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Obtención de muestras para diagnóstico de Tricomoniasis y Campilobacteriosis en toros

Publicado: 30 de julio de 2009
Por: M.V. Ignacio Villalba y M.V. Jorge Santiago Villalba, Veterinaria Tandil - Estudio Ganadero. Argentina
Los altos índices reproductivos son la base de una cría eficiente y rentable. Analizamos una de las herramientas destinadas a mejorar estos parámetros.
El Examen clínico de los Toros para determinar su Aptitud Reproductiva,  es una práctica habitual de campo en la República Argentina. Una parte, de este examen lo constituye el Raspaje Prepucial como medio de muestreo, para diagnóstico de tricomoniasis y campilobacteriosis,  Muchos colegas nos han comentado sobre lesiones sufridas por personas o animales al realizar esta actividad. El objetivo de nuestra comunicación es dar una alternativa de trabajo con mayor seguridad para el operador, logrando a la vez una correcta toma de muestras prepuciales, a lo cual colaboran a) la tranquilidad del profesional por la seguridad del método, y b) la relativa tranquilidad del toro al permanecer suelto dentro de la casilla de operar.
Fundamentos anatómicos
1.- El toro patea, sacando hacia fuera la articulación de la babilla; al sentirla trabada por la tabla, cambia su manera de patear. Y patea hacia atrás, o eventualmente hacia delante, de forma suave por limitación de movimiento. (Foto 1) La ventaja real es que el operador trabaja con total tranquilidad. Para el toro, al trabajarse suelto en la casilla de operar, a lo sumo con una leve presión del "apretavacío", se disminuye la incomodidad, el estrés y consecuentemente la reacción.
2.- Esto se complementa con una firme torsión en dirección craneal, del tronco de la cola, que aparentemente tiene como consecuencia una disminución de la sensibilidad en la zona  de prepucio y pene.
Material y Método que utilizamos 
1.- Lo ideal es una tabla fuerte como la que se ve en la primer foto, sostenida con un par de tornillos a ambos lados de la puerta trasera de la Casilla de Operar, del lado interno, pues debe soportar la presión del flanco del  toro. Esta ubicación permite cerrar la puerta lateral sin inconveniente. Debe dejar libre el "apretavacío".
2.- La posición recomendada es cubriendo la babilla en la parte posterior y algo más baja en la parte anterior. Debe permitir al operador en cuclillas, un cómodo accionar de ambas manos.
3.- Es recomendable una posición del operador perpendicular al toro o desviado levemente hacia craneal. Nunca mirando hacia posterior del toro.
4.- La muestra del raspador se desprende por fuerza centrífuga así que debe girarse con fuerza dentro del tubo.
5.- Para la muestra de tricomonas el raspador no debe sumergirse por completo en el medio de transporte y cultivo sino que debe quedar el fondo del tubo, limpio (Foto 5)
6.- En todo momento el toro está sin agarrar en el cepo. A lo más, se lo presiona con regular intensidad con el "apretavacío".
7.- Las alternativas son múltiples y van desde un par de varillas de lapacho unidas con hilo de rollo y sostenidas con "marra" o "manea" de alambre dulce, o sostenidas mediante una cuerda desde el borde superior de la manga, a un simple palo resistente que pasa entre las púas de la tranca posterior y se sostiene entre el "apretavacío" y la pared de la manga. 
 
Foto 1 Para la torsión de la cola puede apoyarse la mano izquierda en su base.Obtención de muestras para diagnóstico de Tricomoniasis y Campilobacteriosis en toros - Image 1
 
Foto 2   Varillón sostenido con marra de alambre simple.
Obtención de muestras para diagnóstico de Tricomoniasis y Campilobacteriosis en toros - Image 2 
Operador diestro ubicado a la derecha del toro
Importante: no debe ser material débil ni "astillable" pues los movimientos bruscos del toro -que los hay- pueden lastimar a quien se encuentra haciendo el raspaje.
Muestreo: Lo anterior, permite trabajar con el toro suelto en la casilla, y raspar en surco del glande (Foto 3), sosteniendo el pene con la mano contraria al raspador, para guiar los movimientos. Se pasa arriba, abajo y a los lados, girando algo el pene si es posible, para trabajar sobre el surco del glande.
Importante: Debe percibirse un leve crepitar al pasar suavemente el raspador, 2 veces (1 ida - 1 vuelta) Por alguna causa, al variar la posición del raspador para volver a realizar el raspaje de ida y vuelta, al toro le cuesta identificar esa sensación como "dolor", y suele no tener ninguna reacción. O a veces un "endurecimiento" del pene por reacción  al suave raspado. Cabe aclarar, que el raspador con buen filo remueve en forma profunda la mucosa, por eso recomendamos realizar alguna vez la extracción manual del pene (recomendable ayudarse con un trapo seco) a fin de verificar la importante escarificación que se produce. Obviamente, nos referimos a raspadores de bronce. Ver foto abajo.
Un detalle: es recomendable proteger la cabeza del raspador con un trozo de goma tubular tipo quirúrgico para su transporte,  pues caso contrario se arruina el filo de los mismos.
Comentario 1: Consideramos muy eficiente el raspaje que se realice de esta manera; siempre debe controlarse la cantidad de esmegma recolectado y en caso necesario repetirlo con descarga en el mismo tubo. Debe consignarse además si la muestra fuera sucia, y si lleva bosta o barro. Si los toros tienen suficiente descanso previo al control,  se detecta 100% de los enfermos de tricomonas al 1º raspaje. 
Foto 3: A la altura de la cabeza del operador se ve la tabla que limita el movimiento al toro. La piel del borde prepucial se toma con la palma hacia el toro y el pulgar hacia abajo; la buena presentación hace innecesario cortar los pelos del prepucio, y permite detectar con claridad las llagas cuando las hay. En la foto ya se ha girado la mano, tras la introducción del raspador; luego se correrá a la zona del glande, para guiar el raspaje.
Obtención de muestras para diagnóstico de Tricomoniasis y Campilobacteriosis en toros - Image 3
 
Foto 4  Lugar donde tratamos de  tomar de muestras.
Obtención de muestras para diagnóstico de Tricomoniasis y Campilobacteriosis en toros - Image 4 

Foto 5
Se observa cómo queda la muestra en medio semisólido (derecha)
Obtención de muestras para diagnóstico de Tricomoniasis y Campilobacteriosis en toros - Image 5 
La ventaja que advertimos en este método, es que el tropismo negativo de la tricomonas respecto al oxígeno, hace que estas se desplacen hacia el fondo del tubo, donde crecen sin competencia de hongos o bacterias, los cuales quedan con el esmegma, pelos, tierra, suspendidos en la parte superior.
Comentario 2
Al sostener el pene ubicando el glande y raspando suavemente se obtiene una buena muestra; es bueno realizar la experiencia de la foto para ver cómo actúa el raspador sobre la mucosa prepucial, a fin de regular la fuerza del raspado.
   En casos de presencia de barro, puede recurrirse a este manejo para evitar muestras demasiado sucias; de todos modos en nuestra experiencia, la muestra sucia no limita el diagnóstico de las tricomonas, pero probablemente sí el de campylobácter, aunque respecto a este último creemos que los laboratorios no dominan aún la técnica de procesamiento de las muestras, pero no es l tema de discusión en este caso.
  En el caso de la muestra para tricomonas (Aconsejamos medio semi-sólido, descrito originalmente por el Dr. Villa y adoptado luego por varios laboratorios), recomendamos al ayudante proteger esta del sol directo para no afectar la viabilidad de los protozoarios que hayan podido recuperarse. También es importante, en caso de prepucios secos, introducir previamente el raspador en el tubo de la muestra; esta simple lubricación facilita el ingreso y posterior desplazamiento del raspador en el saco prepucial.
  Utilizamos a veces el mismo raspador para la toma de las dos muestras; siempre primero la de tricomonas ya que la de Campilobacter tiene formol en su composición. Puede ser conveniente utilizar uno para cada muestreo.
Esterilización: la realizamos por agua en ebullición donde se van depositando los raspadores ya utilizados. El agua actúa sobre la mitad del mismo. Al retirarlos repasamos prolijamente y varias veces la varilla, con un trapo seco y limpio para eliminar por adsorción la posibilidad de transportar microorganismos de un animal a otro.
 Si bien no lo utilizamos de rutina, es recomendable un recipiente con solución fisiológica estéril para enjuagar el raspador al retirarlo del agua hirviendo.
  También explicamos a los empleados de ganadería, las características de los medios de cultivo, y los distintos diagnósticos que se realizan. Estas explicaciones tienen muy buena recepción, ayudan a la motivación y mejoran el clima de trabajo.
Conclusiones
Los hallazgos que hemos tenido,  de toros de Cabaña o comprados en Remate,  positivos a venéreas. Los casos frecuentes de colegas que manifiestan tener toros "Positivos" en 3º o 4º control. La permanencia de estas enfermedades en algunos rodeos. La difusión de estas enfermedades en rodeos del país. Son todos llamados de atención sobre la Metodología utilizada para la recolección de las muestras. Hemos observado accidentalmente, muestreos realizados con raspador plástico, en el fondo de la cavidad prepucial, sin guiar el raspaje, y posterior "remojado" de la cabeza del raspador en el tubo, donde lo sorprendente sería lograr un diagnóstico positivo.
El método de cultivo para las Tricomonas está bien estandarizado y por lo general no falla. En cuanto a la tetra-tricomonas o "falsas tricomonas" se cuenta con técnicas suficientes para diferenciarlas. Los medios para Tricomonas de los Dres. Luchessi y Soto de Tandil que utilizamos, presentan el 90% de los Positivos en las primeras 24-48hs. Del mismo modo otros laboratorios manifiestan tener esos resultados alrededor del 4º día, lo que ameritaría un análisis de la composición del medio de cultivo utilizado en esos casos.
Tenemos algunas dudas respecto a la eficacia de los laboratorios, para diagnosticar Campilobcteriosis pues hay varios puntos críticos como calidad del conjugado, efectividad de la ultra centrifugación y otros; lo que hace surgir dudas en los resultados Negativos. La existencia de variedades intestinales es también una dificultad al hallar casos positivos.
En casos especiales, tras al raspaje realizamos un lavaje con solución fisiológica que se recoge con pipeta de cassou y se vierte sobre un tubo para tricomonas, lo que mejoraría la detección de positivos. Aplicamos la recomendación de INTA de "doble raspaje negativo" para considerar libres los toros.
Para terminar, podemos decir que esta es solamente una técnica más, que en nuestro caso tiene resultados satisfactorios. Como el tema es opinable esperamos las sugerencias y críticas que la experiencia de cada uno pueda aportar.
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Autores:
Jorge Villalba
Veterinaria Tandil
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Jorge Villalba
Veterinaria Tandil
4 de junio de 2020
Estimados foristas: el Dr Pedro Soto, colega de Tandil, dirige un Laboratorio de Diagnóstico Veterinario que se especializa entre otras cosas en diagnóstico de enfermedades reproductivas y es un experto en el tema. Respecto a lo que expresa en su comentario y en función de nuestra experiencia en rodeos de cría, hemos aplicado un "tratamiento para rodeos bajo sospecha de enfermedades venéreas". Se trata de un LAVAJE VAGINAL/PREPUCIAL, con un gel en base a carboximetilcelulosa, oxitetraciclina soluble y amonio cuaternario, que aplicamos al inicio del servicio y hemos denominado Repro-Gel, para lavaje genital en bovinos. Lo hemos aplicado en años sucesivos en 3 establecimientos diferentes y en los tres casos el resultado fue altamente positivo. En este último ciclo reproductivo (Servicio en primavera'19; tacto en otoño'20) el grupo tratado con nuestro sistema superó por 20 PUNTOS PORCENTUALES de Preñez a los grupos No tratados. (118 Vacas CON Lavaje vaginal con Repro-Gel vs 805 Vacas SIN Lavaje vaginal) Si bien realizamos la primera prueba hace unos 10 años y las siguientes en 2018 y 2019, estamos en fase de prueba. Este año tenemos 3 lotes tratados para evaluar dentro de 90 días aproximadamente. Esta experiencia está incluida en un trabajo sobre Campilobacteriosis, epidemiología práctica, que trataremos de compartirles más adelante.
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Pedro Soto
UNICEN
4 de junio de 2020

Quisiera aclarar el concepto de persistencia de la infección en la vaca. La práctica de dejar 2 celos y luego creer que la vaca se limpió es errónea. La persistencia más corta es de 2 a 4 meses, y es posible que algunas vacas continúen infectadas hasta más de 12 meses.
La observación de otro colega sobre la duración de la inmunidad es correcta; las vacas recuperadas vuelven a ser susceptibles nuevamente a partir de los 9 a 10 meses.
En la publicación de este foro del trabajo de “Evaluación de impacto productivo en un rodeo de cría Tricomoniasis: un brote problemático” , hice referencia sobre la dinámica de la patogenia en la hembra. Si alguno le interesa puede consultar en las respuestas del trabajo que menciono.
Un saludo. Pedro Soto

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Jorge Villalba
Veterinaria Tandil
13 de agosto de 2009
Para el colega que pregunta sobre la exposición del pene del toro: es muy sencillo tomando el extremo con un trapo limpio. sirve para visualizar papilomas no lo utilizamos para muestro. Respecto a métodos de muestreo preferimos el raspador de bronce en segundo término la vaina azul (con pistola de cassou) depositando previamente 5-10cc de solución salina en zona del glande + masaje y posterior succión del esmegma removido. (Esta metodología es interesante pues casi no molesta al toro) Otra alternativa es depositar la muestra tomada con raspador en solución salina bufferada contenida en tubo de base cónica. Luego de terminado el trabajo, se deja reposar 1-2 horas, y del sedimento se toma muestra para cultivo de tricomonas y el sobrenadante se utiliza para el diagnóstico de campilobacteriosis. En muchos caso pueden observarse las tricomonas en forma directa sobre cubreobjeto, en las gotas de sedimento, puestas al microscopio con mínimo aumento.
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Jorge Villalba
Veterinaria Tandil
12 de agosto de 2009
A todos los foristas muchas gracias. Contesto a alguna inquietudes: 1.- no descartamos ningún método de toma de muestras, pero obtenemos mejor muestra raspando suave con raspador de bronce de buen filo (no debería sangrar) La varilla puede ser de acero inoxidable. 2.- Los indicadores de estas Ef en un rodeo son a) Baja preñez, y menor preñez en Vq que en vacas b) ciclos anormales c) abortos desde los 3 meses hasta a término (es fácil identificar Campi en fetos de 5m tomando muestra del abomaso para extendido + tinción o cultivo) Y es difícil ver los abortos chicos. 3.- Es posible curar los toros pero no fácil (En base a Dimetridazole donde es permitido -con otras drogas hemos tenido fallas-) 4.- LAS VACAS se limpian solas con un par de celos sin monta, aunque puede quedar un 2-3[percent] de portadoras por eso es un buen método entorar sólo vacas con su Cría al pie y que ésta supere los 45d de edad. En tambos dejas los dos celos sin dar servicio. Por más detalles mi correo es jsvillalba@arnet.com.ar
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Dr. Patricio Sandoval
Asociación Ecuatoriana de Buiatria
11 de agosto de 2009
Muy buen artículo, felicitaciones. Cuento y comparto con Isi de Bolivia, en Ecuador se le ha dado muy poco valor al diagnóstico de Tricomonas y Campylobacter, en lo personal utilizo la técnica del raspado prepucial con varilla de cobre y cultivo y microscopía y los resultados son muy buenos, se ha logardo bajar los indices de abortos y subir los de nacimientos en zonas donde se utiliza mucho la monta directa. Es dificil concientizar al ganadero de que no solo la brucelosis causa abortos en nuetros animales y que la sanidad implica muchas prácticas desde las vacunaciones hasta la eliminación de vectores. Saludos Patricio
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Diego Amancio ALCORTA
21 de julio de 2020
ESTIMADO JORGE: TE MOLESTO PARA PEDIRTE, DE SER POSIBLE LA FORMULA DEL DENOMINADO REPRO-GEL PARA COMENZAR A PROBARLO EN ESTA PRÓXIMA TEMPORADA DE SERVICIOS 2020.- DESDE YA AGRADEZCO TU GENEROSIDAD PROFESIONAL DE COMPARTIR TU SOBRADA EXPERIENCIA EN ESTOS TEMAS RELACIONADOS A LA SANIDAD REPRODUCTIVA, QUE CONSTITUYE UNO DE LOS MAS IMPORTANTES PROBLEMAS DE LA GANADERÍA ARGENTINA. AGRADECIDO, APROVECHO PARA SALUDARTE AFECTUOSAMENTE.
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Silva Hernan
19 de julio de 2020
Estimados foristas, excelentes comentarios, jorge el trabajo sobre campilobacteriosis que menciona ya está publicado o aun no. saludos
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Jose Araujo
30 de mayo de 2020
bueno los comentarios
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Rudy Espinal
14 de abril de 2020
Gracias Ricardo, por responder mi inquietud el becerro es de Rasa Gr. No puros 3/4 , estaré pendiente a su crecimiento de los contrarios ser a para carne
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Rudy Espinal
14 de abril de 2020
Buenos Días, compré un Becerro con fines de ponerlo de padrote como le llamamos aquí en República Dominicana, Pero según se va desarrollando observó que un testículo no se le ha desarrollado, mi pregunta es podrá engendrar este animal con esta condición, favor darme su opinión mucha Gracia
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