Relación entre el test de endosmosis y parámetros de calidad seminal en semen congelado de bovinos

El test de endósmosis o HOSt (por las siglas de su nombre en inglés, hypo-osmotic swelling test) es una técnica que evalúa la funcionalidad de la membrana plasmática. Esta prueba se basa en el transporte de fluidos a través de una membrana celular intacta en un medio hipotónico, el cual ocurre hasta que se alcanza el equilibrio entre el interior y el exterior de la célula. Los espermatozoides incubados en un medio hipo-osmótico, mostrarán la cola con distinto grado de enrollamiento o curvatura (patrones B/C, D/E, F, G y G`) cuando su membrana está funcional, mientras que en aquellos con una membrana inactiva se verá extendida (Jeyendran et al., 1984).

El objetivo del trabajo fue establecer las posibles relaciones lineales entre distintos parámetros de calidad seminal y la respuesta al HOSt con sus patrones, en semen congelado bovino.

El presente trabajo se realizó en la EEA INTA Balcarce, durante los años 2019-2020-2021. Se analizaron pajuelas de semen congelado de 51 toros (2 a 5 años de edad), de raza Aberdeen Angus, que fueron remitidas por veterinarios de la actividad privada. Para cada muestra se obtuvieron los siguientes parámetros: integridad física de la membrana plasmática (IM; eosina/nigrosina), integridad acrosomal (IA; coomassie blue), morfoanomalías (N), condensación de la cromatina (CC; azul de toluidina), funcionalidad de la membrana plasmática (FM; HOSt, 100mOsm a 37ºC, 30 min). Los patrones de respuesta en esta prueba corresponden a los descriptos por Stanger et al. (2010). Se realizó un análisis de correlación de Spearman entre dichas variables.

En la Tabla 1, se presentan los coeficientes de correlación entre los distintos parámetros y patrones de respuesta a la prueba de endósmosis.

En contraposición a lo observado en un estudio previo sobre semen fresco (Lobo et al., 2021), se encontró una correlación positiva significativa estadísticamente (P< 0,05) entre IM, N, FM y los patrones de respuesta D/E. Por otro lado, y en concordancia con lo estimado en semen fresco, se halló una correlación positiva entre la FM y los patrones D/E, F, G y G` (P< 0,05).

En humanos se estableció una correlación positiva entre patrones D/E y menor grado de fragmentación de ADN espermático (Bassiri et al., 2013). A su vez, Correa et al. (1997) hallaron una correlación positiva entre los patrones D/E y G y fertilidad en semen congelado/descongelado de toros Holstein. Estos resultados resaltarían la importancia de incorporar los patrones HOSt como pruebas complementarias en la evaluación de calidad seminal.

Existe correlación entre patrones de respuesta HOSt y parámetros clásicos de calidad seminal en semen congelado bovino.