Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa

Doctor buenas noches Tiene usted experiencia sobre títulos protectores en reproductoras para reovirus en pollo de engorde? Gracias por su aporte

Saludos Tambien necesito una interpretacion completa sobre Hi de Newcastle. Gracias

Estimada Deisy Me entusiasmo saber que he contribuido positivamente a la comprensión de los métodos diagnósticos, de verdad que bueno. En relación a tu pregunta te comento que tanto la prueba de HI y ELISA son de rutina en la nuestros países, las dos son buenas herramientas, lo que es conveniente es mantener una sola de ella, para poder comparar entre lotes, por ejemplo en HI con vacunas oleosa al primer día y 2 vacunas a virus vivo en campo los títulos pueden oscilar entre 16 y 64. A veces las confusión se da cuando muestreamos por decir 20 muestras de las cuales 1 de ellas hasta 2 de ellas tiene un titulo alto 128, esto no necesariamente quiere decir que tengamos desafío de campo, en este caso lo prudente es tomar las muestras 7 días o 10 días después y verificar nuevamente la titulación, si los títulos fuesen altos, y los signos clínicos son propios de un proceso respiratorio severo ya podríamos asumir que hay un desafió de campo, es mas lo correcto sería pasar a un nivel superior y hacer el aislamiento correspondiente, metodología que no es complicada en un laboratorio, es más te podrían decir el índice de patogenicidad del virus que estas afrontando. Del mismo modo para ELISA es posible que los títulos sean irregulares pero en promedio con el mismo programa de vacunación anterior pueden oscilar entre 1000 y 3500, con algunas muestras con títulos altos y lo mismo que en el caso anterior si hay signos clínicos deberás tomar muestras nuevamente y reevaluar la situación, pero si estas realmente frente a un desafió los títulos son simplemente altos y en esta segunda muestra todos los títulos serán altos entre 5000 a mas por ejemplo. Finalmente te digo que estas son herramientas de diagnóstico indirecto, es decir que leerán la cantidad de Inmunoglobulinas o anticuerpos contra el virus, sin embargo otras afecciones respiratorias pueden distorsionar ligeramente los resultados, por ello es vital la observación clínica de campo. No puedes desde el laboratorio y con un HI ó ELISA hacer una presunción de enfermedad sin ver los parámetros zootécnicos y en general la salud de las aves. Habrá casos que los títulos son altos y los parámetro productivos son aceptables es posible que realmente hubo un desafió pero tu plan de vacunación esta funcionando. Bueno en relación a la cantidad de muestras por lote, lo conveniente sería entre 20 y 24 parta que estadísticamente sea representativa. Para establecer tu línea de base, es conveniente que vayas acumulando datos históricos, y IDEXX tiene en el software una opción para que te informe sobre tu línea de base, que es la determinación de los títulos máximo, mínimos y el promedio de ellos, lo cual va a ser el rango que deberán estar tus títulos como “NORMALES” ojo normales entre comillas, ya que como te repito esto tiene que ver con la salud de las aves y los parámetros zootécnicos. A propósito Deisy escribí un artículo sobre Newcastle y por cierto en el directorio de engormix lo podrás encontrar, y que puede complementar tus inquietudes Saludos y éxitos Carlos Vasquez

Estimado Oscar Las excusas por la tardía respuesta, no me percate de tu comunicación, espero estar a tiempo En estos casos recomiendo hacer un muestreo a todos los nuevos lotes que ingresan, y de allí establecer una rutina que coincidan en el radio de tiempo de una semana como máximo de TODOS los lotes de diferentes edades y de todas las granjas, inicialmente puedes hacer cada 2 meses hasta que tengas data importante y estés convencido que tu programa de vacuna y la salud de las aves están bien respaldadas, después podrías hacer un muestreo trimestral. Hay muchos programas de monitoreo que te recomiendan hacer cada 5 semanas por ejemplo, pero esto se hace engorroso si tienes varios lotes y en varias granjas, por ello es mejor sincronizar todas haciendo un despliegue cada 2 meses de todos tus lotes y en diferentes localidades y en un semana previamente programada, a las finales tendrás títulos en las diferentes edades de la vida de cada uno de tus lotes, que es lo que te interesa. Finalmente en ponedoras es importante hacer monitoreo de Newcastle, Bronquitis, MG, MS, Salmonella. Saludos y éxitos Carlos Vasquez.

Para los Médicos Veterinarios especialistas en Avicultura es cada vez mas difícil dar un diagnóstico Clínico y las pruebas de Laboratorio son herramientas importantes y necesarias para el diagnóstico ,la prueba de Elisa es una de ellas.

Estimado Erick: En relación a la seroconversion para Neumovirus, es un preocupación valida encontrar variabilidad de resultados, pero debemos tener en cuenta varios aspectos: En primer término el tipo de vacuna usada en este caso para pollos, bien sea las homólogas (antígeno de origen de pollo) ó las hidrólogas (antígeno de origen de pavo), está probado que las vacunas heterologas reproducirán menor titulación en el ELISA. En segundo termino el pico de producción de titulo post vacuna se alcanza entre las 4 y 6 semanas post vacuna, por ello en pollos de carne es mas importante el control al matadero. Tercer tema está en relación a que los serotipos relevantes para Latinoamérica son el A B y dependerá del tipo de vacuna usada, desafío ó no desafío de campo (serotipos A ó B), la respuesta mayor ó menor lectura de anticuerpos. Cuarto tema es que varios ELISAs comerciales están disponibles para los subtipos A y B pero existen discrepancias debido a que se producen falsos negativos, Debido a que los ELISAs usan placas cubiertas con un antígeno, ej. Subtipo A, puede ser menos sensible para detectar antígeno B y viceversa. Cuando las aves han sido vacunadas con un tipo, y son retadas con otro o quizás los dos, la interpretación de estas pruebas puede ser difícil. También existe la posibilidad que haya fallas en el procesamiento de la técnica ELISA. Como conclusión: La herramienta ELISA usada en pollos de carne es importante a termino de campaña deberás tener en cuenta el tipo de vacuna usada, y el tipo de kit usado. Finalmente es posible que a termino de campaña encuentre títulos variables dependiendo si has tenido desafío si este fuese el caso seguramente habrá una potenciación de los títulos pues la vacuna podría actuar como una primovacunacion, y no necesariamente con signos de enfermedad. Saludos y éxitos Carlos Vasquez.

Estimado Andrés Las experiencias que he tenido con ELISA para Newcastle, es que son confiables, siempre y cuando se haga la toma de muestra en el tiempo que se ha producido la seroconversión, lo indicado es hacer la primera toma de muestra al encontrar algunas evidencias de problemas sanitarios, luego repetir la los 15 días, te podría asegurar que si es un desafío de campo la seroconversión se dará en ese plazo, la cantidad suficiente como para emprender evaluaciones complementarias como PCR ó un aislamiento viral. Estoy de acuerdo contigo que tenemos que hacer una adecuada anamnesis de lote para poder hacer un adecuado diagnostico, con la finalidad de tomar medidas preventivas. Saludos y éxitos Carlos Vasquez

Estimado Dr. Vasquez: Amén de felicitarlo por tan buen artículo, y sus comentarios, deseo preguntarle lo siquiente: Como Ud. bien señala, la cepa 6/85 de Mg no produce seroconversión. En el caso de pneumovirus ¿Una vacuna ocular debiera producir seroconversión? Hemos registrados casos de lotes vacunados concienzudamente, que no muestran títulos, 3 semanas después de vacunados. En una primera etapa, estamos mandando realizar nuevas serologías, de muestras pareadas en dos laboratorios diferentes para confirmar ó descartar, fallas laboratoriales. ¿Alguna otra sugerencia? Atentos saludos.

Estimadísima Dra. Jenny Pinto. Gracias por su comentario, y estoy de acuerdo con usted, que hay otras herramientas diagnosticas, y que finalmente se completa con el aislamiento viral. Para el caso de elegir entre ELISA ó HI, particularmente considero que la pruebas de ELISA tiene mayor sensibilidad y consistencia en los resultados. Por otro lado considero que es importante que los técnicos de campo estén capacitados para hacer las evaluaciones anatopatologico, así mismo evaluaciones de la productividad, para que una vez resumida toda la historia del lote nos lleve a un diagnostico definitivo. Saludos. Carlos Vasquez.