Argentina - Farvet en Simposio Latinoamericano de Tecnología de Cultivos Celulares

FARVET participó en el "Simposium Latinoamericano de Tecnología de Cultivos Celulares" que se desarrolló del 25 al 28 de Octubre pasado en Santa Fé, Argentina.

Para este importante evento, FARVET participó en la ponencia: "EVALUACIÓN DE LA CARGA VIRAL, VIABILIDAD CELULAR y APOPTOSIS EN CELULAS DF-1 INFECTADAS CON EL VIRUS DE LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE (NDV) UTILIZANDO FLUIDO ALANTOIDEO DE HUEVOS EMBRIONADOS DE POLLO COMO SUPLEMENTO DE CULTIVO" la que estuvo a cargo del Biologo José Torriani, responsable del Laboratorio de Cultivo Celular y Virología de FARVET, siendo el único peruano expositor de un trabajo de investigación en este Simposio. Dicho trabajo, fue realizado en colaboración con el Laboratorio de Biología Molecular y Genómica y el Laboratorio de Inmunología Celular y Molecular.

Resumen de la charla:

EVALUACION DE LA CARGA VIRAL, VIABILIDAD CELULAR Y APOPTOSIS EN CELULAS DF-1 INFECTADAS CON EL VIRUS DE LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE (NDV) UTILIZANDO FLUIDO ALANTOIDEO DE HUEVOS EMBRIONADOS DE POLLO COMO SUPLEMENTO DE CULTIVO

Torriani José¹; Best Iván²; Medina Waldo²; Tataje Luis³; Pauyac Katherine¹; Choque Luz¹; Fernández-Sanchez Manolo^1,2,3; Fernández-Díaz Manolo^1,2,3

¹Laboratorio de Cultivo Celular y Virología; ²Laboratorio de Inmunología Celular y Molecular; ³Laboratorio de Biotecnología Molecular y Genómica
Farmacológicos Veterinarios (FARVET)

La enfermedad de Newcastle (NDV) es una de las enfermedades más contagiosas y devastadoras en avicultura. Comúnmente, las vacunas para NDV se producen en huevos embrionados de pollo, un método que tiene la desventaja de ser laborioso y utilizar grandes cantidades de este material. Una alternativa es utilizar líneas celulares, las cuales permiten una producción más rápida y a gran escala de antígenos virales. Durante la infección con NDV, se ha descrito que la suplementación con fluido alantoideo favorece la infectividad y patogenicidad del virus.

El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la suplementación con fluido alantoideo sobre el tiempo óptimo para realizar la cosecha de antígeno viral.

La producción de antígeno fue monitoreada durante 7 días en 2 grupos de células DF-1 infectadas con un NDV lentogénico a una multiplicidad de infección (MOI) de 3.5. El grupo I fue suplementado con fluido alantoideo al 3.5%, mientras que el grupo II no recibió suplementación. El número de copias/µl de NDV fue cuantificado por PCR en Tiempo Real. La viabilidad celular y apoptosis fueron evaluadas en porcentaje por Citometría de Flujo utilizando 7-Aminoactinomicina D (7-AAD) y PO-PRO-1, respectivamente.

Desde el día 3 post-infección la viabilidad celular disminuyó progresivamente en el grupo I (67.1%) obteniéndose una disminución máxima de viabilidad en el día 6 post-infección (19.0%). La mínima viabilidad celular obtenida en el grupo II fue de 43.1%. Coincidentemente, en el día 3 post-infección se obtuvo la mayor carga de antígeno viral (4.13x10⁷ copias/ul) en el grupo I, mientras que en el grupo II el pico más alto de carga viral (4.19x10⁷ copias/ul) fue observado al día 5 post-infección. No se observaron mayores diferencias en la inducción de apoptosis entre el grupo I y II.

Nuestros resultados sugieren que la suplementación con fluido alantoideo favorece la infectividad del NDV y disminuye el tiempo óptimo para realizar la cosecha celular al día 3 post-infección.

Además, del 29 de Octubre al 09 Noviembre del 2012, FARVET participó en el curso de Postgrado: "Tecnologías de Cultivos de Células Animales" en Santa Fé, con una beca integral otorgada por la Universidad Nacional del Litoral, al Blgo. José Torriani.