabajo no se determinó que la prevalencia e incidencia de IIM variaran según la época del año (febrero y noviembre son meses de estación seca, mientras que julio es época de estación de lluvias), lo cual coincide con lo hallado [5]. No obstante, en muchos trabajos se ha observado un patrón estacional en la prevalencia y/o incidencia de IIM [1, 25], de modo que en la época de lluvias o de altas temperaturas aumentan los casos de mastitis al empeorar el medio ambiente en el que se encuentran los animales.

La prevalencia global de Staphylococus. aureus como agente etiológico fue relativamente baja (6%; 91 aislamientos de 1.503 muestras), si bien hubo mucha variabilidad entre granjas (0 a 31%). Así mismo, este germen se aisló en promedio en el 23% de las ubres infectadas. Estos valores son similares a los hallados en otros trabajos realizados en explotaciones del entorno (S. aureus identificado en el 24-30% de los aislamientos) [18, 34] e incluso de otros países con vacas Frisonas/Holstein tuvieron 8% de prevalencia y 22% de los aislamientos [14, 31], 7,6% de prevalencia 9% de prevalencia [43]. No obstante, también existen estudios en los que este germen se ha aislado con una frecuencia menor 3,4% de prevalencia y 10% de los aislamientos [30] y mayor 22% de las vacas [24]; 41% de los aislamientos [21] y 22% de prevalencia [15], respecto a los obtenidos en el presente trabajo.

También se pudo destacar la baja prevalencia de Streptococus agalactiae, ya que solo se identificó en el 2,5% de los aislamientos y en cuatro explotaciones no se aisló ningún caso. Esta prevalencia es ligeramente superior a la observada en otros países que llevan a cabo planes de control de mastitis y que tienen como objetivo eliminar este germen de las explotaciones [31] 0,9% de los aislamientos [26] 09% de prevalencia y 1,3% de los aislamientos [27] menos del 0,07% de los aislamientos; [24] 0% de los aislamientos. Sorprendentemente, este germen aún está lejos de ser erradicado en ciertas zonas de EUA con un 10% de las vacas infectadas por Strep. agalactiae [42, 43].

La baja prevalencia de las Corynebacterium (3,5% de los aislamientos) y los gérmenes Gram-negativo (4,6% de Coliformes; 1,5% de otros Gram-negativo), también coincide con otros trabajos. Por ejemplo, en un trabajo realizado durante cuatro años en Colombia [22], se obtuvo que las Corynebacterium representaban menos del 2,8% de los aislamientos, mientras que otros autores [24] solo aíslan dos casos de Corynebacterium en 14.152 muestras tomadas de cuarterones. Por el contrario, también existen estudios que muestran una relativa elevada prevalencia de estos patógenos, 17% de los aislamientos; 34% de los aislamientos y 24%, respectivamente [2, 26, 27]. En relación a los gérmenes Gram-negativo, normalmente representan menos del 5% de los aislamientos [14, 24, 31, 43], aunque en algunos casos han llegado a representar más del 10% de los aislamientos [22, 30].

CONCLUSIONES

La prevalencia de IIM a nivel de ubre, en las granjas estudiadas con ganado vacuno de raza Carora fue significativamente mayor en las explotaciones que utilizaban el sistema de pastoreo en comparación con aquellas que tenían las vacas en estabulación permanente. Por el contrario, la prevalencia no difirió significativamente según el momento de la evaluación, el número y estado de lactación de los animales. En la incidencia de IIM durante la lactación se destaca también, la gran variabilidad encontrada entre explotaciones (desde un 9 hasta un 50%). Ninguno de los factores estudiados influyó significativamente sobre este parámetro.

Los valores medios de prevalencia e incidencia en las explotaciones muestreadas de ganado raza Carora han sido, en general, superiores a los observados en otros países que están desarrollo, en el entorno han sido insuficientes las estrategias para disminuir los problemas en la glándula mamaria. Por tanto, sería deseable que en las explotaciones estudiadas (y en general para toda la raza y todas las explotaciones lecheras de Venezuela) se establecieran actuaciones para decrecer la prevalencia e incidencia de IIM, y que estarían basadas en que los técnicos de campo, junto a los ganaderos deberían establecer programas de control de mastitis operativos y adaptados a las peculiaridades de las explotaciones en general.