Caracterización genética de cepas de campo del virus de la afeccion de la bolsa de fabricio detectadas en granjas de pollo de engorda en el Estado de Nuevo León
Publicado: 4 de junio de 2012
Por: Juan Carlos Valladares, Juárez, D, Barrientos, B., Angulo, E., Lara, A., Escobedo, G., Ondarza, A. (Productora de Alimentos Pecuarios de Nuevo León., SA. de CV); Vilmos Palya y Morfin, R. (Ceva Phylaxia Co Ltd); Luis Etcharren (Ceva-Santé Animalé México); Alejandro Banda (Mississppi State University).
Resumen
Para conocer las características moleculares del virus de la Infección de la bolsa de Fabricio (VIBF) en el estado de Nuevo León, México, se muestrearon 30 granjas de pollo de engorda durante mayo y junio de 2008. Se colectaron muestras de tejido bursal para la detección del VIBF mediante RT-PCR y posteriormente se secuenció la región hipervariable del gene VP 2. Adicionalmente se realizaron estudios de histopatología de la bolsa de Fabricio y ELISA para el VIBF.
Los resultados de RT-PCR fueron positivos a la presencia del VIBF en 28 granjas. El análisis de las secuencias de nucleótidos determinó que los virus presentes en 21 granjas mostraron características genéticas parecidas a la variante Delaware E; estas variantes fueron genéticamente similares al virus 11153 USA, del tipo Delawere E, en la clasificación de Jackwood estarían incluidas en el Grupo Molecular 6. El estudio histopatológico mostró que en trece de estas granjas se observaron lesiones bursales severas, en cuatro se presentaron lesiones moderadas, en dos se observaron lesiones leves y en dos no se detectaron lesiones bursales. En estas granjas se detecto seroconversión al VIBF a partir de las 4 semanas de edad.
En siete granjas se detectaron virus estándar similares a cepas vacunales. En cuatro se detectaron virus similares a la cepa D-78; dos granjas sin lesiones bursales, una con lesiones leves y una con lesiones moderadas: En tres granjas se detectaron virus similares a la cepa ST-12; una granja sin lesiones busales y dos con lesiones severas. No se detectó seroconversión al VIBF en ninguna de estas 7 granjas. En dos granjas las muestras fueron negativas a la detección del VIBF, las muestras no presentaron lesiones bursales ni se detectó seroconversión al VIBF.
La presencia de cepas variantes de VIBF se detecto en aves con calendarios de vacunación diferentes con cepas vacunales estándar intermedias.
PALABRAS CLAVE: Infección de la bolsa de Fabricio, variantes, caracterización genética, diagnóstico.
INTRODUCCION:
El virus de la Infección de la bolsa de Fabricio (VIBF) es el responsable de una enfermedad altamente contagiosa y económicamente importante que causa inmunodepresión en los pollos (11). Aunque se describen 2 serotipos, sólo el Serotipo 1 es naturalmente patógeno para los pollos (11). El VIBF posee gran variabilidad genética que se traduce en grados variables de antigenicidad y virulencia, que están codificados en la región hipervariable del gene de la proteína VP2 (8,16). Dentro del Serotipo 1 existen 2 grupos principales del VIBF, los virus Estándar y los virus Variantes. En el grupo de los virus Estándar se incluyen las cepas clásicas, las cepas muy virulentas (vvIBF) y las cepas vacunales; el grupo de los virus Variantes esta compuesto por cepas antigénicamente distintas que generalmente no producen signos y causan atrofia bursal severa (11). Las cepas Variantes son capaces de infectar y causar enfermedad en pollos con niveles elevados de anticuerpos contra las cepas Estándar (12), los sueros de aves vacunadas con cepas Estándar tienen una capacidad limitada de neutralizar a las cepas
Variantes (6). La detección e identificación de las cepas del VIBF es importante para ajustar los calendarios de vacunación a los subtipos de virus presentes en el medio ambiente de las aves (7). La secuenciación genética del gene de la proteína VP-2 es método mas confiable para la identificación y diferenciación de las cepas del VIBF (7,8,16). Variantes del VIBF aisladas en Estados Unidos y Latinoamérica muestran cambios ("drifts") antigénicos que afectan la neutralización de los epitopes de la proteína de la cápside VP2. En estudios realizados en Georgia EUA, se detecto que el 80% de las cepas de Estados Unidos fueron variante tipo Delaware E y el 8% similar a Variante E; en Colombia y Ecuador se detectaron cepas similares a la variante Delaware E, en Perú y Venezuela se detectaron tipos Delaware y GLS mientras que en Brasil y Rep. Dominicana se detectaron cepas clásicas de alta virulencia, de las muestras procedentes de México 6 correspondieron a cepas estándar y 3 no fueron tipificables con el sistema utilizado (2). En otro estudio realizado en la Universidad de Ohio, a partir de muestras procedentes de México, se encontraron cepas Variantes cercanas al grupo Delaware E, cepas clásicas virulentas y cepas variantes cercanas a cepas clásicas (3).
Variantes (6). La detección e identificación de las cepas del VIBF es importante para ajustar los calendarios de vacunación a los subtipos de virus presentes en el medio ambiente de las aves (7). La secuenciación genética del gene de la proteína VP-2 es método mas confiable para la identificación y diferenciación de las cepas del VIBF (7,8,16). Variantes del VIBF aisladas en Estados Unidos y Latinoamérica muestran cambios ("drifts") antigénicos que afectan la neutralización de los epitopes de la proteína de la cápside VP2. En estudios realizados en Georgia EUA, se detecto que el 80% de las cepas de Estados Unidos fueron variante tipo Delaware E y el 8% similar a Variante E; en Colombia y Ecuador se detectaron cepas similares a la variante Delaware E, en Perú y Venezuela se detectaron tipos Delaware y GLS mientras que en Brasil y Rep. Dominicana se detectaron cepas clásicas de alta virulencia, de las muestras procedentes de México 6 correspondieron a cepas estándar y 3 no fueron tipificables con el sistema utilizado (2). En otro estudio realizado en la Universidad de Ohio, a partir de muestras procedentes de México, se encontraron cepas Variantes cercanas al grupo Delaware E, cepas clásicas virulentas y cepas variantes cercanas a cepas clásicas (3).
ANTECEDENTES
En el estado de Nuevo León, México, la Infección de la bolsa de Fabricio (IBF) es una de las enfermedades prevalentes en el pollo de engorda. Durante los últimos tres años se han analizado más de 26,000 muestras de tejido bursal (BF); los estudios histopatológicos indican que la infección se establece en las parvadas entre la tercera y la cuarta semana de edad y tienen un nivel máximo de lesión alrededor de la 5° semana de edad (Valladares, resultados no publicados). Se han utilizado diferentes calendarios de vacunación con el uso de cepas vacunales intermedias de tipo estándar sin obtener resultados que modifiquen el patrón de aparición de las lesiones bursales.
En un estudio previo realizado por Valladares, J.C. y Banda, A en el año 2003 (resultados no publicados), a partir de 25 grupos de muestras de tejido bursal de pollo de engorda, se detectaron 15 virus de la Infección de la bolsa de Fabricio (VIBF) utilizando la técnica de la transcripción reversa y la reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) para amplificar productos de 248 pares de bases, abarcando la región hipervariable del gen VP2, así como el análisis del polimorfismo en la longitud de fragmentos de restricción (RFLP) de los productos obtenidos por RT-PCR utilizando las endonucleasas de restricción Dra I, Sac I, Taq I, Sty I, Bst NI, y Ssp I. En este estudio, se identificaron nueve virus que presentaron un patrón idéntico al de la cepa variante Delaware E, tres virus similares a la cepa vacunal ST-12, dos virus similares a la cepa vacunal PBG y un virus que mostró un patrón de RFLP único que no correspondía a ninguna cepa conocida. Sin embargo, los productos obtenidos no fueron secuenciados para obtener una clasificación mas precisa de los VIBF detectados en el estado de Nuevo León, México
En un estudio previo realizado por Valladares, J.C. y Banda, A en el año 2003 (resultados no publicados), a partir de 25 grupos de muestras de tejido bursal de pollo de engorda, se detectaron 15 virus de la Infección de la bolsa de Fabricio (VIBF) utilizando la técnica de la transcripción reversa y la reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) para amplificar productos de 248 pares de bases, abarcando la región hipervariable del gen VP2, así como el análisis del polimorfismo en la longitud de fragmentos de restricción (RFLP) de los productos obtenidos por RT-PCR utilizando las endonucleasas de restricción Dra I, Sac I, Taq I, Sty I, Bst NI, y Ssp I. En este estudio, se identificaron nueve virus que presentaron un patrón idéntico al de la cepa variante Delaware E, tres virus similares a la cepa vacunal ST-12, dos virus similares a la cepa vacunal PBG y un virus que mostró un patrón de RFLP único que no correspondía a ninguna cepa conocida. Sin embargo, los productos obtenidos no fueron secuenciados para obtener una clasificación mas precisa de los VIBF detectados en el estado de Nuevo León, México
OBJETIVO: El objetivo del presente estudio fue la caracterización genética de los VIBF presentes en granjas de pollo de engorda del estado de Nuevo León, México, mediante la detección por RT-PCR y la secuenciación de la región hipervariable del gene VP-2, así como la evaluación de las lesiones histológicas de las bolsas de Fabricio y su correlación con los calendarios de vacunación contra el VIBF utilizados en las granjas muestreadas.
MATERIAL Y METODOS:
Muestras: Durante los meses de mayo y junio de 2008, se muestrearon 30 granjas comerciales de pollo de engorda localizadas en el estado de Nuevo León, México, con antecedentes de IBF detectada por histopatología y serología (Valladares, resultados no publicados). Las granjas muestreadas tuvieron un calendario de vacunación con dos aplicaciones de virus activo tipo Estándar, los días 4 y 14 de edad, vía agua de bebida, utilizando las siguientes cepas vacunales: Lukert intermedia + ST 12 en 17 granjas; Lukert intermedia + D 78 en 7 granjas; S 706 + S 706 en 3 granjas y ST 12 +. ST 12 en 3 granjas. En 11 granjas la edad de los pollos muestreados fue alrededor de las 3 semanas,
en 15 granjas la edad fue alrededor de las 4 semanas y en 4 granjas alrededor de las 6 semanas de edad. De cada granja se muestrearon 10 aves seleccionadas al azar. Las aves fueron enviadas al laboratorio, donde fueron sangradas y sacrificadas para la toma de muestras, colectando muestras de tejido bursal para biología molecular (10 porciones de BF juntas, conservadas en congelación) y para histopatología (10 porciones individuales de BF, conservadas en formol al 10%), así como muestras de suero para ELISA de IBF.
Identificación del VIBF y caracterización molecular: La identificación y caracterización molecular del VIBF se realizó en el Laboratorio de Ceva-Phylaxia Co Ltd, de acuerdo a la metodología publicada previamente (4,9,10). Se utilizó la técnica de transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa para amplificar un segmento de 408 pares de bases (pb) de longitud, del pb 721 al pb 1128; de la secuencia de nucleótidos de la región hipervariable del gen VP-2 del VIBF. El fragmento ampliado fue secuenciado y se elaboró un árbol filogenético de las secuencias detectadas utilizando las secuencias de referencia disponibles en el banco de secuencias NCBI (National Center for Biothecnology Information).
Histopatología: Se realizó el estudio histopatológico de las lesiones bursales, calificándolas en una escala arbitraria de lesión de 0 a 7, de acuerdo a su distribución y a su grado de severidad; donde valores de 0 se consideraron sin lesiones, valores entre 0.1 y 2.5 como lesiones leves, valores mayores de 2.6 y menores de 6 como lesiones moderadas y valores entre 6 y 7 se consideraron lesiones severas. El nivel del daño bursal se obtuvo por el promedio de lesión de las 10 bolsas obtenidas de cada granja (14).
Serología: se realizó la detección de anticuerpos séricos contra el VIBF, mediante una prueba de ELISA convencional (5).
en 15 granjas la edad fue alrededor de las 4 semanas y en 4 granjas alrededor de las 6 semanas de edad. De cada granja se muestrearon 10 aves seleccionadas al azar. Las aves fueron enviadas al laboratorio, donde fueron sangradas y sacrificadas para la toma de muestras, colectando muestras de tejido bursal para biología molecular (10 porciones de BF juntas, conservadas en congelación) y para histopatología (10 porciones individuales de BF, conservadas en formol al 10%), así como muestras de suero para ELISA de IBF.
Identificación del VIBF y caracterización molecular: La identificación y caracterización molecular del VIBF se realizó en el Laboratorio de Ceva-Phylaxia Co Ltd, de acuerdo a la metodología publicada previamente (4,9,10). Se utilizó la técnica de transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa para amplificar un segmento de 408 pares de bases (pb) de longitud, del pb 721 al pb 1128; de la secuencia de nucleótidos de la región hipervariable del gen VP-2 del VIBF. El fragmento ampliado fue secuenciado y se elaboró un árbol filogenético de las secuencias detectadas utilizando las secuencias de referencia disponibles en el banco de secuencias NCBI (National Center for Biothecnology Information).
Histopatología: Se realizó el estudio histopatológico de las lesiones bursales, calificándolas en una escala arbitraria de lesión de 0 a 7, de acuerdo a su distribución y a su grado de severidad; donde valores de 0 se consideraron sin lesiones, valores entre 0.1 y 2.5 como lesiones leves, valores mayores de 2.6 y menores de 6 como lesiones moderadas y valores entre 6 y 7 se consideraron lesiones severas. El nivel del daño bursal se obtuvo por el promedio de lesión de las 10 bolsas obtenidas de cada granja (14).
Serología: se realizó la detección de anticuerpos séricos contra el VIBF, mediante una prueba de ELISA convencional (5).
RESULTADOS:
Los resultados se las pruebas realizadas se observan en el Cuadro 1.
Identificación del VIBF y caracterización molecular: Los resultados de RT-PCR fueron positivos a la presencia del VIBF en 28 granjas, en dos granjas no se detectó el VIBF.
De los 28 virus detectados, 21 virus mostraron características genéticas de virus Variantes y 7 de virus Estándar. Los virus Variantes detectados tuvieron características genéticas del Tipo Delawere E; estas Variantes fueron similares genéticamente al virus 11153 USA (1). El análisis de la secuenciación genética detectó al aminoacido T (treonina) en la posición 222, lo cual es compatible con una cepa variante; el aminoacido L (leucina) en la posición 253 y al aminoácido Q (glutamina) en la posición 284, lo que indica que los virus detectados no corresponden ni a cepas vacunales ni a cepas clásicas virulentas. La presencia de este tipo de secuencias indica que los virus detectados pueden clasificarse en el Grupo Molecular 6 de la clasificación descrita poir Jackwood en 2007 (3). De los virus Estándar detectados, cuatro presentaron características genéticas similares a la cepa D-78 y los otros tres presentaron características genéticas similares a la cepa ST-12.
El árbol filogenético de los virus detectados se observa en la Figura 1 y la secuenciación genética de dos de los virus detectados se observa en la Figura 2.
Histopatología: En las muestras de 7 granjas no de observaron lesiones bursales, en 3 granjas se observaron lesiones leves, en 5 granjas lesiones moderadas y en 15 granjas lesiones severas. La severidad de la lesión se incrementó con la edad de las aves muestreadas (Figuras 3 y 5).
Serología: En 18 granjas el titulo de anticuerpos fue muy bajo o nulo; en 11 granjas el título de anticuerpos fue moderado. La seroconversión se detectó únicamente en aves a partir de las 4 semanas de edad y sólo en granjas con presencia de virus Variantes.
Identificación del VIBF y caracterización molecular: Los resultados de RT-PCR fueron positivos a la presencia del VIBF en 28 granjas, en dos granjas no se detectó el VIBF.
De los 28 virus detectados, 21 virus mostraron características genéticas de virus Variantes y 7 de virus Estándar. Los virus Variantes detectados tuvieron características genéticas del Tipo Delawere E; estas Variantes fueron similares genéticamente al virus 11153 USA (1). El análisis de la secuenciación genética detectó al aminoacido T (treonina) en la posición 222, lo cual es compatible con una cepa variante; el aminoacido L (leucina) en la posición 253 y al aminoácido Q (glutamina) en la posición 284, lo que indica que los virus detectados no corresponden ni a cepas vacunales ni a cepas clásicas virulentas. La presencia de este tipo de secuencias indica que los virus detectados pueden clasificarse en el Grupo Molecular 6 de la clasificación descrita poir Jackwood en 2007 (3). De los virus Estándar detectados, cuatro presentaron características genéticas similares a la cepa D-78 y los otros tres presentaron características genéticas similares a la cepa ST-12.
El árbol filogenético de los virus detectados se observa en la Figura 1 y la secuenciación genética de dos de los virus detectados se observa en la Figura 2.
Histopatología: En las muestras de 7 granjas no de observaron lesiones bursales, en 3 granjas se observaron lesiones leves, en 5 granjas lesiones moderadas y en 15 granjas lesiones severas. La severidad de la lesión se incrementó con la edad de las aves muestreadas (Figuras 3 y 5).
Serología: En 18 granjas el titulo de anticuerpos fue muy bajo o nulo; en 11 granjas el título de anticuerpos fue moderado. La seroconversión se detectó únicamente en aves a partir de las 4 semanas de edad y sólo en granjas con presencia de virus Variantes.
DISCUSION
Los resultados de RT-PCR fueron positivos a la presencia del VIBF en 28 granjas. Mediante el análisis de las secuencias de nucleótidos se determinó que los virus presentes en 21 granjas mostraron características genéticas de los virus variantes Tipo Delaware E; estas Variantes fueron similares genéticamente al virus 11153 USA, que fue aislado durante un muestreo en una granja de pollo de engorda en el estado de Georgia en los Estados Unidos (1); la secuenciación genética de los virus detectados indica que pertenecen al Grupo Molecular 6 de la clasificación realizada por Jackwood (3). El estudio histopatológico mostró que en las muestras de trece de estas granjas se observaron lesiones bursales severas, en cuatro granjas se presentaron lesiones moderadas, en dos granjas se observaron lesiones leves y en dos granjas no se detectaron lesiones bursales. Se detecto seroconversión al VIBF en 11 de estas 21 granjas, únicamente en aves a partir de la 4° semana de edad, mientras que en las 10 granjas de aves menores a 4 semanas, positivas a virus Variante, no se detecto seroconversión al VIBF.
Estos resultados son similares a los reportados previamente, en los que se menciona que el 88% de los VIBF detectados en Estados Unidos son de tipo Variante Delaware E, variante que también ha sido detectada en Colombia, Ecuador, Perú y Venezuela (2). Estudios realizados en la Universidad de Georgia, EUA, durante 2005 y 2006, se reporto que algunas cepas mexicanas de VIBF están filogenéticamente agrupadas muy cerca de las cepas Variantes A y E, indicando que, aunque no son similares a las Variantes A ó E, si corresponden a cepas variantes y son diferentes de las cepas Clásicas (15); mientras que estudios realizados en la Universidad de Ohio se encontraron cepas Variantes cercanas al grupo Delaware E, cepas Clásicas virulentas y cepas Variantes cercanas a cepas Clásicas, clasificadas en el Grupo Molecular 6 (3).
En cuatro granjas se detectaron virus con características genéticas similares a la cepa D-78; las muestras de dos granjas no presentaron lesiones bursales, una granja presentaron lesiones leves y una granja lesiones moderadas.: En tres granjas se detectaron virus con características genéticas similares a la cepa ST-12, en una de estas granjas no se observaron lesiones mientras que las otras dos granjas se observaron lesiones bursales severas. La edad de las aves de estas granjas fue entre 2.6 y 4 semanas y no se detectó seroconversión al VIBF en ninguna de ellas. La presencia de estos virus similares a virus vacunales coincide con las cepas vacunales utilizadas en las parvadas muestreadas en cuatro granjas, en tres granjas los virus detectados fueron diferentes a los virus vacunales utilizados en las aves muestreadas.
En dos granjas las muestras fueron negativas a la detección del VIBF mediante RT-PCR, en aves de 4.0 y 4.1 sem de edad, las muestras de estas granjas no presentaron lesiones bursales y no se detectó seroconversión al VIBF.
Con relación a los calendarios de vacunación utilizados, en las granjas con vacunas Lukert + ST 12, de 17 muestras, se detectaron 14 virus variantes, un ST 12 y dos negativas a VIBF; en granjas con vacunas Lukert + D 78 de 7 muestras, se detectaron 2 virus variantes, 3 virus tipo D 78 y 2 virus tipo ST 12; en las granjas con vacunas S 706 + S 706, de 3 muestras, se detectaron 2 virus variantes y un virus tipo D 78; en las granjas vacunadas con ST 12 + ST 12, de 3 muestras, se detectaron 3 virus variantes. Aparentemente los virus VIBF Variantes pueden estar presentes en parvadas vacunadas con cualquiera de los calendarios de vacunación utilizados en las granjas estudiadas (Cuadro 2).
Estos resultados son similares a los reportados previamente, en los que se menciona que el 88% de los VIBF detectados en Estados Unidos son de tipo Variante Delaware E, variante que también ha sido detectada en Colombia, Ecuador, Perú y Venezuela (2). Estudios realizados en la Universidad de Georgia, EUA, durante 2005 y 2006, se reporto que algunas cepas mexicanas de VIBF están filogenéticamente agrupadas muy cerca de las cepas Variantes A y E, indicando que, aunque no son similares a las Variantes A ó E, si corresponden a cepas variantes y son diferentes de las cepas Clásicas (15); mientras que estudios realizados en la Universidad de Ohio se encontraron cepas Variantes cercanas al grupo Delaware E, cepas Clásicas virulentas y cepas Variantes cercanas a cepas Clásicas, clasificadas en el Grupo Molecular 6 (3).
En cuatro granjas se detectaron virus con características genéticas similares a la cepa D-78; las muestras de dos granjas no presentaron lesiones bursales, una granja presentaron lesiones leves y una granja lesiones moderadas.: En tres granjas se detectaron virus con características genéticas similares a la cepa ST-12, en una de estas granjas no se observaron lesiones mientras que las otras dos granjas se observaron lesiones bursales severas. La edad de las aves de estas granjas fue entre 2.6 y 4 semanas y no se detectó seroconversión al VIBF en ninguna de ellas. La presencia de estos virus similares a virus vacunales coincide con las cepas vacunales utilizadas en las parvadas muestreadas en cuatro granjas, en tres granjas los virus detectados fueron diferentes a los virus vacunales utilizados en las aves muestreadas.
En dos granjas las muestras fueron negativas a la detección del VIBF mediante RT-PCR, en aves de 4.0 y 4.1 sem de edad, las muestras de estas granjas no presentaron lesiones bursales y no se detectó seroconversión al VIBF.
Con relación a los calendarios de vacunación utilizados, en las granjas con vacunas Lukert + ST 12, de 17 muestras, se detectaron 14 virus variantes, un ST 12 y dos negativas a VIBF; en granjas con vacunas Lukert + D 78 de 7 muestras, se detectaron 2 virus variantes, 3 virus tipo D 78 y 2 virus tipo ST 12; en las granjas con vacunas S 706 + S 706, de 3 muestras, se detectaron 2 virus variantes y un virus tipo D 78; en las granjas vacunadas con ST 12 + ST 12, de 3 muestras, se detectaron 3 virus variantes. Aparentemente los virus VIBF Variantes pueden estar presentes en parvadas vacunadas con cualquiera de los calendarios de vacunación utilizados en las granjas estudiadas (Cuadro 2).
LITERATURA CITADA
1) Banda, A., P. Villegas, J. El-Attrache, and C. Estévez: Molecular Characterization of Seven Field Isolates of Infectious Bursal Disease Virus Obtained from Commercial Broiler Chickens. Avian Diseases, 45, (3), 620-630, 2001.
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16) Wu, C., Rubinelli, P. and Lin, T.: Molecular detection and differentiation of infectious bursal disease virus. Avian Diseases 51(2): 515-526, 2007.
Figura 1.- Árbol filogenético del VIBF detectado en pollo de engorda en Nuevo León, México basado en la secuencia de nucleótidos de 408 pb de longitud (721-1128 pb) de la región hipervariable del gene VP2.
(virus de Nuevo León en cursiva y subrayados):
(virus de Nuevo León en cursiva y subrayados):
FIGURA 2.- Secuenciación genética de la región hipervariable del gene de la proteína VP2 de dos virus Variantes de IBF detectados en el estado de Nuevo León, México
Virus de Nuevo Leon:
D1026/11
D1026/20
Virus de Nuevo Leon:
D1026/11
D1026/20
PRESENTADO EN LA XXXIV CONVENCION ANUAL DE LA ASOCIACIÓN NACIONAL DE ESPECIALISTAS EN CIENCIAS AVICOLAS DE MEXICO, A.C. (ANECA) 13 A 15-08-2009
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Phibro Animal Health
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AGRONEGOCIOS DE MONTERREY
6 de junio de 2012
FELICITACIONES JUAN CARLOS POR TU EXCELENTE PRESENTACION ASI COMO TAMBIEN A TODA LA RAZA DEL LABORATORIO, EXCOMPAÑEROS DE TRABAJO, ASI COMO A TUS COLABORADORES EXTERNOS, TODOS AMIGOS Y COMPAÑEROS .
EN LO PERSONAL SIEMPRE CON LA DUDA DE QUE LAS VACUNAS QUE UTILIZAMOS EN EL CAMPO REPERCUTAN EN LA PRESENTACION DE PROBLEMAS CLINICOS EN LAS PARVADAS VACUNADAS ASI COMO EN PARVADAS FUTURAS QUE ENTREN A GRANJAS,ASIMISMO CON LAS DEFICIENTES CONDICIONES DE DESCANSO Y DESINFECCION QUE SE PRACTICAN EN POLLO NOS DIFICULTAN EL CONTROL ADECUADO DE TODAS LAS ENFERMEDADES EN GRANJAS.
CORDIAL SALUDO
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