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Tendencias de la Resistencia antibacteriana de Staphylococccus aureus procedentes de casos de mastitis bovina en la región noroeste de Uruguay.

Publicado: 29 de julio de 2021
Por: Marcos Schanzembach1, Víctor Rodriguez1, Pablo Parodi1,2, Lucía Grille3, Carolina Matto1, Rodolfo Rivero1, Rubén Gianneechini1,4. 1 Laboratorio Regional Noroeste “Miguel C. Rubino”, División de Laboratorios Veterinarios “Miguel C. Rubino”,Ruta 3 Km 369, Paysandú, Uruguay 2 Plataforma de Salud Animal La Estanzuela, Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria, Ruta 50, Km. 11, Colonia, Uruguay 3 Departamento de Ciencia y Tecnología de la Leche. Facultad de Veterinaria. Estación Experimental “
Resumen

Se estudiaron registros de pruebas de susceptibilidad antimicrobiana llevadas a cabo entre 2010 y 2018 con el fin de analizar la resistencia antimicrobiana de aislamientos de Staphylococcus aureusobtenidos de muestras de vacas con mastitis provenientes de 6 departamentos de Uruguay. Fueron analizados 442 aislamientos por medio de la prueba de agar disco difusión para 12 antibióticos. Por otra parte se registró una tendencia hacia la estabilidad respecto a la resistencia múltiple, un marcado descenso de la resistencia a penicilina a partir del año 2015 y el incremento de la resistencia a eritromicina.

Introducción
La resistencia antimicrobiana ha ganado gran importancia desde principios de este siglo, dentro del concepto de “una salud” (OMS, 2017). En el Uruguay se han establecido planes para prevenir y controlar la resistencia en las cadenas de producción lechera (Bennett y col., 2017). Dentro los patógenos que afectan la producción de alimentos, se encuentra Staphylococcus aureus (S. aureus) siendo este elprincipal agente causante de mastitis en bovinos de leche Uruguay (Gianneechini y col., 2014).
El tratamiento de la mastitis causada por S. aureus, como otras bacterias Gram positivas,se encuentra enfocada en el uso de antibióticos de amplio espectro, como la combinación de antibióticos β- lactámicos con un alto nivel de difusión en la ubre y aminoglicosidos con tiempos de vida media mayores (Wagner y Erskine, 2013).
En el presente trabajo se estudiaron las características y tendencias de resistencia a agentes antibacterianos de aislamientos de S. aureus procedentes de casos de mastitis clínicas y sub clínicas remitidas al Laboratorio Regional Noroeste DILAVE Miguel C. Rubino en el período 2010-2018.
Materiales y Métodos
Se realizó el aislamiento e identificación de muestras de leche bovina provenientes de casos de mastitis clínicas y subclínicas de los departamentos de Paysandú, Salto, Río Negro, Soriano, Flores y Colonia remitidas al Laboratorio Regional Noroeste DILAVE Paysandú durante el periodo 2010-2018.
La determinación de la resistencia a antibióticos fue realizada por medio del método de Agar Disco Difusión de acuerdo a las recomendaciones del Clinical Laboratory Standars Institute (CLSI) (2018). Empleando los siguientes discos de antibióticos (OXOID, Reino Unido): penicilina (P), 10 μg; amoxicilina + ácido clavulánico (AMC), 30 μg; oxacilina (OX), 1 μg; cefoxitina (FOX), 30 μg; cefalotina (KF), 30 μg; eritromicina (E), 15 μg; tetraciclina (TE), 30 μg; rifampicina (RD), 5 μg; sulfametoxasol + trimetoprim (STX), 25 μg; estreptomicina (S), 10 μg; enrofloxacina (ENR), 5 μg; neomicina (N), 30 μg. El medio empleado para realizar el método fue Agar Mueller-Hinton (HI-MEDIA,India). La lectura de las placas se realizó luego de 18 horas de incubación a 37°C en condiciones aeróbicas. Los aislamientos fueron categorizados como susceptibles o resistentes de acuerdo a los límites de los diámetros de los halos de inhibición determinados por el European Comitee on Antimicrobial Suceptibility Testing (EU-CAST, 2017) para amoxicilina + ácido clavulanico, cefalotina, estreptomicina y neomicina mientras que para el resto de los antibióticos evaluados se tomaron los valores límites de CLSI (CLSI, 2018).
Resultados y Discusión
En el periodo 2010-2018 obtuvieron de 442 aislamientos de Staphylococcus aureus. El 9,5% (42/442) de los aislamientos presentó resistencia múltiple (resistencia a 3 o más clases de antibióticos). Cabe destacar que no fueron detectadas cepas que presenten re-sistencia a cefoxitina y oxacilina, las cuales son empleadas para la detección de cepas de Staphylococcus aureus meticilina resistentes(MRSA) (CLSI, 2018).
La resistencia múltiple por año durante el periodo estudiado se encontró entre 0-25,8% (Gráfico 1). Dentro de los aislamientos con resistencia múltiple se observa un predominio del 60% (25/42) de cepas resistentes a penicilinas, agentes β-lactámicos combinados con inhibidores de β-lactamasas y aminoglucósidos. Esto puede indicar una baja prevalencia de cepas de S. aureuscon resistencia múltiple en casos de mastitis bovina. Esto puede ser a causa de la aplicación de un mayor número de regulaciones, controles en la venta y uso de antibióticos con fines veterinarios, principalmente el uso de penicilinas.en Uruguay.
Gráfico 1: Distribución de la Resistencia Antimicrobiana Múltiple (resistencia a 3 o más clases de antibióticos) en 442 aislamientos de S. aureus, periodo 2010-2018.
Gráfico 1: Distribución de la Resistencia Antimicrobiana Múltiple (resistencia a 3 o más clases de antibióticos) en 442 aislamientos de S. aureus, periodo 2010-2018.
La resistencia a penicilina presentó una tendencia la cual alcanzó su punto más alto en 2014 siendo el 56,4% (22/39) de los aislamientos resistentes observándose en los siguientes años una tendencia exponencial decreciente alcanzando un 10% (6/57) de aislamientos resistentes en 2018 (Gráfico 2). Una tendencia similar fue detectada en Uruguay por Santos y col. (2017) en el periodo 2008-2015. Este marcado descenso puede estar asociado al ajuste y mejora de los protocolos tratamiento de la mastitis maximizando el uso adecuado de la penicilina.
Gráfico 2: Distribución de la resistencia a Penicilina en 442 aislamientos de S. aureus, periodo 2010-2018.
Gráfico 2:Distribución de la resistencia a Penicilina en 442 aislamientos de S. aureus, periodo 2010-2018.
Por otra parte los agentes de la familia de los aminoglucósidos se observó una alta prevalencia de aislamientos resistentes a estreptomicina 56,1-90,3% durante el periodo estudiado. Encontrándose en un amplio rango de productos veterinarios en conjunto con penicilinas, usado para el tratamiento de un amplio espectro de enfermedades de origen bacteriano (Wagner y Erskine, 2013).
Fue observado un leve incremento de la resistencia a eritromicina en el periodo 2016-2018 con respecto a los años anteriores alcanzando un porcentaje del 17,6% (9/42) en 2017 (Gráfico 3). Este incremento en la resistencia fue descripto en un estudio previo en Uruguay alcanzando un 5,7% de aislamientos resistentes en 2015 (Santos y col., 2017). Esto es particularmente preocupante desde la perspectiva de la producción lechera debido a que este antibiótico es empleado para el tratamiento de infecciones intramamarias causadas por S. aureus resistentes a penicilinas (Gianneechiniy col., 2014).
Gráfico 3: Distribución de la resistencia a Eritromicina en 442 aislamientos de S. aureus, periodo 2010-2018.
Gráfico 3: Distribución de la resistencia a Eritromicina en 442 aislamientos de S. aureus, periodo 2010-2018.
Los resultados obtenidos en este trabajo apoyan la información obtenida por San-tos y col. (2017). Cabe destacar que las penicilinas y eritromicina son los antibióticos de elección para el tratamiento de la mastitis bovina causada por este microorganismo, por otra parte se ha estudiado el uso de aminoglucósidos  para el tratamiento de infecciones causadas por MRSA (P. Dolwing, 2013). La penicilina y eritromicina representan las primeras líneas de tratamiento contra las infecciones intramamarias causadas por este microorganismo, por lo tanto el monitoreo y control del uso responsable de los mismos resulta esencial para evitar el incremento de la resistencia antimicrobiana y principalmente la resistencia antimicrobiana múltiple.
  • Bennett N.; Bentancur A.; Fernandez F.; Kurioka, M. (2017). Plan Nacional de contención de la Resistencia Antimicrobia-na de Uruguay. Disponible en http://www. mgap.gub.uy/sites/default/files/plan_na-cional_de_contencion_de_la_resisten-cia_antimicrobiana_de_uruguay.pdf
  • CLSI (2018). Performance standards for antimicrobial disk and dilution susceptibility test for bacteria isolated from an-imals; approved standard. Wayne: Clini-cal and Laboratory Standards Institute.
  • EUCAST(2017).Breakpointtablesforinterpre-tationofMICsandzonediameters.EUCAST.org. Disponible en http://www.eucast.org/filead-min/src/media/PDFs/EUCAST_files/Break-point_tables/v_8.0_Breakpoint_Tables.pdf
  • Gianneechini R.; Concha C.; Delucci I.; Gil J.; Salvarrey L.; Rivero R. (2014). Mastitis bovina, reconocimiento de los patógenos y su resisten-ciaantimicrobianaenlaCuencaLecheradelSur de Uruguay. Vet. (Montevideo) 50(196):4-32.
  • Organización  Mundial  de  la  Salud (2017). El enfoque multisectorial de la OMS «Una salud». Disponible en https:// www.who.int/features/qa/one-health/es/
  • Santos RI.; Zunino PM.; Gil AD.; Laport A.; Hiri-goyen J. (2017). Antibiotic resistance of Staph-ylococcus aureus associated with subclinical andclinicalmastitisinUruguayduringaneight-year period. Austral J. Vet. Sci. 49(3):191-194.
  • Wagner S.; Erskine R. (2013). Antimicrobial drug use in mastitis. En Giguére S.; Prescott JF. Dowling PM. Antimicrobial therapy in veteri-nary medicine. (5taEd) 519-528 Iowa, E.E.U.U. Editorial Wiley Blackwell.
  • Dowling  P.  (2013).  Aminoglycosides  and Aminocyclitols. En Giguére S.; Prescott JF. Dowling PM. Antimicrobial thera-py in veterinary medicine. (5taEd) 233-255 Iowa, E.E.U.U. Editorial Wiley Blackwell.
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Autores:
Rodolfo Rivero
Ministerio de Ganaderia, Agricultura y Pesca - Uruguay
Pablo Parodi Thexeira
INIA Uruguay
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Mauro Rafael Carrasco Rodriguez
31 de julio de 2021
Saludos Rodolfo y Pablo. Gracias por compartir su investigación con nosotros: Dado el grado de resistencia que suele presentar el S. aureus en todos los países del mundo; seria interesante que ustedes mostraran una grafica, donde se observe el grado de sensibilidad y resistencia de todos los antibióticos. Ya que como ustedes lo manifiestan el grado de resistencia es claro para antibióticos tan usados en su país, para el control de la mastitis como son la Eritromicina, La Estreptomicina y las penicilinas. Entonces me gustaría que si ustedes disponen de la información, ya que tiene los datos de los antibiogramas, cuales son los antibióticos que resultaron mas sensibles para tratar este problemático germen, como el el S. aures. Saludos y esperando esta información, tan importante.
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Oscar Ventura
8 de septiembre de 2021
La mastitis clínica y sub clínica es una de las enfermedades más comunes en la ganadería lechera estabulada, ya que en el confinamiento un mal uso en el ordeño o de las máquinas ordeñadoras trae como consecuencia la diseminación de la enfermedad, la prevención y las medidas profilácticas en el ordeño, la limpieza higiénica de las instalaciones y del ordeñador, no hay que olvidar que la glándula mamaria representa un caldo de cultivo de bacterias por la leche residual en la que se aloja las bacterias, la mayoría del género Staphlococus en dicha glándula, para un control de las mastitis, siempre se requerirá de un antibiográma, realizar la prueba de California en sus 4 cuartos periódicamente y determinar el fármaco de elección más sensible a las bacterias que abundan en la superficie de la glándula, un secado previo a los destetes es otra manera de evitar la propagación de las mastitis en los hatos lecheros. El buen manejo en la ordeña previene altos costos en la producción lechera.
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