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Diversidad de Moraxella spp. y queratoconjuntivitis infecciosa bovina en Uruguay

Publicado: 12 de septiembre de 2008
Por: Vanessa Sosa y Pablo Zunino - Depto. de Microbiología, Instituto de Investigaciones Biológicas Clemente Estable. Uruguay
La queratoconjuntivitis infecciosa bovina (QIB) es una severa enfermedad ocular que afecta a los bovinos, cuyo principal agente etiológico es la bacteria Gram negativa Moraxella bovis. Esta enfermedad está ampliamente distribuida en diversas regiones de distintos continentes y constituye un serio problema sanitario que afecta al sector ganadero (Brown et al., 1998).


Introducción

La queratoconjuntivitis infecciosa bovina (QIB) es una severa enfermedad ocular que afecta a los bovinos, cuyo principal agente etiológico es la bacteria Gram negativa Moraxella bovis. Esta enfermedad está ampliamente distribuida en diversas regiones de distintos continentes y constituye un serio problema sanitario que afecta al sector ganadero (Brown et al., 1998).

La principal medida de prevención de la QIB, como en el caso de otras enfermedades infecciosas animales, es la vacunación. Sin embargo, el caso de Moraxella spp. presenta particularidades que hacen que el desarrollo y producción de vacunas efectivas sea una tarea en permanente revisión.

Como ya se ha comentado en notas anteriores, M. bovis posee una serie de atributos importantes para la colonización ocular y desarrollo de la enfermedad. Entre ellos se destacan los pili (o fimbrias), organelos de naturaleza proteica que protruyen hacia afuera de la superficie bacteriana y que son responsables de la adhesión a las células epiteliales de la córnea y posterior progreso de la enfermedad. Esto convierte a estas estructuras en los blancos predilectos sobre los cuales basar la formulación de las vacunas, buscando inducir una respuesta inmune en el huésped que interfiera con la adhesión inicial de la bacteria a las células oculares y así inhibir el desarrollo de la enfermedad.

Sin embargo, los pili presentan una significativa variabilidad antigénica dependiente estrechamente de la cepa, es decir que la respuesta inmune capaz de proteger al animal estará fuertemente relacionada con la o las cepas responsables de los brotes (Atwell et al., 1994). En consecuencia, el análisis de la diversidad de las cepas de M. bovis es un requisito esencial para el diseño de un programa inmunoprofiláctico exitoso basado en vacunas efectivas ya que la protección está estrechamente relacionada con las cepas responsables de los brotes exigiendo una continua caracterización bacteriana.

A pesar de que la QIB causa serias pérdidas económicas en Uruguay, existen pocos datos disponibles acerca de la diversidad y distribución de cepas de M. bovis. Por otra parte, estas situaciones varían con el correr del tiempo por lo que es necesario realizar estos tipos de monitoreo en forma periódica.

Actualmente, en el Departamento de Microbiología del Instituto de Investigaciones Biológicas Clemente Estable, y en colaboración con Laboratorios Santa Elena, se está llevando a cabo un estudio de diversidad de cepas responsables de brotes de QIB a nivel nacional. Los resultados obtenidos en este estudio permitirán analizar la diversidad intraespecífica de M. bovis, comparar las cepas circulantes con aquellas empleadas en la elaboración de vacunas y contribuir de esta forma con la producción de estrategias de prevención eficaces para el control de eventuales brotes de la enfermedad. Otro objetivo del estudio es evaluar la compleja flora bacteriana asociada a casos de QIB en bovinos.


Resultados

Hasta el momento se generó una amplia colección de aislamientos obtenidos de brotes de QIB que fueron colectados en diferentes años (1983-2007) provenientes de diversas zonas del país. Los diversos aislamientos se identificaron y caracterizaron por medio de diversas aproximaciones clásicas y moleculares.

Inicialmente se realizó una caracterización fenotípica macroscópica (forma, borde, color y tamaño de la colonia) y microscópica (características tintoriales, forma bacteriana y patrón de agrupación celular). Además, se efectuó la caracterización bioquímica que incluyó una amplia variedad de pruebas incluyendo movilidad bacteriana, producción de oxidasa, catalasa, ureasa, gelatinasa, desoxirribonucleasa y hemolisinas, ensayos de óxido- fermentación (OF), producción de ácido o ácido y gas a partir de glucosa, sacarosa y lactosa (TSI), diseminación del triptofano y fenilalanina y capacidad de crecer en diferentes medios de cultivo. La caracterización fenotípica y bioquímica demostró que la mayoría de los aislamientos en estudio presentaban en general las características esperadas inicialmente para Moraxella ssp.

Por otro lado, la confirmación de la identidad bacteriana se llevó a cabo determinando la secuencia nucleotídica de los genes que codifican para el RNA ribosomal (rRNA) 16S así como regiones de los genes que codifican para el rRNA 23S y el espaciador intergénico (ITS), previamente amplificados por PCR (Figura 1).
Diversidad de Moraxella spp. y queratoconjuntivitis infecciosa bovina en Uruguay - Image 1
Los resultados de las secuencias permitieron corroborar que la mayoría de las cepas correspondían al género Moraxella. Curiosamente dentro del grupo de cepas aisladas de casos clínicos pertenecientes al género, además de M. bovis se determinó la presencia de una especie muy cercana y recientemente propuesta como tal denominada Moraxella bovoculi (Angelos et al., 2007).

El análisis de similitud de las secuencias de otras cepas aisladas indicó que se trata de otros géneros o especies bacterianas que conformarían la flora normal asociada a la QIB. Entre ellos se puede destacar la presencia, entre otros, de Acinetobacter spp., Stretptococcus spp., Cellulomonas spp., Staphylococcus spp., Pasteurella multocida y Microbacterium spp.

Una pregunta adicional a resolver es si esta flora asociada corresponde a una colonización secundaria del ojo afectado o si desempeña algún rol en la patogénesis de la enfermedad.

Finalmente, también está en curso el estudio de diversidad genética de las cepas mediante distintas técnicas moleculares. Estas técnicas, basadas en PCR, permiten determinar distintos genotipos correspondientes incluso a cepas pertenecientes a una misma especie. Inicialmente se están caracterizando las cepas por medio de RAPD-PCR (Randomly Amplified Polymorphic DNA) utilizando diferentes primers.

Por medio de esta técnica de evaluación de diversidad genética se obtuvieron diversos patrones de bandas correspondientes a cepas de distintos orígenes geográficos y fechas de aislamiento (Figura 2). Se pudo determinar una importante diversidad genética entre la colección de aislamientos a través de la presencia de diversos patrones de bandas incluso en un mismo brote de QIB.
Diversidad de Moraxella spp. y queratoconjuntivitis infecciosa bovina en Uruguay - Image 2
Estos resultados indican que en principio existe una elevada heterogeneidad genética entre las cepas de Moraxella spp. causantes de QIB circulantes en nuestro país lo que ratifica la necesidad de realizar monitoreos para evaluar la situación en forma periódica y optimizar las estrategias de elaboración de vacunas e inmunización.

Actualmente se están realizando estudios adicionales con el objetivo de analizar la diversidad de las cepas asociadas a la QIB en nuestro país mediante el empleo de otras técnicas de biología molecular que permitirán ampliar los resultados obtenidos hasta el momento.


Referencias
  • Angelos, J.A., Spinks, P.Q., Ball, L.M., George, L.W. 2007. Moraxella bovoculi sp. nov., isolated from calves with infectious bovine keratoconjunctivitisInt. J. Syst. Evol. Microbiol. 57: 789-795.
  • Atwell, J.L., Tennent J.M, Lepper A.W.D., Elleman T.C. 1994. Characterization of Pilin Genes from Seven Serologically Defined Prototype Strains of Moraxella bovis. J. Bacteriol. 176:4875-4882.
  • Brown, M.H., Brightman, A.H., Fenwick, B.W., Rider, M.A. 1998. Infectious bovine keratoconjunctivitis: a review. Vet. Intern. Med. 12(4):259-66.
  • Departamento de Microbiología, Instituto de Investigaciones Biológicas Clemente Estable, Avenida Italia 3318, Montevideo, Uruguay.
  • Información publicada por el Boletín Informativo de Laboratorios Santa Elena el día 10 de septiembre de 2008.
Temas relacionados
Autores:
Pablo Zunino
Instituto de Investigaciones Biológicas Clemente Estable (Uruguay)
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MSc. Vanessa Sosa
Instituto de Investigaciones Biológicas Clemente Estable (Uruguay)
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Oscar Frances
Universidad Nacional de La Pampa - Argentina
26 de octubre de 2008
Deseo reforzar la orientación que por los diversos comentarios va tomando este foro de QUB. La Facultad de Ciencias Veterinarias, UNLPam,Argentina, ha realizado muchos hisopados conjuntivales oculares para determinar posible prsencia de Moraxella u otras bacterias, concluyendo que es BAJISIMA la responsabilidad de Moraxella en las lesiones oculares, y presuponemos que la gran sesponsable es IBR: cuando logramos buena inmunidad ante este virus, la QIB no se presenta. Esto ayuda a concluir que un rápido diagnóstico presuntivo de IBR y su tratamiento antibiòtico es apresurado e ineficiente en la mayoría de los casos. Nos inclinamos mas por lograr una buena inmunidad ante IBR, y si aparece el problema utilizar elevadores inespecíficos de defensas locales MAS algúntratamiento antibiótico, también local, para bloquear las bacterias oportunistas,aquí si puede estar Moraxella.Ello explica algunas fallas de la infalible Tilmicosina.
Claudio E. Glauber
UCES
22 de octubre de 2008
Articulo de alto nivel científico. Mi consulta a los autores es respecto a la aplicación preventiva o terapéutica de estimulantes naturales de las defensas o sistema inmunitario para establecer remisión. Otra consulta se refiere al tiempo de evolución y su pronóstico. Tienen información al respecto. Gracias, Claudio E. Glauber.
Angel Ciro Cano Jaimes
7 de junio de 2011
EN MI COMENTARIO ANTERIOR ME OLVIDE DE DAR EL TRATAMIENTO PARA LA QUERATOCONJUNTIVITIS,UN TRATAMIENTO MUY EFECTIVO ES LA APLICACION DE DE 0.5 ML DE OXITETRACICLINA L.A SUBCUNJUNTIVAL O EN SU DEFECTO NUFLOR ACOMPAÑADO ESTO DE LA COLOCACION DE POMOS ANTIMASTICOS CON GENTAMICINA Y CEFALEXINA. ( CEFA MILK ), LA POMADA SE APLICA DIARIAMENTE HASTA QUE LA INFECCION SEDA...NORMALMENTE EN TRES DIA LA MEJORIA ES SUMAMENTE NOTABLE........ MV. ANGEL CANO
Angel Ciro Cano Jaimes
7 de junio de 2011
AMIGOS FORISTA LA PRESENCIA DE QUERATOCONJUNTIVITIS EN UN REBAÑO DE BECERROS DE ORDEÑO CON POCA O NADA DE MOSCAS SOMETIDOS A ESTRES NUTRICIONAL, CON MUERTES DE BECERROS, INEQUIVOCAMENTE ESTAMOS ANTE LA PRESENCIA DEL COMPLEJO ( IBR-DVB ) NOS ESTA CIRCULANDO EN EL REBAÑO......SU CONTROL ES MUY SENCILLO VACUNAR CON TRIANGLE 9 TODO EL REBAÑO Y TRATAR LOS BECERROS ENFERMOS CON NUFLOR A RAZON DE 3 ML X CADA 15 KGR.....LOS BECERROS MUY AFECTADOS POR LA NEUMONIAS TIENEN POCA RESPUESTA AL TRATAMIENTO, USUALMENTE MUEREN SU APARATO INMUNOLOGICO ESTA DEMACIADO DEPRIMIDO PARA RESPONDER ANTE EL DESAFIO INFECCIOSO QUE LO AFECTA.....ESPERO ESTE COMENTARIO LES SEA UTIL. GRACIAS. .... MV. ANGEL CANO.
Jose Angel Reyes
31 de mayo de 2011
A mi me funciono rápidamente unas gotas de un medicamento con gentamicina con dos gotas al día se arreglo el problema también se tiene que tener en cuenta la eliminación de los probables causas de el problema como la dureza de la caña de el pasto y el polvo que suelta este en su etapa de madurez yo le pase con un aireador a la pasta para tumbar el polvo de el mismo pasto y donde estaba el caño duro le di una pasada con la chapoleadora y también usar insecticidas que a parte de controlar las garrapatas controlen las moscas asi como controlar los tiraderos de agua en las áreas de descanso y bebederos de los animales
Carlos Vidal
Ganaderia El Descanso
1 de agosto de 2010
Saludos Foristas, ingreso a este foro por presentar problemas en mi explotación pecuaria de tipo ocular, en becerros, pero en los cuales no hay secreciones que indiquen infección, sin embargo, a las crías (becerros) se les forma una nube que recubre la pupila y limita su visión. Seguirá siendo esto causa por bacterias?
Fernando Anselmino
Fernando Anselmino
23 de febrero de 2010
Estimados: Soy bacteriólogo y hace tiempo que fabrico una vacuna con Moraxellas aisladas de casos de queratitis, el adyuvante que empleo es oleoso. Los resultados suelen ser buenos. El tema es esto , es la variabilidad genética de los pillis. A sus ordenes Fernando
Danilo Gonzalez
AgroTech (Uruguay)
6 de noviembre de 2008
Yo participe en la elaboración de un articulo técnico no publicado aún en la Facultad de la República, Uruguay. En el cual se buscó la relación de IBR - Queratoconjuntivitis, y para la sorpresa de nosotros, no existe asociación significativa entre estas dos enfermedades, si observamos un mayor grado de lesión en animales con títulos positivos a IBR. Los animales evaluados fueron categorías de 1 a 2 años, raza hereford y cruza. Los animales positivos a IBR eran muchos y los afectados con moraxella spp. se vieron en las dos poblaciones.
Jorge Cruz Patiño
Jorge Cruz Patiño
26 de octubre de 2008
El artículo publicado de Queratoconjuntivitis es importante, he leiodo los comentarios de los colegas, por supuesto que enrriquecen al artículo. Quiero indicar también que es importante nombrar a la raza como un factor predisponente, principalmente aquellas de piel clara o poco pigmentadas, como habran podido notar los colegas Uruguayos. Concordar con los colegas que el tratamiento con antibióticos (tetraciclina, gentamicina) principalmete en forma de spray son efectivos, así como las autovacunas empleadas. Es importante el trabajo que estan efectuando quienes publicaron este artículo para conocer las cepas variantes antigénicamente para elaborar vacunas efectivas. Gracias.
Carlos Alonzo Perdomo
24 de octubre de 2008
Muy bueno dicho tema y es una enfermedad que ha aumentado su incidencia en forma importante, en todos los rodeos de cría y recría disminuyendo la enfermedad en el animal adulto. He trabajado enviando muestras al Lab. Santa Elena para identificar cepas en rodeos de mi país. Considero que tiene mucho más acción el IBR en la queratitis que la Moraxella, es una opinión personal de observación de trabajo, en los rodeos que vacuno contra enfermedades reproductivas (que tiene IBR -DVB) en el correr de los años disminuyo la enfermedad y el uso de vacunas de Moraxella-IBR me ha dado muy buen resultado, haciendo 2 vacunaciones.
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