Mastitis subclínica y conteo de células somáticas

Estimado sColegas. Muchas gracias por sus comentarios e interés con respecto al artículo propuesto. Solo una precisión a nuestro colega Mauro Carrasco. El Porta SCC si bien es cierto la prueba dura 45 minutos. Este método nos proporciona un dato numérico muy útil en el monitoreo del conteo de CCSS, mientras que el CMT solo nos proporciona un resultado subjetivo. En algunos establos en el Perú se viene trabajando rutinariamente la prueba del Porta SCC ( cada quince días ) con excelentes resultados en la prevención de mastitis clínica y en la reducción de la incidencia de mastitis subclínica.

En nuestra empresa contamos con un contador de celulas somaticas que hace un conteo diferencial de leucocitos. La prueba dura 3 min y se realiza por cuartos. Algo muy importante que nadie a mensionado es la evaluacion de la punta del pezon y manejo del medio ambiente donde la descanza...

Saludos Ing. Carrión y muchas gracias por compartir con nosotros este estudio, para realizar prevención y control de mastitis subclínica que tanto necesitamos tanto los productores de leche como los que trabajamos en esta linea de investigación. Mi opinión sobre el método de PortaSCC, es que debido al tiempo que debe esperarse de 45 minutos, debe ser recomendado para análisis de muestras a nivel de laboratorio y no como método para diagnostico a nivel de ordeño de la vaca, como si se puede usar la Prueba de CMT. Ambas pruebas de diagnostico tienen las siguientes desventajas. 1. La determinación del Contage de células somáticas es subjetiva, ya que no dan una cantidad real sino un promedio 2. la Prueba de PortaSCC, basa su diagnostico en un cambio en una coloración azul que al ser mas intensa mayor es el Recuento de células y el CMT lo hace relacionando coagulación, lo cual también es un subjetividad de ambas metodologías 3. Las dos pruebas deben ser realizadas por personal capacitado o expertos en la materia de mastitis, sin embargo como ya lo han comentado otros foristas son metodologías que deben ser incorporadas al diagnósticos de la mastitis bovina. Saludos Mauro Carrasco

Una buena mirada al problema de la mastitis, y un buen intento de vender (en el mejor término de la palabra) el problema de las pérdidads económicas, pero hay algo que es cierto aun, y es que el CMT con todas sus desventjas sigue brindando información al pie de la vaca y que adecuadamente tabulado es un instrumento de medida de la MSC, tema al que muchos de nuestro ganaderos no le están prestando atención. No dudo de las bondades del producto que se promociona, pero también tiene limitaciones, como el no poder trabajar mucahas muestras en corto tiempo, como el que sea un método colorimétrico que igual puede caer en la subjetividad, aunque cuente con el lector, el tener que esperar 45 minutos en un juego de tiras, que teniendo la pericia del caso se puede llegar a establecer una metodología de trabajo que acelere el tiempo requerido para la obtención de los resultados, sigue siendo una desventaja. En buena cuenta me hubiera gustado saber sobre el comportamiento del método en nuestro medio, que tiene contajes de CS mas altas, pero en adelante lo iremos probando. Saludos.

Interesante tema, de gran trascendencia para productores y profesionales del ramo. La Sanidad dentro del establo, uno de los factores más importantes en la producción de leche, aqui se ganan o se pierden premios. El cheque por venta de leche es el factor más importante en los ingresos del productor, ese cheque es el que paga las facturas. Saludos y Felicidades.

felicidades, buen articulo

saludos. Mi estimado hasta pronto Recuento de células somáticas según Prescott – Breed. Muestra: la muestra que se obtiene debe ser representativa del total de la leche que se desea analizar (vaca, tacho, tanque, etc). Debe ser previamente homogeneizada en forma manual o automática (las células somáticas ascienden a la superficie con los glóbulos grasos!!!) Las muestras deben ser obtenidas con material limpio. No es necesario que sean estériles si se utilizan solamente para el recuento de células. Si la muestra se utiliza para hacer análisis microbiológicos debe ser estéril. Una vez obtenida la muestra se transporta hacia el laboratorio en una conservadora con hielo y en ese estado (refrigerada a 4ºC) si es solamente para recuento de células somáticas puede conservarse durante 24 h. El agregado de conservantes com dicromato de potasio o ácido bórico, etc, mejora la conservación. Resumen: este método se toma como referencia para calibrar todos los demás equipos o instrumentos para contar células somáticas. Asimismo puede ser utilizado para hacer recuentos cuando las muestras no son numerosas. Es el método mas exacto. Se hacen dos extendidos de 0,01 ml y de 1 cm2 cada uno sobre un portaobjetos limpio y desengrasado.Se seca, se desengrasa, se colorea y se hace el recuento. Se saca el promedio de células por campo microscópico contado y se lo multiplica por el factor microscópico (FM) con lo cual se obtiene el número de células somáticas por ml de leche. Reactivos: se puede usar cualquiera de las dos soluciones. a) Solución alcoholica de azul de metileno: Azul de metileno ..................... 0,3 gr Alcohol 96º ............................. 30 ml Agua destilada........................ 100 ml Se mezcla el azul de metileno con los 30 ml de alcohol y se agregan los 100 ml de agua destilada. Es conveniente filtrar la solución con papel de filtro a los efectos de extraer sedimentos y sustancias extrañas que dificultan la lectura. b) Solución Breed: Azul de metileno ..................... 0,6 gr. Alcohol etílico 96º .................. 54,0 ml Tetracloroetano ....................... 40,0 ml Acido acético .......................... 6,0 ml Se mezcla el alcohol etílico y el tetracloroetano en un frasco y se calienta en baño de agua a 60 –70 ºC. Después de agregar el azul de metileno se mezclan bien. Seguidamente se enfría a 4ºC y se agrega el ácido acético. Se filtra con un filtro plegado (de10 – 12um). Se guarda tapado herméticamente el frasco. Antes de usarlo, si es necesario debe filtrarse nuevamente. Solución desengrasante y fijadora: Alcohol 96º ...............................100 ml Xilol .......................................... 100 ml Se mezclan en partes iguales. Material: - Microscopio con lente de inmersión. - Micropipeta de 0,01 microlitros. - Portaobjetos. - Ansa recto. - Guía con 2 superficies de 1 cm2 cada una. - Baño de agua de 40ºC. - Estufa de cultivo. - Alcohol, algodón. - Reactivos. Técnica operatoria: La muestra de leche se termiza a 40ºC en baño de agua para poder homogeneizar la muestra. Esto se hace invirtiendo el frasco repetidamente durante 20 segundos y luego se se enfría a la temperatura de uso que indica la micropipeta (20ºC). El portaobjetos se limpia y desengrasa con alcohol y se seca con algodón o papel libre de partículas y polvo. Extendido: se coloca el portaobjetos sobre la guía.Con la micropipeta se aspira y se sopla repetidamente la muestra de leche a los efectos de” homogeneizar”el interior de la misma ( si no hacemos esto, algunas células somáticas quedarán adheridas a las paredes de la pipeta y por lo tanto el resultado será erróneo). Se aspiran luego 0,01 ml de la muestra de leche homogeneizada( se deben aspirar mas de 0,01 ml), se limpian las paredes de la pipeta con un algodón (si no lo hacemos la muestra de leche que queda adherida a la parte externa de la pipeta se mezcla con la leche que se va a analizar!), se enrasa hasta 0,01 ml colocando un algodón en el extremo de la micropipeta. Luego se depositan 0,01 ml sobre cada uno de los 2 cm2 guía vaciando completamente la micropipeta. Se hace el extendido utilizando un ansa recto. A continuación se seca sobre una superficie perfectamente horizontal. Para ello es conveniente utilizar una estufa para que el secado sea mas rápido. Luego se fija y se desengrasa con la solución alcohol-xilol durante 5 – 10 minutos. Se deja escurrir la solución y sin lavarlo se tiñe con la solución alcoholica de azul de metileno durante 40 segundos.Se lava, se seca en estufa y se hace la lectura. Si se utiliza la solución Breed, se sumerge durante 10 minutos el portaobjetos en la solución. Se lava se seva y se lee. Recuento: el extendido se lee con lente de inmersión (aceite de cedro). De cada uno de los dos extendidos de un cm2 que vamos a tener en un portaobjetos, se cuentan entre 20 y 50 campos (la mitad en forma horizontal y la otra mitad en forma vertical). Por lo tanto de cada muestra de leche contamos entre 40 y 100 campos microscópicos. El total de las células somaticas contadas se dividen por el número de campos micrscópicos contados lo que nos va a dar el promedio de células somáticas por campo. Ese promedio se lo multiplica por el factor microscópico (FM) y así obtenemos el número de células somáticas por ml de leche. Factor microscópico: se obtiene midiendo el diámetro del campo microscópico con un micrómetro de platina. La fórmula es la siguiente: FM = 10.000 3,14 x r2

Felicitaciones por los trabajos realizados sobre la mastitis, mas, de verdad quisiera pedirle ayuda sobre un método acerca del conteo o recuento de células somáticas de forma que pueda trabajar solo con el microscopio. Mucho agadecere vuestra disposicon

Estimados colegas, definitivamente, no hay dos establos iguales como para igualar condiciones y resultados.Tenemos grupos de vacas con valoración indivual Los estandares de los reactivos comerciales de la CMT y el desarrollo del gel formado influyen mucho en la apreciacion del resultado, existe una capacidad reologica y medible. En alemania se esta trabajando sobre este aspecto para mejorar esta prueba tan economica y no tarda en detonar comercialmente con la intención de terminar con tantas controversias o cuando menos dar un enfoque mas real del gel formado y su clasificación. por otro lado, llevar y tener los datos mes con mes ofrece muchas garantías sobre la permanencia de las vacas en el establo o su segregación en un futuro. La correlación de la CMT y el trabajar con el contador de celulas por vaca o por cuarto, resulta interesante al cruzar esta información porque las dos son íntimas en el resultado y llevando un acumulado de respuestas durante un periodo de tiempo permite ver que las que permanecen subclinicas no tardaran en caer en vacas clínicas, a menos que de mes en mes y no mas allá de 3 resultados positivos en la CMT o por arriba de las 400,000 y en un sentido mas estricto por arriba de las 200,000 sean revisadas por medios diagnosticos que se tengan a la mano. Claro que ambas pruebas son subjetivas o indirectas y de gran valor y cerrar el circulo con las bacteriologicas para poner nombre y apellido a las bacterias, incluso hasta el PCR. Hasta aquí dejariamos cubierto el valor diagnostico para encontrar el valor epidemiologico de la vida de las vacas y plantearnos las estrategias para reducir la mastitis subclínica a un mínimo posible y como siempre el manejo se lleva gran parte de estas soluciones a los problemas presentes en cada establo. ¿que tal si ayudamos a las vacas a mejorar el trajecito que llevan puesto, estoy hablando de la "inmunidad innata", donde la respuesta secundaria es exactamenete igual que la primaria y con mucho manejo lograremos mejoras en el futuro de las vacas. Saludos respetuosamente.

Todo o referente a la mastitis subclínica y el conteo de celulas somáticas, eso lo tenemos claro, donde aún radica nuestra duda es referente en el momento de - aplicar los tratamiento para estas vacas con grado 2 o grado 3, . Digo esto porque hay investigadores que recomiendan realizar los tratamientos con antib. inmediatamente de tener los resultados (previo cultivo y antibiograma) y otros- recomiendan realizar éstos al momento de la seca. Saludos.