Engormix
Ingresar o registrarme
Engormix.com
Discusion creada el 28/01/2009

Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.

Queridos compañeros,quisiera saber si ustedes me pueden ayudar con sus conocimientos para realizar un protocolo de criopreservacion o congelacion de embriones bovinos, y luego la posterior descongelacion para implantarlos, quisiera saber tambien los procedimientos y tecnicas.
Cualquier aporte les quedo inmensamente agadecido.

MAURICIO QUINTERO.
(5380)
(20)
Jairo S.
down arrow
Bucaramanga, Santander, Colombia
Médico Veterinario Zootecnista
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
28/01/2009 | Hola Mauricio,

El protocolo de criopreservación de los embriones es bastante sencillo. Una vez has sacado los embriones y clasificado los mismos procedes a lavarlos en las 10 gotas de medio de mantenimiento. Luego los pasas a etilenglicol (EG) y ya se encuentran listos para llevarlos a la congeladora. Para montar la pajilla debes primero aspirar una columna de EG, luego una de aire, luego una de EG, luego una de aire, luego el embrión y luego repites el proceso con EG y aire 2 veces más. Pones el tapón a la pajilla y la llevas a la congeladora.

Una vez las pajillas se encuentran en la congeladora haces el seed de la pajilla que no es otra cosa que pasar un hisopo con nitrógeno líquido por las puntas de la pajilla para evitar que se formen cristales que dañen el embrión. La máquina llevará los embriones a -6° luego a -32° y luego irán a -196° en el termo.

Luego para transferir los embriones debes seleccionar las mejores receptoras de tu hato. Es recomendable que estas receptoras sean cruces de Bos Taurus x Bos Indicus pues estas tienen mejor habilidad materna y mayores índices de preñez que las cebuinas. Estas novillas no deben haber estado con toro y si son vacas de segundo parto no deben haber tenido retención de placenta, metritis y etcétera. Es obvio que las receptoras deben ser animales en muy buen estado de carnes y con muy buena sanidad.

Al lote destinado a recibir los embriones congelados les harás un seguimiento de al menos 30 días para observar celos y medir las ganancias de peso. Los animales que no estén ciclando ni ganando peso no son recomendables para este trabajo. Luego de elegir las novillas las sincronizas. Para ello puedes utilizar dos métodos: induciendo la luteolisis por medio de prostaglandinas o prolongando la fase lueteal por medio de dispositivos liberadores de progesterona.

Para transferir un embrión en una novilla mediante la inducción de la luteolisis también puedes hacerlo de dos formas. Con toda seguridad habrá más métodos pero yo conozco estos y funcionan.

Palpas el CL y con una inyección única de PGF2a esperas que entre 60 y 72 horas se presente el celo. A los 7 días de haber visto el celo transfieres el embrión. Otra forma es aplicando 1 inyección de PGF2a, a los 11 días repites el tratamiento y en 3 días se debe presentar el celo. A los 7 días de presentado este celo transfieres el embrión.

Para transferir embriones en novillas sincronizadas mediante la prolongación de la fase lueteal puedes utilizar el siguiente protocolo: el día 0 pones el dispositivo intravaginal y el benzoato de estradiol. El día 5 aplicas la prostaglandina yla eCG.El día 8 retiras el dispositivo y el día 9 aplicas nuevamente benzoato de estradiol. En este protocolo no se detecta celo y el embrión se transfiere el día 17 a aquellos animales cuyo CL sea superior a 10mm. Para ello es muy recomendable hacer diagnóstico ecográfico del tracto reproductivo antes, durante y después del tratamiento.

En ambos casos el embrión debe ser transferido en el cuerno donde se encuentra el CL. Eso es todo lo que recuerdo en el momento. Espero haber sido de ayuda.

Éxitos en tu empresa.
(2)
(0)
Jairo S.
down arrow
Bucaramanga, Santander, Colombia
Médico Veterinario Zootecnista
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
28/01/2009 | Ah, olvidaba lo de la descongelación. El embrión se descongela en agua a 25°C durante 30 segundos. La receptora recibe anestesia epidural y una vez deposites el embrión puedes poner un antiprostaglandínico pues está demostrado que mejora los resultados. Eso es todo.
(0)
(0)
Mauricio Quintero
down arrow
Medellin, Antioquia, Colombia
Médico Veterinario
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
28/01/2009 | Gracias por tu informacion Doctor Serrano, quisiera saber sobre que maquina de congelación me habla y sobre los medios de
mantenimiento, y en el caso de Fertilización In vitro se sigue el mismo procedimiento???

Gracias, Mauricio Q.
(0)
(0)
Jairo S.
down arrow
Bucaramanga, Santander, Colombia
Médico Veterinario Zootecnista
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
29/01/2009 | El medio de mantenimiento es el PBS o Dubelcco Buffer Fosfato. Los embriones que van a ser transferidos en fresco, es decir de la donadora a la receptora directamente van en PBS mientras que los embriones que van a ser congelados para ser transferidos luego van en etilenglicol (EG).

La congeladora de embriones puede ser la CL 2200 o la CL 5500. También vas a necesitar un Estereomicroscopio y un ecógrafo.
(0)
(0)
Jairo S.
down arrow
Bucaramanga, Santander, Colombia
Médico Veterinario Zootecnista
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
29/01/2009 | Olvidé lo de los embriones in vitro. Esos no se congelan. Se obtienen los oocitos por aspiración folicular y se fertilizan.
(0)
(0)
Mauricio Quintero
down arrow
Medellin, Antioquia, Colombia
Médico Veterinario
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
30/01/2009 | Pero luego de fertilizados in vitro, cuando el embrión esta en estadio de blastocisto, también se pude congelar?
(0)
(0)
Jairo S.
down arrow
Bucaramanga, Santander, Colombia
Médico Veterinario Zootecnista
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
02/02/2009 | Hola Mauricio,

Al menos aquí en Colombia no se congelan los embriones in vitro. Estos se llevan a la receptora inmediatamente.
(0)
(0)
Victor V. Villarreal
down arrow
Ciudad de Panama, Panama, Panamá
Ing. Zootecnista
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
15/05/2011 | ok. entiendo que se lavan los embriones en medio de mantenimiento que contiene etilenglicol con 1.5 M, cinco veces y dos veces en tripsina y luegos otras 5 veces en etilenglicol con 1.5 M y se depositan los embriones en etilenglicol y se realiza el empajillado como lo indico el compañero Jairo Santander

Victor Villarreal
(1)
(0)
Luis Cuadros Moreno
down arrow
Bogota, Cundinamarca, Colombia
Ing. Zootecnista
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
24/06/2011 | Hola Buenas noches.

Aprovechando la intervención del doctor Jairo Serrano, leí en unos documentos sobre transferencia de embriones que una vez la hembra bovina ha sido superovulada se deben realizar entre dos a tres inseminaciones para fecundar la mayor cantidad de óvulos posible. Quisiera saber ¿ con que espacios de tiempo se realizan las inseminaciones ?

Y por otro lado, hablando de los equipos para realizar la colecta de los embriones ¿ la sonda o cateter Foley es reutilizable ?

Muchas gracias Dr. Jairo
(0)
(0)
JOSE ARMANDO PAZ MORALES
down arrow
Tenosique, Tabasco, México
Ing. Agrónomo Zootecnista
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
06/11/2011 | SI ALGUIEN ME PUEDE APOYAR

En una congeladora de embriones, la resistencia de color negro, que se introduce en una caja de unicel,.... ¿cual es el nivel optimo de llenado de nitrógeno ? .

Ademas trae un accesorio de plástico que parece un vaso negro pequeño, ¿este para que sirve?.

ultima ´pregunta... es necesario sellar la pajilla con calor para congelar embriones o con el tapón es suficiente ¿cual es el procedimiento adecuado una vez que esta empajillado el embrión?
(0)
(0)
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
12/02/2012 | El Dr Serrano olvido mencionar algunos detalles bien importantes

El tiempo que se debe demorar en el proceso entre la colocacion del embrion en Etilenglicol y el enpajillamiento NO debe exceder mas de 5 minutos (toxicidad del medio) luego el tiempo entre el enpajillamiento y el seeding tampoco puede pasar de otros 5 minutos como maximo.

(El seeding se debe realizar maximo a los 10 minutos de estar en contacto el embrion con el etilenglicol), ya despues de haber hecho el seeding en cada pajilla puede estar en la cryocamara del congelador mas tiempo sin problema, esta cryocamara debe estar a -6 grados centigrados, para esto debe tener nitrogeno liquido y arrancar el programa anteriormente. La congeladora se demora aprox 1 hora para bajar a -32 grados, luego se estabiliza por 15 min y luego se colocan en la canastilla del termo a -196 grados.

Para descongelar se debe realizar en termo con agua a 30 grados, durante 10 a 15 seg. El medio de transferencia No es solo PBS debe llevar antibiotico-antimicotico, suero fetal bovino (Comercialmente su nombre es HOLDING, y lo produce BIOLIFE, VIGRO,EMCARE.

No es completamente necesario Ecografo para realizar transferencia de embriones, es una gran ayuda, pero si ud es bueno en palpacion diagnostica no necesita comprarlo.

Los embriones producidos INVITRO tienen bajos resultados de implantacion con la congelacion lenta, para ellos el ideal es vitrificacion, asi obtenemos tasas de preñez similares a embriones producidos in vivo y congelados lento.

Para transferencia de embriones se debe inseminar al menos 2 veces con intervalo de 12 horas entre las dos, o 3 veces a las 6-12 y 18 horas de la primera monta a la donante. El cateter de Foley latex es desechable, No se debe reutilizar,hay tambien Foley de silicona reutilizable autoclavable, pero el balon con mas de dos o tres usos se rompe.

Para enfriar la cryocamara se debe colocar nitrogeno hasta la mitad primero, y luego de conectado el controlador de temperatura se debe llenar total.

El vaso negro es el tapon para cubrir las pajillas , el tamaño de este tapon depende de el tipo de sello que se le cocloque a la pajilla de embriones, si es corto, largo o si lo que lleva la informacion del embrion es otra pajilla con conector.

Para embriones se puede sellar la pajilla de las dos maneras con calor dejando un espacio de aire en la punta 2mm, o con el tapon. El problema es que si por alguna razon el tapon no queda bien colocado entrara nitrogeno a la pajillla y en el momento de descongelarla puede rajarse o explotar al entrar en contacto el nitrogeno con el aire perdiendose a veces el embrion.


FELIZ REPRODUCCION
(4)
(0)
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
27/03/2013 | Doctor Barrero Buenas tardes, podriamos comunicarnos via email?. Deseo enviarle informacion de pie de cria lechero.
Gracias JAVIER BETANCOURT
(0)
(0)
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
28/03/2013 | Tengo experiencia en vitrificación de embriones producidos in vitro e in vivo, utilizando como crioprotector base la Dimetilformamida, mezclada con dimetilsulfoxido. Este proceso consiste en exponer los embriones por poco tiempo (25 seg) a una alta concentración de crioprotectores y empacarlos (2 a 3 embriones) en una OPS open pulled strow (pajilla abierta y estirada) esta es una pajilla de 0.25 cc que mediante un proceso de exposición al calor, se logra estirar, tratando de reducir su volumen y su diametro, los embriones son cargados por capilaridad con solo tocar las gotas en donde se encuentran los embriones y la mezcla de los crioprotectores. Este metodo descarta la posibilidad de usar equipos (congeladores automaticos), nuestro grupo de trabajo ha evaluado la sobreviviencia posdesvitrificación con resultados alentadores
(0)
(0)
Isaias Rostran
down arrow
Boaco Viejo, Boaco, Nicaragua
Productor Lechero
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
06/04/2013 | amigos foristas; todos aportan,pero miro que nadie da imformacion exacta del procedimiento con detalles esenciales como; cantidad de PBS,holding etc. equipo a utilizar.quien vende estos productos si son carisimos.
gracias amigos
(0)
(0)
Juan Diego Mejia Cardona
down arrow
Medellin, Antioquia, Colombia
Productor Ganadero
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
30/04/2013 | Sin tanto rodeo, alguien me puede decir mas o menos en Antioquia, Colombia, cuanto me cuesta pegar un embrion o existen empresas en Colombia que me cobren por embrion pegado, o me vendan las receptoras preñadas y a como me pueden costar preñadas de simmental... Gracias, hablo de embriones comerciales no de super estrellas, mi objetivo es tener la raza pura y ya luego multiplicarla.
(0)
(0)
Isaias Rostran
down arrow
Boaco Viejo, Boaco, Nicaragua
Productor Lechero
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
02/05/2013 | hola amigos todos :ya hice la misma pregunta.pero no importa,aqui voy de nuevo:en los videos te hablan de las vondades que da la transferencia de embriones pero a mi me dicen que eso es solo para grandes ganaderos. y dificil de aprender¿es sierto eso?me dicen cuanto cuesta producir tus propios embriones? gracias a todos.
(0)
(0)
Juan Camacho
down arrow
Tostado, Santa Fe, Argentina
Médico Veterinario
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
28/06/2013 | Hola amigo, la tecnica es sencilla, lo debe realizar un especialista desde ya, pero hay muy buenos aqui en Argentina, que brindan el servicio, en tu pais los debe haber, y es una tecnica que esta al alcance de cualquier productor que lo necesite para mejorar su rodeo, solo hay que estar decidido a hacerlo,y ser muy paciente, los resultados se ven con el tiempo...saludos amigos.
(0)
(0)
Isaias Rostran
down arrow
Boaco Viejo, Boaco, Nicaragua
Productor Lechero
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
28/06/2013 | amigo juan camacho:agradesco su contestacion.pues desde mayo hice la pregunta y nadie habi acontestado;le imformo que en centroamerica alos gobierno les vale un bledo no traer esta tecnica y mucho menos ala empresa privada,he querido pasar un curso completo sobre reproduccion bovino,desdee la superovulacion,transferencia de embriones,crioconservacion y aspiracion folicular,pero aqui ni la transferencia de embriones existe sino que tienen que venir de otro pais a hacerlo alos grandes ganaderos y menos del .009 de la poblacion de ganaderos sabe de que existe esta tecnica,que pena;ultima pregunta¿existen otros productos igual al Folltropin,ya que considero demasiado caro $160.dolares. gracias y saludos
(0)
(0)
Juan Camacho
down arrow
Tostado, Santa Fe, Argentina
Médico Veterinario
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
29/06/2013 | Hola amigo, no conocia la situacion en tu pais, aqui a la Argentina llegan muchos colegas a capacitarce especialmente colombianos, ecuatorianos,paraguayos,etc, tecnica que aplican en su pais algunas empresas locales, este año hicimos una capacitacion en el INTA Balcarce,(dictada por el Dr Ricardo Alberio) con unos ecuatorianos que pertenecian a dependencias del gobierno y otros a empresas privadas, quiero decir que se estan interesando por la tecnica en paises hermanos y me parece perfecto, un alstima que alli no la difundan, existe otro producto de nombre Pluset( FSH y LH )de 20 ml, entiendo que es mas economico..saludos amigo.
(0)
(0)
Isaias Rostran
down arrow
Boaco Viejo, Boaco, Nicaragua
Productor Lechero
Re: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.
29/06/2013 | Hola Doctor Camacho,buen dia a todos los amigos foristas,aprecio su informacion,me gustaria tener su correo electronico para saber cuando son las proximas capacitaciones duracion y costo del mismo en la Argentina. al repecto,o saber si alguien de los compañeros foristas saben de algun centro que imparta estos cursos aqui en Centro America,favor dejarmelo saber.gracias saludos desde Nicaragua.
(0)
(0)
(5380)
(20)
¿Desea opinar en esta discusión sobre: Criopreservacion y congelacion de embriones bovino.?
Engormix se reserva el derecho de suprimir y/o modificar comentarios. Ver más detalles

No se publicarán comentarios que contengan:

  • Reiterados errores ortográficos y de escritura.
  • Anuncios publicitarios, direcciones de sitios Web y/o correos electrónicos.
  • Preguntas o respuestas que no tengan relación con el tema tratado en el foro.
PUBLICAR OPINIÓN
Crear nueva discusión:
Si esta discusión no cubre los temas de su interés, o genera nuevas preguntas, puede crear otra discusión.
Consultar a un Profesional en privado:
Si tiene una problemática específica puede realizar una consulta en forma privada a un profesional de nuestra Comunidad.
Hernando Lopez
Hernando Lopez
Ph. D.
  Madison, Wisconsin, Estados Unidos de América
Videos (10)
Programas de Sincronización e Inseminación Artificial en Rodeo de Carne. Ponencias Antonio Lucero y Alfonso Monge.
 
 
INTRODUCCION E n nuestros días la demanda imperiosa de producir alime...
 
1-  INTRODUCCIÓN La evaluación del semen congelado tiene ...
Que tal favor busco informacion acerca curso inseminación artificial bovinos a...
 
En visitas diferentes hatos donde se reportan problemas reproductivos he encontr...
Servicios Profesionales
Alejandro R. Castillo Alejandro R. Castillo
Merced, California, Estados Unidos de América
Hernando Lopez Hernando Lopez
Madison, Wisconsin, Estados Unidos de América
Jose Amado Morrobel Jose Amado Morrobel
Lakeland, Florida, Estados Unidos de América
Jorge Carlos Reyes Guerra Jorge Carlos Reyes Guerra
Miami, Florida, Estados Unidos de América
    |     ¿Quiénes somos?     |     Publicite en Engormix
Copyright © 1999-2014 Engormix.com - All Rights Reserved