Respuesta metabólica (silimarina 35 ppm) sobre la calidad del huevo en ponedoras comerciales con síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS)

Introducción

La Producción avícola colombiana en general y en particular el reglón de la producción de huevo han presentado un crecimiento del 3.5%, con una población de aves encasetadas de 45.265.000 con un consumo percapita en 2021 de 334 huevos / persona año [1]. Utilizando un modelo de proyección de correlación entre el crecimiento anual dado por la ecuación Y=470.7(X)+5226.4 con un R²=0.955 en el año 2030 la producción anual de huevos pasara de 17.000 mil millones de huevos año a 19.000 mil millones, con un consumo percapita de 359 huevos /persona /año [1]. Dentro de los sistemas de producción de huevos la metodología de producción en jaula se ha impuesto en la 2 ultimas décadas en la mayoría de los países, Mench & Rodenburg, (2018) [2], concluyeron que el 90% de los huevos producidos en el mundo eran bajo el sistema de producción en jaulas, Varios estudios han demostrado que algunas enfermedades están asociadas a el sistema de alojamiento, Julian, (2005) [3], Leeson (2007) [4], informo que algunos desordenes metabólicos de las aves incluyendo El síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS-por sus siglas en ingles), esta asociado con el sistema de encasetamiento.

El síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS), es un trastorno metabólico (no infeccioso) que se presenta en las gallinas ponedoras, caracterizado por una acumulación excesiva de grasa en el hígado, en la cavidad abdominal, se presenta ruptura de la capsula hepática y muerte súbita [5]. Las aves con FLHS son muy difíciles de diferenciar de las aves sanas, igualmente se presenta una disminución den la producción de huevos concomitantemente con una afectación en la calidad de los mismos, aumento en el peso promedio corporal de la parvada y mortalidad [3, 4]. En las aves los lípidos y los triglicéridos son almacenados en los hepatocitos, adipocitos y ovocitos en crecimiento [6]. El almacenamiento de los triglicéridos en estos órganos depende de la biodisponibilidad de un sustrato lipídico plasmático procedente de la dieta o de la lipogenesis del hígado, los lípidos hepáticos e intestinales se ensamblan como lipoproteínas, el almacenamiento en los ovocitos esta asociada a la vitalogenesis [7], La acumulación excesiva de grasa causa esteatosis hepática y síndrome de hígado graso hemorrágico [6]. Salazar, J .,(2021) [8], siguiere que la inhibición de la síntesis de DNA y RNA que causan los aductos provenientes de la micotoxinas alteran la estructura de la membrana lipídica que pueden generar cambios en la lipolisis causando lipoeroxidacion hepática, por otro lado Shini et al.,(2019) [9] en un estudio de prevalencia en Australia demostró que la incidencia de FLHS en aves entre las 29 a 73 semanas de edad con manejo en jaulas estaba en un rango entre 17 a 46%.

La silimarina es un extracto purificado de la semilla del Sylibum marianum el cual contiene una mezcla de flavonoides como la silibina, isosilibina, silidianina y silicristina como ingredientes activos [10], La silimarina actúa como un potente bloqueador de la producción de radicales libres que inhibe la lipoperoxidacion de las grasas y proteínas al mejorar la actividad de las enzimas antioxidantes endógenas y los antioxidantes no enzimáticos (Vitamina E y C) en el hígado y los tejidos musculares [11], Quarantelli et al., (2009) [12], reporto una mejora en la producción y en la calidad de los huevos al incluir silimarina en la dieta a una dosis de 200 mg/k, Por lo tanto la silimarina puede mejorar los valores de estrés oxidativo y a la vez mejorar la calidad de huevo frescos o almacenados en aves asociadas a problemas de hígado graso [13].

Con base en los estudios antes mencionados el objetivo de este trabajo de investigación es evaluar el producto Liver Free que contiene (Extracto de Sylibum marianum 10g), sobre la respuesta en la calidad de los huevos (Resistencia y Unidades Haugh).

Materiales y métodos

Liver free - Composición
Se uso el suplemento nutricional Liver Free, de características cristalinas, de color blanco con la siguiente composición (Extracto de Sylibum marianum 10g, lecitina de soya 30g (Silimarina lecitinizada), Extracto de Cynara scolymus 25g, DL-Metionina 5g, Excipientes C.S.P 100g), La silimarina es utilizada como un coadyudante en el tratamiento de las afecciones hepáticas (actividad hepatoprotectora), posee una actividad antioxidante, e inmunomoduladora, La lecitina de soya contenida en este producto además de mejorar la absorción de la silimarina , es una mezcla de fosfolípidos que son claves en la síntesis de la membrana celular y es una fuente de cloruro de colina que tiene una actividad lipotropica favoreciendo la movilización de las grasas hepáticas que evitan la esteatosis, El extracto de Cynara scolymus tiene una acción como colerético y colagogo , hipolipemiante y hepatoprotector, Y la metionina es un aminoácido esencial que es un intermediario de la biosíntesis de cisteína, carnitina, taurina, fosfatidilcolina entre otros, que adicionalmente cumple una función como el precursor del glutatión (actúa como antioxidante endógeno)

Características de la granja
La prueba se realizo en una granja de ponedoras comerciales, Granja Avícola Alejandría, ubicada en el municipio de Jamundí (Valle del cauca), con una población de 200.000 mil ponedoras comerciales, con sistemas de producción mixto en piso y en jaulas, la temperatura promedio durante fue de 29.3 °C, con agua de pozo.

Aves
Se evaluaron las aves encasetadas en jaulas del galpón 6-1, 6-2 que contienen 24.000 aves de la raza Isa Brawn de 96 semanas de edad, con un peso promedio de 2050 gramos y una uniformidad del 76% , ala necropsia presentaron sintomatología clínica de síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS)(Ver imagen No. 1), presentando una mortalidad semanal del 2.44%. En esta caseta se uso Liver free a una dosis de 350 g/ton de alimento por 60 dias. El galpón 7-1, 7-2 que tiene una población de 20.000 aves Isa Brawn de 86 semanas de edad fue usado como grupo control.

Huevos
Se recolectaron 180 huevos (90 grupo tratamiento -90 grupo control negativo) en un periodo de una semana posterior a los 60 dias de consumo del Liver free, se enviaron a el laboratorio de control de calidad Sincro Service en diferentes tiempos de recolección (EGG
QUALITY CONCEPT), donde se evaluaron las siguientes variables de calidad de huevo: espesor de la cascara (milímetros), Resistencia de la cascara a la fractura (Newtons), Unidades Haugh (UH)-mide la frescura del huevo.

Análisis Estadístico

El presente trabajo se realizo en tres fases, la primera se evalaron las medidas de tendencia central, medidas de variabilidad e inferencia estadística para medias poblacionales con un nivel de confianza del 95% con función entre Resistencia en Newton y Unidades Haugh, el segundo se realizo una Correlación de Person entre ambas variables, y el ultimo fue un diseño experimental completamente aleatorio con pruebas comparativass de Tukey, usando el programa SAS versión 2020.

Imagen No.1. Imagenes hígado graso hemorrágico galpón 6-1.

Respuesta metabolica (silimarina 35 ppm) sobre la calidad del huevo en ponedoras comerciales con sindrome de higado graso hemorragico (FLHS) - Image 1

(a) Deposison grasa en cavidad abdominal G6-1 (Fotografías propiedad Salazar)

(b) Mesenterio graso G6-1 (Fotografías propiedad Salazar)

(d) Ruptura capsula hepática G6-1 (Fotografías propiedad Salazar)

(e) Ovoperitonitis por hígado graso (Fotografías propiedad Salazar)

Resultados

Resistencia de la cascara (Newtons)

Cuadro No1. Respuesta del uso de Liver Free 350 g/ton por 60 dias sobre la Resistencia de la Cascara (Newtons) en aves de 96 semanas de edad, Positivas a síndrome de hígado graso hemorrágico(FLHS).

^{Un asterisco(*)= Diferencia significativa, Dos **= Diferencia altamente significativa}

Para el caso de resistencia de cascara los valores de el uso de Liver Free reportan un promedio de 44.26 Nwt, con una desviación standart de 7.99 , un CV% de 17.96% indicando una ligera heterogeidad en los niveles de respuesta, y un valor de P= 0.00427 que ratifica una diferencia estadística significativa comparados con el control negativo; que da un promedio de 43.12 Nwt, desviación standart de 6.15 y un CV% de 14.33% siendo mas homogéneo en los niveles de respuesta y un valor de P= 0.0012 que establece una diferencia significativa comparada con el valor que pide la línea, por la prueba comparativa de Tukey entre los tratamientos, se observa un valor de P=0.017** que es altamente significativo para la variable resistencia a favor del tratamiento con Liver Free al compararlo entre el grupo control negativo y el que pide la referencia de la línea.

Imagen No1. Respuesta del uso de Liver Free 350 g/ton por 60 dias sobre la Resistencia de la Cascara (Newtons) (Pruebas comparativas entre tratamientos por Tukey).

^{Super índices con letras diferentes indican diferencia significativa}

Unidades Haugh (UH)

Imagen No.2 . Respuesta del uso de Liver Free 350 g/ton por 60 dias sobre las Unidades Haugh(HU),en aves de 96 semanas de edad, Positivas a síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS).

^{Super índices con letras diferentes indican diferencia significativa}

Para el caso del tratamiento con Liver Free 350 g/ton , Las Unidades Haugh presentan un promedio de 72,1963, con una desviación standart de 10.705 y un CV% de 14.891, indicando homogeneidad en los niveles de respuesta con P= 0.01212* demostrando una diferencia estadística significativa , esto comparado con los valores del control negativo (no uso del Liver Free) que presenta un promedio de 64.4243, con una desviación standart de 11.148 Unidades Huugh y un coeficiente de variación del 17.3051 indicando una ligera heterogeneidad en los datos, dado lo anterior se realizo el análisis de varianza para Unidades Haugh por la prueba comparativa entre los tratamiento por la prueba de tukey.

Cuadro No.2 Análisis de Varianza para UNIDADES HAUGH - Suma de Cuadrados Tipo III

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^{** Efecto Altamente Significativo.}

Se aprecia que hay efecto altamente significativo al comparar los tratamientos donde el efecto de usar Liveer Free arroja mayores unidades haugh comparado con el grupo control y el de la referencia de la línea por lo tanto el valor de P=0.0011** deduce que hay diferencia altamente significativa al comparar los tres tratamientos.

Imagen No 3. Grafica comparativa del uso de Liver Free en Unidades Haugh , utilizando la prueba comparativa de Tukey entre los tres tratamientos en un periodo de 60 dias de uso.

Por último realizamos un análisis de correlación multivariante entre las variables resistencia Vs unidades haugh(UH), Por el cuadrado de Person, con el objetivo de determinar si al mejorar la calidad de la albumina (Unidades Haugh) mejoraba consecuentemente la resistencia de la cascara y utilizamos el análisis de bioestadística de la siguiente manera:

Índice de Correlación de Person (ICP):

Cuadro No 3. Correlación del análisis del cuadrado de Person.

El valor que arrojo la correlación de person es de P=0.1152 , es NO significativa, concluyendo que la formación de la albumina y la clara no tiene nada que ver con la deposison de el calcio para formar la cascara son dos factores biológicos que funcionan posiblemente como compartimentos individuales.

Conclusiones

Los análisis arrojan que la resistencia de la cascara de los huevos (Nwt) es significativamente superior al usar Liver Free a una dosis de 350 g/ton por 60 dias en aves que presentan sintomatología asociada al síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS), en aves de 96 semanas de edad.

Para la variable Unidades Haugh (UH), que mide la frescura de los huevos el tratamiento de 350 g/ton durante 60 dias arrojo una diferencia altamente significativa a favor al comparar los tres tratamientos.

Al realizar un análisis de correlación multivariante entre las dos variables (Resistencia de la cascara Vs Unidades Haugh), para determinar si una era causa de la otra, no se aprecia una correlación directa de causalidad entre las dos variables.

El tratamiento comparativo por la prueba de Tukey se concluye que el uso de Liver Free a 350 g/ton mayor a 60 dias de consumo mejora el desempeño para ambas variables analizadas (Resistencia de cascara (Nwt) y Unidades Haugh), y que en ambos casos se aprecia un efecto altamente significativo al usar silimarina lecitinizada como un antioxidante en la dieta de alves adultas y de alto reto metabólico a síndrome de hígado graso hemorrágico.

Discusión

Se condujo un trabajo de investigación para evaluar la capacidad antioxidante de la silimarina (Sylibum marianum),la capacidad colerético colagoga del extracto de alcachofa como barredor de grasas hepáticas, de la metionina y los fosfolípidos como coadyudante en el proceso del metabolismo de las grasas, contenidos en el producto Liver Free (Marca comercial de Biotecno-Colombia), En aves comerciales de 96 semanas de edad positivas a FLHS donde se evaluo la calidad de los huevos de tres tratamientos en bloques completamente al azar con manejo en jaulas en el departamento del valle del cauca; y con una energía metabolizable de 2.950 Kcal, temperatura promedio por encima de los 29°C. con disminución de la calidad del huevo específicamente por roturas huevo con clara y yema muy liquidos, La característica de las aves con respecto a la edad en aves adultas con presentación clínica de FLHS.esta condición se presenta con mayor prevalencia en aves mares de 80 semanas de producción como lo demostró Weitzenburger et al., (2005) [14]. Por otro lado el cambio metabólico del síndrome de hígado graso igualmente altera la ovoposición por alterar el metabolismo hepático de las grasas, deteriorando la calidad de los huevos e igualmente disminuyendo el porcentaje de producción como lo demostró Lesson, 2012 [15]; Julian 2005 [3]; Lesson 2007[4], para controlorar los desordenes metabólicos, y las afecciones causadas en el hígado y consecuentemente la calidad de los huevos (Resistencia, Unidades Haugh) se usan mezclas de productos herbales los cuales contienen silimarina para disminuir el efecto toxico causado por la lipoperoxidacion como el reportado por Faryadi, S., et al (2021) [16], al usar 200 ppm de silimarina lecitinizada (Una mezcal de silimarina con lecitina de soya-para mejorar la absorción de la silimarina), las unidades haugh en promedio fueron 83.5 comparadas con 72.19 en este trabajo, pero hay que tener en cuenta en estas aves su edad 96 semanas de vida y el efecto critico de el síndrome de hígado graso hemorrágico es muy fuerte para que afecta la conformación del huevo, de igual manera se reporta la producción de Malondialdehido (mg/g Yema de Huevo), esta formación es explicada por Salazar, J .,(2021) [8], y Faryadi, S., et al (2021) [16] Al usar silimarina lecitinizaada a 200 ppm reporta 0.275 (mg/g Yema de Huevo) vs 0.312 para silimarina en polvo o 0.302 para nano silimarina; demostrando un efecto antioxidante sobre la yema de huevo cuando se usa una dosis de 200 mg/k (P=0.0126). El efecto de le dosis de silimarina en este trabajo fue de 22.12 mg/kg durante 60 dias del experimento lo que arrojo una mejora en las unidades haugh de 72,16 y un a resistencia de cascara de 44 Nwt comparado con un grupo control negativo (P< 0.05), igualmente Quarantelli, et al.,(2009) [12] reporto mejoras en la la producción de huevos, en la calidad de huevos y en la conversión al dosificar silimarina a una dosis de 200mg/k, en otro estudio Hashemi Habar et al.,(2018) [17] reporto que a una dosis de 30mg/k se incremento la producción de huevos y disminuyo la conversión, Statsnik, et al., (2019)[18] mostro que usando una dosis de 70mg/k de cardo mariano en aves manejadas en jaulas, mejora la masa de huevos.

El efecto sobre la mejora en la calidad de huevos reportado en este trabajo de la silimarina lecitinizada es confirmado por Quarantelli, et al.,(2009) [12]; Faryadi, S., et al (2021) [16], donde se incrementa la masa de huevo que se va a ver reflejada en la unidades haugh, los buenos resultados sobre la calidad de huevo pueden ser explicados por que el complejo de silimarina-fosfolípidos (silimarina con lecitina de soya, contenida en el Liver Free) es mas biodisponible comparada con un extracto de silimarina únicamente como lo demuestra Faryadi, S., et al (2021) [16] logrando una mejora sustancial cuando cruza las membranas lipídicas celulares que finalmente mejoran la circulación sistémica de la silimarina [19-20] En conclusión nuestros resultados sugieren que la silimarina lecitinizada mejora la producción y la calidad de los huevos logrando una mejora en la absorción y metabolismo de la silimarina.

^{Información vinculada: Radicales Libres, Stress Oxidativo y Lipoperoxidacion, Consecuencias de la Micotoxicosis en las Aves - 1ª parte}

Respuesta metabólica (silimarina 35 ppm) sobre la calidad del huevo en ponedoras comerciales con síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS)

LIVER FREE