Asociación entre consumo residual y ∂ 15N en proteínas plasmáticas o digestibilidad in vivo en terneras Angus en pastoreo

En bovinos, el rango observado en el consumo residual (CR) está asociado a diferencias en la eficiencia de uso de la energía y del N, la digestibilidad de la dieta y la composición corporal (Herd y Arthur, 2009). Trabajos recientes indican que la abundancia natural relativa de 15N en proteínas plasmáticas (∂ 15NPP), un indicador de la eficiencia de uso del N (EUN), está asociada a diferencias entre animales en el CR (Guarnido López et al., 2021). El objetivo de este trabajo fue examinar la intensidad de la asociación de la ∂15NPP, la digestibilidad aparente in vivo (DA) o la proteína bruta (PB) de la dieta seleccionada (PBd) con el CR de terneras Angus portadoras de diferentes variantes genómicas para CR en genes de IGF1 y neuropéptido Y (NPY) medido en pastoreo.

El diseño del experimento fue descripto en Bakker et al. (2021). Brevemente, 17 terneras Angus (272 ± 56 kg PV), separadas en 2 grupos experimentales (GE) de acuerdo a la presencia de alelos favorables (GEf; n=9) o desfavorables (GEd; n=8) para CR en genes de IGF1 y NPY, pastaron durante 50 días un verdeo de avena con raigrás anual (4500 kg MS/ha, 2 días/parcela; asignación ≥ 90 g MS/kg PV/d) con agua y sales minerales ad libitum. La ganancia diaria de peso (GDP) se estimó como la pendiente de la regresión del PV en función del tiempo del experimento (pesaje cada 17 días). El consumo de materia seca (CMS) individual se midió en 2 períodos de 10 días por la técnica de los n-alcanos (Bakker et al., 2017). El CR de cada ternera se calculó como el residuo de la regresión múltiple del CMS en función del peso metabólico medio y de la GDP. En cada medición del CMS, la profundidad media del estrato pastoreado (PEP) se estimó midiendo la altura superficial de la pastura (ASP; 100 alturas de lámina foliar extendida o tallos/parcela; 5 parcelas) antes del ingreso y a la salida del pastoreo. El estrato pastoreado se dividió en tres subestratos (SE): a) desde ASP hasta el primer desvío estándar (DE) por encima de PEP, b) desde el primer DE por encima de PEP hasta PEP, c) desde PEP hasta el primer DE por debajo de PEP. Diez muestras por parcela de cada SE fueron cortadas, secadas a 60°C, molidas, y combinadas en una muestra compuesta por período para determinar PB (Kjeldahl) y n-alcanos. Durante los últimos 5 días de cada medición de CMS, se recolectaron 2 muestras diarias (mañana y tarde) de heces de cada ternera, que fueron secadas a 60°C, molidas y combinadas en una muestra compuesta por ternera y período. La concentración de n-alcanos en heces y forraje se determinó según Bakker et al. (2017). La contribución proporcional de cada SE a la dieta de cada animal (pSE) se estimó comparando las proporciones de alcanos C29, C31, C33 y C35 en heces y forraje mediante el método de los cuadrados mínimos. La concentración de PBd y la de C35 (35c) de la dieta seleccionada por cada animal se calcularon como la sumatoria del producto de pSE por la PB o 35c de cada SE. La DA de la dieta seleccionada por cada animal se estimó según la fórmula DA=(1-(35D·RF35/35H))*100, donde 35D y 35H son las concentraciones (mg/kg MS) de C35 en dieta seleccionada (35D) y heces (35H) y RF35 es la recuperación fecal (mg/mg) de C35. Al final del experimento, una muestra de sangre yugular fue obtenida con EDTA-K2 de cada ternera; el plasma fue separado por centrifugación (2500 g, 10 min, 4°C) y almacenado a -20°C. Las proteínas plasmáticas se precipitaron con ácido sulfo-salicílico (1 g/ml; 100 µl/ml plasma; 4°C) y centrifugación (7000 g, 5 min, 4ºC). El pellet de proteína fue lavado con agua calidad HPLC (3 x 0,5 ml) y secado a 60°C (72 h). Una alícuota (1 mg) del pellet se usó para determinar la ∂ 15NPP (DE: ±0,2‰) con un analizador elemental (Carlo Erba EA1108) acoplado a un espectrómetro de masas de relaciones isotópicas (Delta V Advantage). La relación entre CR (Y) y ∂ 15NPP, DA o PBd fue examinada por análisis de covarianza, con GE como variable categórica (R, versión 4.0.2), y declarada significativa cuando la pendiente (ß) de la regresión tuvo un valor P< 0,05.

No se observó interacción entre GE y ∂ 15NPP, DA o PBd. No existió asociación entre CR (media=0,003±0,63kg MS/d) y DA (media= 69±2%; p=0,38; Fig. 1) o PBd (media=10,5±0,6%; P=0,66). La relación entre CR y ∂15NPP fue significativa (ß=0,72±0,2 kgMS/(d·∂15NPP‰); P=0,003; CME=0,164) con intersecciones diferentes para GEd (-4,4 kgMS/d) y GEf (-5,7 kgMS/d, EED=0,22; P< 0,001; Fig. 1). Los resultados indican que: 1) la EUN estuvo asociada a la varianza de CR dentro de los GE, pero no explicó las diferencias de CR entre GE; 2) las diferencias de CR dentro de, o entre, los GE no estuvieron relacionadas con diferencias en DA o PBd.

Figura 1. Relación entre consumo residual (CR) y ∂ 15N en proteínas plasmáticas (∂15NPP) o digestibilidad in vivo (DA) en terneras Angus en pastoreo (■: GEf; ○: GEd).

La ∂ 15NPP estuvo asociada significativamente al CR de terneras Angus en pastoreo observado dentro de los grupos genómicos y podría ser un marcador para CR en terneras Angus en condiciones de pastoreo similares a las de este ensayo (DA y PBd adecuadas y asignación no limitante).