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Parámetros hematológicos de pollos de engorde sometidos a temperatura ambiental cíclica elevada

Publicado: 20 de octubre de 2011
Por: CFP Marchini 1*, MRBM Nascimento2, PL Silva2, EC Guimarães3 - 1Universidad de Franca, Brasil; 2Facultad de Medicina Veterinaria, UFU, Brasil; 3Facultad de Matemáticas, UFU, Brasil.
Resumen

El objetivo de este trabajo fue estudiar los efectos del estrés por calor sobre los parámetros hematológicos del pollo de engorde. Se utilizaron 70 pollos machos Avian que se alojaron en jaulas y se dividieron en dos grupos, uno de los cuales se sometió a estrés por calor diariamente durante una hora (ST) y el otro se mantuvo en un ambiente termoneutro (TN). Semanalmente se obtuvieron muestras de sangre y se analizaron los hematíes, la hemoglobina, el hematocrito, el volumen celular medio (VCM), la hemoglobina celular media (HCM), la concentración de hemoglobina celular media (CHCM), los leucocitos (LE), los heterófilos (HT), los eosinófilos (EO), los basófilos (BA), los linfocitos (LI), los monocitos (MO) y la proporción heterófilos/linfocitos (H/L) de cinco aves de cada grupo. Se utilizó un diseño completamente al azar bajo un esquema factorial 7 x 2, con los factores de edad (1, 7, 14, 21, 28, 35 y 42 días) y ambientales (ST y TN). Se aplicó la prueba de Kolmogorov-Smirmov para verificar el comportamiento de la distribución de los datos. Para los parámetros con distribución normal de los datos, las medias se evaluaron utilizando la prueba t, con 5% de significancia, y para los de distribución no normal, las medias se evaluaron utilizando la prueba de Wilcoxon con 5% de significancia. El número de hematíes de las aves ST fue menor que en las TN el día 42 de edad. La CHCM disminuyó hasta los 28 días de edad. Las aves ST tuvieron un menor número de LE a los 7, 14, y 21 días que las TN. Con menores medias de LI y H/L a los 28 días de edad. Las medias de EO y MO fueron menores en las aves ST. De esta manera, los pollos de engorde sometidos a estrés por calor presentaron problemas en el estado inmunológico en lo que se refiere a las variables leucocitos y linfocitos.
Palabras Clave: Conteo de células sanguíneas, Estrés térmico, Ave, Ambiente.

Introducción
El pollo de engorde es altamente susceptible a los factores ambientales, principalmente a las temperaturas elevadas, que ejercen un efecto estresante sobre ellos (Dionello et al., 2002) y perjudica su fisiología y su rendimiento (Furlan y Macari, 2002).
En las aves el estrés crónico por calor induce un aumento en la liberación de adrenocorticoides hacia el torrente sanguíneo, lo que altera el número de leucocitos (Sturkie, 1998). Esto ocurre porque las concentraciones elevadas de corticoides pueden ocasionar la involución del timo y de la bolsa de Fabricio a través de mecanismos de apoptosis conducentes a una disminución en la proliferación de linfocitos (Morgulis, 2002) además de provocar el secuestro de las células linfóides circulantes en dirección de los tejidos linfóides (Winkelstein, 2000). Los corticosteroides también provocan alteraciones en la función de los mocitos in vitro, suprimiendo las actividades de estas células fagocitarias contra las bacterias y reduciendo la resistencia del hospedero a la infección, además de aumentar el número de neutrófilos circulantes (Winkelstein, 2000). Se han publicado también informes sobre el aumento en el porcentaje de heterófilos y de disminución en los basófilos debido al estrés por calor (McFarlane et al., 1989). La proporción heterófilos/linfocitos es un indicador primario de estrés en las aves, pues aumenta en estos casos (Gross y Siegel, 1983). Los cambios que ocurren en la sangre de las aves sometidas a estrés como un menor número de glóbulos rojos, aumento en la concentración de hemoglobina, el hematocrito y la CHCM, además de la disminución del VCM (Furlan et al., 1999) son parte de las respuestas termorreguladoras en los pollos de engorde expuestos a temperatura ambiental elevada (Yahav et al., 1997).
La mayoría de los estudios sobre los efectos del estrés por calor en la fisiología de las aves se ha realizado ante temperaturas ambientales elevadas constantes, aunque bajo condiciones naturales esto no sea así. Por lo anterior, el objetivo del presente trabajo fue estudiar el efecto del estrés cíclico por calor sobre los parámetros hematológicos de los pollos de engorde machos.
Material y Métodos
Se utilizaron 70 pollos de engorde Avian, machos, que se alojaron en cuatro jaulas de 160x50x60 cm cada una. El día 1 de edad se formaron aleatoriamente dos grupos de 35 aves cada uno. El primero se mantuvo en ambiente termoneutro (TN) y el otro (ST) se sometió a una temperatura ambiental de 38ºC de 12 a 13 horas los días 1 a 27 de edad y a 40ºC durante una hora los días 28 a 42 de edad. Para calentar el ambiente se utilizaron cuatro lámparas incandescentes de 200 vatios en cada jaula. Durante la exposición de las aves al estrés crónico por calor (ECC) se interrumpió la administración de agua y alimento, para después proporcionarlos a voluntad, manteniendo a las aves a temperatura de confort térmico durante las demás 23 horas. Se utilizó un alimento comercial y agua que se administraron a voluntad y las aves se sometieron a 24 horas de luz natural y artificial durante todo el período experimental. El diseño fue completamente al azar bajo un esquema factorial 7 x 2, siendo siete los factores edad (1, 7, 14, 21, 28, 35 y 42 días de edad) y dos ambientes (ST y TN).
Del primero a los 42 días de edad se recolectaron semanalmente muestras de 2 ml de sangre mediante punción en la vena ulnar y se depositaron en tubos que contenían anticoagulante EDTA en solución al 10% para realizar el eritrograma (número de eritrocitos, hemoglobina, hematocrito, volumen celular medio [VCM], hemoglobina celular media [HCM] y concentración de hemoglobina celular media [CHCM]) y el leucograma (método del hematocitómetro con recuento diferencial de leucocitos con frotis de sangre teñidos con el método de Leishman y considerando heterófilos [HT], eosinófilos [EO], basófilos [BA], linfocitos [LI], monocitos [MO] y proporción heterófilos/linfocitos [H/L]).
Se aplicó la prueba de Kolmogorov-Smirmov para verificar la distribución de los datos de los análisis de sangre. Las medias de los parámetros con distribución normal se evaluaron utilizando la prueba t con el 5% de probabilidad, mientras que las de distribución anormal se evaluaron bajo la prueba de Wilcoxon, al 5% de probabilidad.
Resultados y discusión
Eritrogama
Se observó un efecto de la interacción edad x ambiente sobre el número de eritrocitos. A los 42 días de edad (P<0.05) el ST presentó una media mayor que el TN (Cuadro 1). Estos hallazgos contradicen a los publicados en la literatura (Furlan et al., 1999) de diminución del número de eritrocitos en las aves sometidas a estrés calórico agudo.Ç
Las medias de hemoglobina, hematocrito, VCM y HCM no se vieron influenciadas por el ECC ni por la edad de las aves (P>0.05). Estos resultados discrepan de los publicados Furlan et al. (1999) en los cuales la hemoglobina aumentó independientemente de que las aves estuvieran estresadas o no, el VCM se vio afectado por la edad, disminuyendo los valores conforme aumentó la edad de las aves, el HCM no se vio afectado pero el hematocrito aumentó (McFarlane et al., 1989) debido al estrés agudo por calor.
La CHCM aumentó con la edad de las aves, ya sea estresadas o no, y alcanzó sus mejores medias a los 28 días (P<0.05), lo que concuerda con la literatura (Furlan et al., 1999), con un aumento en la CHCM a la séptima semana de edad, independientemente de que las aves estuviesen o no bajo estrés, y que  el efecto del estrés causó un aumento en la CHCM en la séptima semana de edad.
Cuadro 1. Medias de las variables del eritrograma de pollos de engorde machos Avian a diferentes edades (días), sometidos (ST) o no (TN) a estrés cíclico por calor durante una hora, de 38ºC y 40ºC
Variable
Ambiente
Edad (días)
7
14
21
28
35
42
Media
Hematíes
ST
2.81abA
3.25abA
2.71bA
2.79bA
2.84abA
3.61aA
3.00
(hem/ml)
TN
3.15aA
2.90aA
3.22aA
3.04aA
3.00aA
2.54aB
2.97
Media
 
2.98
3.07
2.96
2.92
2.92
3.08
 
Hemoglob
ST
8.6
10.4
9.4
9.2
11.0
10.6
9.86
(g%)
TN
8.8
10.2
10.0
10.2
9.8
9.8
9.80
Media
 
8.7
10.3
9.7
9.7
10.4
10.2
 
Hematocrito
ST
27.4
29.8
27.0
24.0
27.0
27.6
27.1
(%)
TN
26.2
30.2
26.0
26.2
26.4
26.2
26.8
Media
 
26.8
30.0
26.5
25.1
26.7
26.9
 
VCM (fl)
ST
99.4
91.6
102.2
87.2
95.8
75.6
91.9
 
TN
85.0
106.0
81.8
87.4
88.2
98.0A
91.0
Media
 
92.2
98.8
92.0
87.3
92.0
86.8
 
HCM (pg)
ST
30.4
32.6
34.2
33.6
38.6
30.2
33.2
 
TN
27.6
36.0
31.4
34.0
32.4
36.4
32.9
Media
 
29.0
34.3
32.8
33.8
35.5
33.3
 
CHCM (%)
ST
31.6
34.8
33.8
38.8
40.0
38.2
36.2
 
TN
32.2
34.0
39.6
38.8
36.6
36.6
36.3
Media
 
31.9a
34.4ab
36.7ab
38.8b
38.3b
37.4b
 
Las medias con letras mayúsculas distintas en una misma columna y minúsculas en una misma línea indican diferencias estadísticamente significativas (P<0.05) de acuerdo con las pruebas t o de Wilcoxon.

Leucograma

Se observó un efecto de la interacción edad x ambiente sobre el número de leucocitos, linfocitos y sobre la relación heterófilos/linfocitos (H/L). Los días 7, 14 y 21 de edad las aves ST presentaron una disminución (P<0.05) en los leucocitos, en comparación con las del grupo TN (Cuadro 2). En el grupo ST, el número de leucocitos aumentó hasta el día 35 de edad. En el grupo TN se observó aumento hasta el día 14 y las medias se mantuvieron hasta el día 35. Los linfocitos y la proporción H/L en el grupo ST presentaron medias menores que las del grupo TN el día 28, y medias mayores en la proporción H/L el día 28. En el grupo ST, se observaron medias menores de linfocitos el día 28 y esto ocurrió en el grupo TN a los 21 días. La relación H/L en el grupo ST presentó medias mayores el día 28 de edad, mientras que en el grupo TN esta proporción se mantuvo constante en todas las edades. Estos datos corroboran los publicados por McFarlane y Curtis, (1989) que reportaron un aumento en la proporción H/L en las aves sometidas a estrés por calor.
No se observó efecto de la edad, el ambiente ni la interacción edad x ambiente sobre el número de BA (P>0.05) (datos no mostrados en el cuadro), lo que discrepa de los publicados por McFarlane et al. (1989). Las divergencias de resultados obtenidos en este trabajo con respecto a la literatura, se puede deber, en parte, a diferencias metodológicas. Sin embargo, además de la temperatura ambiente elevada, las diferencias en magnitud, duración y tipo de estrés a que se sometieron las aves son características importantes que se deben tomar en cuenta.
No se observó efecto de la interacción edad x ambiente sobre el porcentaje de HT, EO ni MO (P>0.05). No obstante, la edad influenció el porcentaje de HT y EO, que aumentó hasta el día 21 de edad (P<0.05), independientemente de que las aves estuvieran sometidas a estrés o no. El ambiente en que las aves se criaron influenció el porcentaje de EO y MO, notándose que las del grupo ST tuvieron medias mayores que las del grupo TN (P<0.05).
Los resultados que aparecen en los Cuadros 1 y 2 muestran que el estrés influenció la hematopoyesis de los pollos de engorde, comprometiendo al sistema inmune por el aumento en eosinófilos y monocitos y por la disminución del número de leucocitos y linfocitos, lo que puede hacer que las aves sean más susceptibles a enfermedades que las que se mantienen bajo termoneutralidad.
Las aves estresadas por calor gastaron más energía para el mantenimiento de la homeotermia y consumieron menos alimento en un intento de disminuir la producción de calor endógeno. En consecuencia, estas aves ingieren menos nutrimentos, muchos de los cuales participan directamente en la hematopoyesis.
Cuadro 2. Medias y desviación estándar de las variables de leucograma en pollos de engorde Avian machos de diferentes edades (días), sometidos (ST) o no (TN) a temperatura ambiental cíclica elevada durante una hora, de 38ºC y 40ºC
 
Ambiente
Edad (días)
 
 
7
14
21
28
35
42
Media
LE
ST
4,700.0cB
5,700.0bcB
6,120.0abcB
7,520.0abA
7,820.0aA
5,340.0cA
6,200.0
(cél/ml)
TN
6,366.0bA
8,860.0aA
7,920.0abA
8,060.0abA
6,740.0bA
6,220.0bA
7,361.1
Media
 
5,533.4
7,280.0
7,020.0
7,790.0
7,280.0
5,780.0
 
HT
ST
17.8
26.0
36.6
49.8
34.8
29.6
32.4
(%)
TN
16.4
21.0
36.8
31.0
35.2
32.6
28.8
Media
 
c
23.5bc
36.7a
40.4a
35.0a
31.1ab
 
EO
ST
0.4
0.2
1.6
1.6
1.0
1.0
0.9A
(%)
TN
0.4
0.2
1.4
0.8
0.4
1.0
0.7B
Media
 
0.4cd
0.2d
1.5a
1.2ab
0.7bcd
1.0abc
 
LI
ST
78.8aA
73.0abA
59.6bcA
46.8cB
63.0abA
68.6abA
64.9
(%)
TN
82.2aA
78.4abA
60.8cA
68.0abcA
63.2bcA
65.2bcA
69.6
Media
 
80.5
75.7
60.2
57.4
63.1
66.9
 
MO
ST
1.0
0.8
2.0
1.4
1.0
0.8
1.1A
(%)
TN
1.0
0.4
0.8
0.2
1.0
1.2
0.7B
Media
 
1.0
0.6
1.4
0.8
1.0
1.0
 
H/L
ST
0.22aA
0.36aA
0.63abA
1.23bB
0.57aA
0.43aA
0.58
 
TN
0.19aA
0.27aA
0.68aA
0.46aA
0.60aA
0.54aA
0.45
Media
 
0.20
0.31
0.65
0.83
0.58
0.48
 
Las medias con letras mayúsculas distintas en una misma columna y minúsculas distintas en una misma línea indican diferencias estadísticamente significativas (P<0.05) mediante las pruebas t o de Wilcoxon.
Conclusiones
El estrés por calor afecta adversamente el estado inmunológico en sus variables leucocitos, eosinófilos, linfocitos, monocitos y relación heterófilos/linfocitos. En cuanto a la variable eritrograma, el estrés por calor causa alteraciones en el número de eritrocitos al final del ciclo productivo.
Bibliografía
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Sturkie PD. 1998. Fisiologia Aviar. Tradução: Calderón FC, Editorial Acribia, Zaragoza, Espanha.
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