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Desarrollo de una vacuna viva contra el virus de newcastle que contiene interleuquina-2 para disminuir la reacción post-vacunal y potenciar la respuesta inmune en pollos

Publicado: 11 de agosto de 2015
Resumen
Introducción Enfermedad de Newcastle (EN) La Enfermedad de Newcastle es una enfermedad causada por el Virus de la EN (NDV), que en aves no vacunadas puede llegar a causar una mortalidad del 100%. Además, NDV es capaz de infectar a más de 200 especies de aves, aunque la severidad de la enfermedad depende tanto de la cepa, como del hospedero (OIE, 2012). NDV ti...
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Magdalena Escorcia Martínez
UNAM - Universidad Nacional Autónoma de México
26 de agosto de 2015
Distinguidos Sres., he leido con mucha atencion el trabajo publicado. Llama mi atención la falta de estudio estadistico mediante el cual se compruebe que las aseveraciones sean correctas. No indican qué cepa de Virus Newcastle fue utilizada para desarrollarla unida a IL-2, afirman que se presentan los resultados de diseminación viral y esto no aparece en el escrito. Solo me permito realizar un comentario: Es importante que el virus vacunal se aplique por la via natural del virus infeccioso con el objetivo que colonice las diferentes células que se encuentran en la via de entrada y con ello se estimule una respuesta neutralizante (Ig A), tan importante en el control de esta enfermedad, una reaccion posvacunal siempre es esperada, lo mas importante es que esta no se complique y para ello lo mas importante es cuidar que la parvada se encuentre libre de Mycoplasma, o de lo contrario, manejarla una adecuada metafilaxia. Les felicito en el esfuerzo de llevar a cabo el trabajo experimental que publican, sin embargo, el abordaje de la problematica de reacciones posvacunales ocasionadas por la aplicacion de vacuna contra la Enfermedad de Newcastle no fue la mas adecuada.
Manolo Fernandez Diaz
FARVET
17 de agosto de 2016
La publicacion es solo el comienzo de un importante trabajo de investigacion, los resultados son alentadores y como toda investigacion tiene evaluarse mas y ampliar con otras opciones biotecnologicas y posiblemente combinar esta vacuna con otras cepas vacunales. Gracias
Liliana Revolledo
USP -Universidade de São Paulo
18 de agosto de 2016
La publicación es interesante, sin embargo carece de ciertos elementos indispensables de un estudio de investigación consistente, especialmente en lo que se refiere a los objetivos y al diseño experimental, como comenta la colega de México. Sin duda IL-2 es un elemento importante, pero al mismo tiempo estudios en las revistas científicas renombradas de virología indican su expresión en cepas altamente virulentas de NDV, no permitidas para la fabricación de vacunas de NDV según las recomendaciones internacionales. Hay que recordar que no sólo la eficacia debe ser demostrada, como la inocuidad de la misma en todos sus pasos del desarrollo.
Claudio Afonso
Base2Bio
18 de agosto de 2016


I would like to express my congratulations to FARVET, a Latin American company for doing such advanced type of research on avian immunology, a neglected area with great potential. As discussed above this work is apparently preliminary, and there are concerns, however it is important. Below I would like to add some other points.

1. The hypothesis of this project is that chicken IL2 attenuates the live vaccine virus. I have not seen the pathogenesis data discussed but apparently there is decreased virulence with IL2. If this is the case, it is quite surprising to see increased protection. Based on past experiences the best vaccines are expected to be those that caused the most damage to the host (they produced increased inflammation and enhanced immunes responses).

2. IL2 was produced by a cell line and incorporated on the surface of the virion during virus replication. I have not seen the data that show the presence of IL2 on the virion, however even if this is present in the media, it would likely have an effect. I would like to see evidence that IL2 is indeed part of the virion since this would be key to how future work is conducted. If IL2 is just in the media, it may be possible for the IL2 to be produced on the cell line separated from the virus. This may allow to achieve high levels of IL2 in those cells, which could then be added to the live viruses grown at higher titers in eggs.

3. IL2 is only expected to be present on the initial inoculum, thus if the cytokine attenuate the virus one would expect that the effect appear only during initial infection and would be comparable to an increase on the infectious dose needed. After the initial cycle of replication on the epithelia, the effect would be expected to disappear. If that is the case on could achieve the same effect by changing the infectious dose.

4. However, it is possible that the presence of IL2 during the first infection cycle would induce some type of cytokine cascade that would enhance the initial immune response and thus lead to better protection. Some in vitro studies with macrophages or splenocytes may address this issue.

5. The differences in protection observed in the challenges seem to be within the normal variability. It would be interesting to repeat those experiments under more extreme conditions and with larger number of birds to see if there are any statistical significant results.

6. The current system of production of the vaccine (virus on a cell line) is going to be a commercial challenge as cell lines do not usually produce high titers of viruses, furthermore it is possible that IL2 may decrease those viral titers. It would be good if the author would provide comparative growth curves of NDV in DF1 and DF1-IL2 cell lines.

7. In our experience protection and infectious dose go hand in hand. Usually the higher the vaccine dose the greater the immune response. I would have liked to see the backtiters of those vaccines a the time the experiment was done.

8. I am surprised not to see detection of secretion. Were the methods used sensitive enough to detect 2-3 logs of viruses?

 

Traducción:

Quiero expresar mis congratulaciones con FARVET, una empresa latinoamericana, por realizar este tipo de investigación avanzada sobre inmunología aviar, un área descuidada y con gran potencial. Como se discutió anteriormente este trabajo es preliminar, y hay preocupaciones, sin embargo el tipo de investigacion hecha, es importante. A continuación quisiera añadir algunos otros puntos.
1. La hipótesis de este proyecto es que el IL2 del pollo atenúa el virus de la vacuna viva. No he visto los datos de la patogénesis discutido, pero aparentemente hay una disminución de la virulencia de la vacuna con IL2. Si este es el caso, es bastante sorprendente ver una mayor protección derivada de la misma. Basándome en experiencias pasadas, se espera que las mejores vacunas sean las que causanron el mayor daño al huésped (porque producenjeron una mayor inflamación y respuestas inmunes mejoradas).
2. La IL2 se produjo por una línea celular y se incorporó en la superficie del virión durante la replicación del virus. No he visto los datos que muestran la presencia de IL2 en el virión, sin embargo, incluso si esto está presente en el medio, probablemente tendría un efecto durante la vacunacion. Me gustaría ver pruebas donde de demuestre que la IL2 es realmente parte del virión, ya que esto sería clave para la forma en que se llevará a cabo el trabajo futuro. Si la IL2 estuviese a sólo en el medio, puede ser posible que la IL2 se produzca en la línea celular separada del virus. Esto pudiese ede permitir alcanzar altos niveles de IL2 en esas células, que podrían añadirse entonces a los virus vivos crecidos en títulos elevados en huevos.
3. De acuerdo al disenio de la vacuna Sólo se espera que la IL2 esté presente en el inóculo inicial, por lo que si la citocina atenúa el virus de vacuna se podría esperar que el efecto aparezca sólo durante la infección inicial y sería comparable a un aumento en la dosis infecciosa necesaria. Después del ciclo inicial de replicación en el epitelio, se espera que el efecto desaparezca durante las replicaciones sucessivas del virus vacunal. Si ese es el caso, se podría lograr el mismo efecto demonstrado aca simplemente cambiando la dosis infecciosa a una mas baja.
4. Sin embargo, es posible que la presencia de IL2 durante el primer ciclo de infección induzca algún tipo de cascada de citoquinas que mejore la respuesta inmunitaria inicial y así conduzca a una mejor protección. Algunos estudios in vitro con macrófagos o esplenocitos pueden abordar esta cuestión.
5. Las diferencias de protección observadas en los desafíos parecen estar dentro de la variabilidad normal. Sería interesante repetir los experimentos en condiciones más extremas y con mayor número de aves para ver si hay resultados estadísticos significativos.
6. El actual sistema de producción de la vacuna (virus en una línea celular) va a ser un reto comercial ya que las líneas celulares no suelen producir títulos elevados de virus, además es posible que la tenuacion causada por la IL2 pueda disminuir esos títulos virales. Sería bueno que el autor proporcionara curvas de crecimiento comparativas de NDV en líneas celulares DF1 y DF1-IL2.
7. En nuestra experiencia, la protección y la dosis infecciosa van de la mano. Usualmente, cuanto mayor es la dosis de vacuna, mayor es la respuesta inmune and mayor la proteccion. Me hubiera gustado ver que los autores hayan titulado y presentado los titulos exactos de la vacunas usadas exactamente a los autores de esas vacunas en el momento en que se hizo el experimento.
8. Me sorprende no ver la ninguna detección de la secreción de viruses. ¿Se utilizaron los métodos lo suficientemente sensibles para detectar 2-3 registros de virus?



Fabio abreu
20 de agosto de 2016

Buenos dia mis colegas.Mi pregunta ,!! Por que tiempo FARVET ha esperimentado con (IL-2) y en que tipo de pollos lo esta haciendo ?

Deyanira Acuña Rodríguez
22 de agosto de 2016
Me parece muy interesante, para el comienzo de una importante investigación sobre el tema. Muchas Felicidadessss.
Josue Nerio Sangama Salas
29 de agosto de 2016
Soy hombre de negocio , también trabajo para el estado como técnico de campo y quiero compartir una experiencia que le paso a un compañero de trabajo el tiene una chacra , tiene piscina donde cría Tilapia , pero tambien cría aves de corral (gallinas , patos y pavos . El solo vacunaba a las gallinas para el Newcastle y no asi a los patos y pavos. Resulta que se enfermaron los patos y murieron todos qu7e eran 100 patos aproximadamente y luego pasaron a las gallinas a pesar que eran vacunados y finalmente murieron también los pavos, barrio con todas las aves de corral.
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