Comparación de 2 kits comerciales de ELISA para la detección de anticuerpos anti- Actinobacillus pleuropneumoniae en cerdos de piara de alto estado sanitario

Actinobacillus pleuropneumoniae (App) es el agente causal de la pleuroneumonía contagiosa porcina (PCP). App presenta varios serotipos capaces de ser diferenciados por técnicas serológicas. Esto sumado a la capacidad de estas pruebas (fundamentalmente el ELISA) en el monitoreo de las piaras convierte a este tipo de técnicas en una valiosa herramienta diagnóstica (Dubreuil et al., 2000). Dreyfus et al. (2004) desarrollaron un ELISA indirecto utilizando la exotoxina ApxIV, que presenta la particularidad de ser producida por los 15 serotipos, lo que permitiría identificar infecciones activas (agudas y crónicas) con App. Existe otro ELISA capaz de diferenciar entre grupo de serotipos y además, un tercer ELISA que detecta anticuerpos contra las toxinas ApxI y contra la TbpII. El objetivo de este trabajo fue comparar los resultado serológicos obtenidos entre 2 kits comerciales de ELISA en sueros de cerdos provenientes de piara de alta salud.

 

Se trabajó con 129 sueros de animales de 21 semanas de edad, provenientes de una granja en donde se había aplicado un programa de despoblación parcial. En la granja había sido identificado en el año 2000 el serotipo 15 de App pero al momento del estudio no había evidencia clínica ni lesiones pulmonares compatibles con PCP. Las muestras de suero fueron procesadas con los kits comerciales de CHEKIT APP ApxIV de IDEXX y CIVTESTTM SUIS APP de HIPRA. Se realizó una comparación de proporciones –de los seropositivos a cada kit- (chi2) – Epidat 3.1. Debido a lo novedoso del kit de ELISA de HIPRA y a los antecedentes de la granja respecto a App se decidió analizar también las muestras que dieron positivos al kit CIVTESTTM SUIS APP de HIPRA con el kit serotipo-específico SwineCheck® 3,6,8 de BIOVET.

 

Dos sobre 129 (1,5%) sueros fueron positivos al kit CHEKIT APP ApxIV de IDEXX y 24/129 (18,6%) fueron positivos al kit de CIVTESTTM SUIS APP de HIPRA. El valor p fue 0,0005 ((IC 95%) – 0,195 a – 0,053). Las 24 muestras de suero que habían dado positivas al kit CIVTESTTM SUIS APP de HIPRA fueron negativas al ser testeadas por el kit SwineCheck® 3,6,8 de BIOVET. Ninguno de los sueros positivo a un kit lo fue al otro.

 

Al tratarse de una piara saneada y debido a los antecedentes de la misma en donde no había signología clínica ni lesiones pulmonares compatibles con PCP puede afirmarse que la misma es una granja en la que la entidad clínico- patológica denominada PCP no está presente. Esto se ve reflejado con las baja y nula proporción de seropositivos obtenidos con los kits de CHEKIT APP ApxIV de IDEXX y SwineCheck® 3,6,8 de BIOVET respectivamente.

Respecto al relativo alto porcentaje de seropositivos hallado utilizando el kit CIVTESTTM SUIS APP de HIPRA puede ser debido a una reacción cruzada detectando anticuerpos producidos contra antígenos de otras bacterias relacionadas con App. El kit detecta anticuerpos contra las proteínas ApxI (hemolisina) y TbpII (transferrin binding protein). El gen de la TbpII no sólo se ha detectado en los distintos serotipos de App sino también en Actinobacillus equuli (de la Puente-Redondo et al., 2000). Actinobacillus suis también presenta el gen apxICABD (Schaller et al., 2000) y la presencia de la toxina (apxI) ha sido demostrada. Además, se ha demostrado cierto grado de falsos positivos al utilizar la técnica de neutralización de la hemolisina ApxI (Montaraz et al., 1997).

El kit de BIOVET tiene una sensibilidad y una especificidad del 99,9% (de acuerdo con los fabricantes). Sin embargo, Oliveira (2009) al comparar este kit con otro basado en la detección de anticuerpos contra LC-LPS de App (Multi-APP), encontró inconsistencias del mismo, al menos el que detecta los serotipos 1,9, 11 y 10.

El uso de cada kit para diferentes situaciones es aconsejable ya sea para determinar infecciones activas, determinar el serotipo circulante en la piara u obtener una dinámica de los anticuerpos en la población.

 

Dubreuil, D. 2000. Animal Health Res Rev. 1 (2): 73-93.

Schaller, A. et al. 2000. Vet Microbiol. 74, 365-376. Oliveira, S. 2009. NPB #08-095. Swine Health. Pork Chek off. e-file

de la Puente-Redondo, V.A. et al. 2000. Res Microbiol. 151: 669-681.

Dreyfus, A. 2004. Vet Microbiol. 99(3-4):227-38.