Calidad y criotolerancia de semen en toros de la suplementados con vitamina B4 colina rumen protegida

Durante la colecta, procesado, congelado y descongelado del semen, los espermatozoides generan metabolitos oxidativos que dañan la estructura y funcionalidad celular, principalmente al nivel de la membrana plasmática. La vitamina B4 (colina) ha demostrado poseer efecto antioxidante debido a su efecto como precursor de fosfatidilcolina. Este fosfolípido de membrana celular actúa como aceptor de radicales oxígeno libre (ROS) y de esta manera evita la modificación estructural de los fosfolípidos de membrana compuestos con ácidos grasos insaturados. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de la suplementación de toros con colina, protegida de la fermentación ruminal (protegida), sobre la calidad seminal y la criotolerancia.

Mediante un diseño experimental con examinación de los mismos animales en series de tiempo, se evaluó el impacto de la suplementación con colina rumen protegida en el % de motilidad progresiva individual, y vigor, pre (en fresco) y posdescongelado. Las muestras seminales se obtuvieron de 10 toros de raza Braford de un rodeo de cría de la EEA Mercedes Corrientes del INTA. Los mismos se mantuvieron en corrales individuales, fuera de la temporada reproductiva, similares fenotípicamente, sexualmente maduros, con buena líbido, libres de enfermedades y con comprobada aptitud clínica, sanitaria y reproductiva (calidad seminal: > 75% de motilidad, < 20% de espermatozoides anormales). Se realizaron dos períodos (CONTROL: día 1-75 y TRATADO día 76-150) de alimentación con heno de pangola ad libitum y suplementación con 0,5kg/día de maíz molido individual y diaria, comenzando las extracciones respetando el período de espermatogénesis de 61-65 días. En el periodo de TRATADO al maíz se le agregó 5gr/día de clorhidrato de colina protegida (8,5gr de BEDGEN40ST BEDSON S.A.®). Se realizaron 2 extracciones con su respectivo análisis seminal por toro por periodo.

La extracción se desarrolló con el uso de electroeyaculador, y el análisis de semen por la misma persona, previo entrenamiento y estandarización de los criterios de evaluación. El semen obtenido se diluyó con Andromed Minitube® a fin de obtener una concentración de 30x10⁶ de espermatozoides /ml, cargándose pajuelas de 0,5ml para su posterior congelado sobre vapor de nitrógeno líquido.

Por sesión y toro, se evaluaron 3 pajuelas que se descongelaron 10 s al aire y 30 s en agua a 37°C.

El análisis microscópico consistió en evaluar una gota de semen de 5ul sobre portaobjeto temperado a 37ºC con una gota de 20ul de citrato de sodio al 2,92% con cubreobjeto. Con aumento de 400x, se determinó subjetivamente el porcentaje de células con motilidad progresiva. El vigor se calificó usando una escala del 0-5 según la intensidad y dirección del movimiento. El análisis de % de células motiles se desarrolló mediante la transformación de la variable al arcoseno y prueba t para diferenciar las medias de ambos períodos; para los datos cualitativos de grado de vigor se realizaron tablas de frecuencia y diferenciación mediante análisis para medidas no paramétricas, análisis de ChiCuadrado.

En la Tabla 1 puede observarse que el porcentaje de motilidad progresiva resultó superior en el periodo CONTROL, sin embargo, la pérdida de motilidad atribuida al proceso de congelación fue inferior en el periodo TRATADO.

Ambos grupos superan el límite de motilidad progresiva de al menos 30% para semen fresco estipulado por la sociedad de teriogeniología para la evaluación de solidez reproductiva de los toros (Alexander, 2008). La suplementación con colina rumen protegida en toros ha demostrado poseer efecto positivo sobre las pérdidas de motilidad progresiva en el semen congelado, no teniéndose en cuenta el efecto de la estacionalidad debido a que es una especie poco influida reproductivamente por el fotoperiodo. No obstante, es necesario continuar las evaluaciones a nivel molecular a fin de identificar el exacto mecanismo de acción.