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China - Salmonella: Detección rápida y fácil en matrices alimentarias mediante RPA-CRISPR/Cas12a

Publicado: 1 de noviembre de 2022
Fuente: sciencedirect.com / Engormix.com
Se ha establecido un método RPA-CRISPR/Cas12a para la detección rápida de Salmonella. La sensibilidad de este método para las muestras de huevo enriquecidas a un nivel de 101 CFU/mL. La detección completa podría completarse en 4 h, incluido el pretratamiento de la muestra y el enriquecimiento de 3 h.
Las especies de Salmonella son bacterias patógenas comunes transmitidas por los alimentos. En la actualidad, la mayoría de esos métodos de detección de Salmonella son métodos microbiológicos que requieren de 4 a 7 días. Por lo tanto, los métodos requieren mucho tiempo y mano de obra, por lo que no son adecuados para la detección in situ de Salmonella . Se han desarrollado varias tecnologías y métodos de detección rápida de Salmonella.
La aparición del sistema CRISPR-Cas ofrece una nueva técnica para el diagnóstico rápido. El sistema CRISPR/Cas9, que se utiliza como una herramienta avanzada de edición de genes, se desarrolla a partir de matrices de repeticiones palindrómicas cortas (CRISPR) agrupadas y regularmente interespaciadas, que son componentes del sistema de defensa bacteriano contra los virus. 

En un estudio realizado por desarrolló por los investigadores de la Facultad de Ciencias de la Alimentación, Universidad Agrícola del Sur de China Li Liu, Gang Zhao, Xiangmei Li, Zhenlin Xu, Hongtao Lei y Xing Shen sobre un método novedoso de detección in situ de Salmonella en alimentos mediante la combinación del sistema CRISPR/Cas12a con amplificación de polimerasa recombinante (RPA).
El método no mostró reactividad cruzada con 4 bacterias patógenas comunes. Se usó un método de ebullición simple para pretratar muestras de pollo y huevo para cumplir con los requisitos de prueba en el sitio. Los límites de detección de las muestras de pollo y huevo eran de 103 CFU/mL inicialmente y podían alcanzar 102 CFU/mL y 101 CFU/mL, respectivamente, después de 3 h de enriquecimiento a 37 °C. La sensibilidad del método RPA-CRISPR/Cas12a fue comparable a la de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (qPCR). Además, el funcionamiento de este método es más sencillo y rápido que el qPCR. Por tanto, el método es aplicable a la detección in situ de Salmonella en alimentos.
 
 

Extraido y traducido de: Li Liu, Gang Zhao, Xiangmei Li, Zhenlin Xu, Hongtao Lei, Xing Shen, Development of rapid and easy detection of Salmonella in food matrics using RPA-CRISPR/Cas12a method, LWT, Volume 162, 2022, 113443, ISSN 0023-6438,
https://doi.org/10.1016/j.lwt.2022.113443. (https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0023643822003784)
 
Fuente
sciencedirect.com / Engormix.com
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