Evaluación de "time-kill" del producto Sal CURB® RM Extra, a dosis de 2kg/t. sobre Enterobacteriaceae y Salmonella typhimurium en condiciones in vitro

Uno de los patógenos más comunes que se encuentran en las especies animales es Salmonella spp., Una enterobacteria gramnegativa. Su control debe establecerse lo antes posible en la cadena de producción de alimentos, a partir de las materias primas destinadas a la producción de piensos.

Las medidas de control en las fábricas de harinas, trituradoras de harina de soja y fábricas de piensos son fundamentales para la seguridad microbiológica de los alimentos, asegurando la salud intestinal de los animales y las personas que se alimentan de productos animales.

CURB® RM Extra Liquid Salt es un aditivo conservante desarrollado por Kemin, a base de formaldehído y ácidos orgánicos, una combinación sinérgica que brinda una respuesta rápida, mientras busca acidificar y estabilizar el medio ambiente.

Objetivo

Evaluar la efectividad de prototipos del producto Sal CURB® RM Mill en la inactivación de Enterobacteriaceae y S. typhimurium en condiciones in vitro, considerando una dosis mínima, en diferentes momentos.

Materiales y métodos

La prueba se llevó a cabo en un laboratorio para evaluar la inactivación de patógenos con el producto Sal CURB® RM Extra, en agua desionizada estéril contra un charco de enterobacterias y S. typhimurium aislado del campo, contra el control positivo y el producto Sal CURB RM Extra, a lo largo del tiempo.

Desafío: Enterobacteriaceae (EB) y S. typhimurium (ST) a una concentración de 1 x 105 UFC/g (unidades formadoras de colonias por gramo de muestra), cultivos de campo aislados.

Tratamientos: Los productos se diluyeron en agua desionizada estéril a diferentes concentraciones como se muestra en la Tabla 01.

Tabla 01: Productos evaluados, tiempos de dosificación y cuantificación.

Luego de realizar las diferentes diluciones, se distribuyeron en tubos estériles (9 mL) y luego se añadió 1 mL de cultivos de prueba a una concentración de 1 x 105 UFC/mL. Luego, los medios se homogeneizaron y se dejaron en contacto durante 1h, 6h y 24h (producto x bacteria), a temperatura ambiente.

La tabla 02 muestra la descripción de los tratamientos.

Tabla 02: Descripción de tratamientos

Después de los tiempos de contacto, se realizaron diluciones en serie, sembradas usando la técnica de vertido en placa sobre Agar PCA (Agar estándar para el recuento). Las placas se incubaron a 36 ± 1ºC durante 48 h. En las mismas condiciones que los procedimientos anteriores, se realizó un control positivo de los cultivos de prueba (EB y ST), dejándolos en contacto con agua destilada estéril durante un tiempo de prueba establecido (1, 6 y 24 horas). Todos los análisis se realizaron por triplicado.

Resultados^2,3

Los resultados del recuento de Enterobacteriaceae y S. tiphymurium en UFC/g después de los tiempos de contacto, así como la media del triplicado y el pH del medio, se presentan en las Tablas 03 y 04, como se muestra a continuación.

Tabla 03: Acidez media, cuantificación de UFC/mL y media UFC/mL de triplicado/tiempo/tratamiento para Enterobacteriaceae.

UFC/ml: Unidad formadora de colonias por mililitro de muestra

Tabla 04 Acidez media, cuantificación de UFC/mL y media UFC/mL de triplicado/tiempo/tratamiento para S. tiphymurium.

^{pH*- medición realizada inmediatamente después de la dilución de los productos}
^{UFC/ml: Unidad formadora de colonias por mililitro de muestra}

Ausencia - significa que no hay células bacterianas viables en el análisis de la presencia/ausencia de Salmonella spp.

Los resultados anteriores demuestran que en el tratamiento con el producto Sal CURB® RM Extra, tanto para EB como para ST, hubo una marcada acidificación del medio y, aunque el valor de pH mínimo de crecimiento (pHmin) es variable, las salmonelas apenas logran crecer y desarrollarse en ambientes con valores de pH por debajo de 4.0, induciendo su pérdida de viabilidad (muerte celular) 4.

Se pudo comprobar una respuesta rápida y eficaz bajo EB, reduciendo 2 logs de contaminación poco después de 1h de contacto con el cultivo, alcanzando 4 logs de reducción a las 24h de contacto, en comparación con CP, que no recibió ningún tratamiento.

Para ST, la mejor respuesta también se dio entre las 6 y las 24 h, reduciendo los 4 logs de contaminación poco después de las 6 h de contacto con el cultivo, alcanzando la ausencia de salmonella spp. con 24 horas de contacto, frente al CP, que no recibió ningún tratamiento.

Conclusión

Con base en los resultados mostrados en este ensayo, se pudo verificar que el producto Sal CURB® RM Extra demostró ser efectivo en el control y reducción de la contaminación por Enterobacteriaceae y S. tiphymurium, a una dosis de 2.0 kg/t, en un período de hasta 24 horas. El producto se presenta como una herramienta importante en el control de fábricas de piensos, trituradoras de harina de soja, así como terminales marítimas, ferroviarias o viales de unidades que necesitan una respuesta microbiológica rápida a un costo-beneficio viable y tienen restricciones en el uso de formaldehído.

Evaluación de "time-kill" del producto Sal CURB® RM Extra, a dosis de 2kg/t. sobre Enterobacteriaceae y Salmonella typhimurium en condiciones in vitro

Efecto de Bacillus amyloliquefaciens CECT 5940 en la inhibición de Salmonella <em>in vitro e in vivo</em>

Salmonellosis Aviar. Métodos de Prevención y Control