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Eficacia del nematodo butlerius sp. y de hongos nematófagos contra haemonchus contortus (l3) en pasto

Publicado: 28 de julio de 2015
Por: Manuel Eduardo da Silva1 , Miguel Ángel Mercado Uriostegui2,3, Enrique Liébano Hernández2 Pedro Mendoza de Gives2 1.Departamento de Veterinaria - UFV, Vicosa / URECO/EPAMIG. 2-Área de Helmintologia, CENID – Parasitologia, INIFAP 3- Ingeniería en Biotecnología, Universidad Politécnica del Estado de Morelos
Resumen

Este estudio evaluó la actividad depredadora del nematodo Butlerius sp y aislados fúngicos de las especies D. flagrans, C. rosea, A. musiformis y T. esau en contra de larvas infectantes (L3) de H. contortus en macetas. Se utilizaron 48 macetas de plástico de 90 x 65 mm. En cada maceta se añadieron 140 g de suelo esterilizado y 0.2 g de semillas de pasto Panicum spp (Olimpyc) y fueron regadas diariamente con 10 ml. de agua. Las macetas fueron divididas aleatoriamente en 6 grupos con ocho repeticiones. En cada maceta de los grupos 1 al 6 se añadieron aproximadamente 2,000 larvas L3 de H. contortus. Adicionalmente, en el Grupo 1 se adicionaron 2,000 Butlerius sp, grupo 2, 1x107 conidios de T. esau, grupo 4, 1x107 larvas fueron recuperadas en su totalidad a través de la técnica de Baermann durante 24 hrs. La población de larvas del parásito se redujo en 61.9% atribuido al nematodo depredador Butlerius sp. Los hongos A. musiformis, T. esau, C. rosea y D. flagrans redujeron, en 90.4, 66.7, 61.9 y 85.7% en la población de larvas en pasto. Este estudio muestra evidencia de que tanto el nematodo depredador Butlerius sp., como los hongos nematófagos evaluados poseen una actividad depredadora importante y son candidatos potenciales de con- trol biológico de la hemoncosis ovina.

Palabras clave: Control biológico, nematodos, hongos nematófagos, Haemonchus.

 

INTRODUCCIÓN
El nematodo Haemonchus contortus es considerado uno de los principales parásitos gastrointestinales de ovinos debido a su alta prevalencia y patogenicidad (Amarante, 2005). Infecciones masivas de este parásito, finalmente culminan en la muerte de los animales, especialmente a los jóvenes que son mas susceptibles (Molento, 2005). El control a base del uso de drogas químicas es el método que se lleva a cabo con mayor regularidad en todo el Mundo (Taylor et al., 2013). No obstante, presenta desventajas como la resistencia en los parásitos hacia las drogas (Fortes et al., 2013). El control biológico de parásitos en etapa pre-parasi- taria utilizando enemigos naturales ha tomado auge durante los últimos años (Wang et al., 2013). Algunas especies del hongo Trichoderma spp son considerados con actividad contra nematodos y no son tóxicas para los seres humanos ni para los animales o plantas y pueden usarse en suelos agrícolas sin causar problemas ecológicos (Martínez et al, 2013). Asímismo, existe otro hongo conocido como Clonostachys rosea que es considerado como micoparásito de hifas de otros hongos fitopatógenos y produce toxinas nematicidas e induce la resistencia en el huésped (Schroers, 2001; Costa, 2012). Por otro lado, el hongo depredador las especies de Duddingtonia flagrans produce esporas altamente resistentes que resisten tránsito gastrointes- tinal de diversos herbívoros e hifas que forman redes cortas, nódulos y redes tridimensionales con anillos constrictores con la capacidad para capturar y destruir las larvas de nematodos (Mendoza de Gives y Torres Acosta 2012). Las especies de Arthrobotrys spp son probablemente las más estudiado de todos los hongos nematófagos. Muestran una gran capacidad en el desarrollo de redes adhesivas y trampas tridimensionales que producen sustancias atractivas y paralizantes que los hacen capaces de capturar y destruir varios es- pecímenes taxonómicos de nematodos (Epe et al., 2008). Buttlerius sp son nematodos depredadores de los microorganismos del suelo en fitoparásitos y bacterias. Habitan en la materia orgánica en descomposición y tienen una gran capacidad de reproducción y la resistencia a las condiciones adversas que son consideradas como posibles agentes de control biológico (Khan y Kim, 2006). Este estudio tuvo como objetivo evaluar la actividad del nematodo depredador Butlerius sp y aislados fúngicos de la especie D. flagrans, C. rosea, A. musiformis y T. esau en contra de larvas infectantes (L3) de H. contortus en macetas sembradas con pasto Panicum y mantenidas a la intemperie.
 
MATERIAL Y MÉTODOS
Hongos
Se utilizaron aislados fúngicos de D. flagrans (cepa FTHO-8-Llerandi-Juárez y Mendoza, 1998), C. rosea (cepa Yucatán CICY-CONACYT), A. musiformis y T. esau mantenidos en 2% de agar-agua (AA2%) en la mico- teca del INIFAP (Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Ganadería).
Nematodos Depredadores
Especímenes adultos de nematodos depredadores Butlerius spp (aislado Tres Marías, Morelos) fueron man- tenidos en cultivo de heces estériles de ovinos y larvas infectantes (L3) de H. contortus (cepa RR aislada en Hueytamalco, Puebla) mantenido por infecciones artificial en ovinos Pelibuey.
 
METODOLOGÍA
Se utilizaron 48 macetas de plástico, del tipo utilizado en jardineria, de 90 x 65 mm. En cada macetas se añadieron 140 gramos de suelo adquiridos en viveros después de haber sido autoclaveada a 1.2 atm y 115 °C durante 15 minutos. En la tierra fueron añadidos 0.20 gramos de semillas (aproximadamente 250 uni- dades) de pasto Panicum spp (Olimpyc) y regadas diariamente con 10 ml. de agua para la formación de la cubierta vegetal. Después de la germinación de las microparcelas fueron divididas aleatoriamente en seis grupos experimentales con ocho repeticiones, en cada maceta de plástico se añadieron aproximadamente 2000 larvas infectantes L3 de H. contortus más un controlador natural. Las macetas fueron divididas alea- toriamente en 6 grupos con ocho repeticiones. En cada maceta de los grupos 1 al 6 se añadieron aproxima- damente 2000 larvas L3 de H. contortus. Adicionalmente, en el Grupo 1 se adicionaron 2000 Butlerius sp, grupo 2, 1x107 conidios de C. R osea y grupo 5, 1x107 conidios/clamidosporas de A. musiformis, grupo 3, 1x107 conidios de T. esau, grupo 4, 1x107 clamidosporas de D. flagrans. Las larvas fueron recuperadas en su totalidad a través de la técnica de Baermann durante 24 hrs. Los resultados fueron considerados con base en los promedios de larvas recuperadas vivas en cada tratamiento y se consideró al número de larvas vivas en el contriol como el 100%, obteniendose finalmente una taza de mortalidad.
Análisis estadístico
Los datos obtenidos fueron sometidos a un análisis de varianza y las medias de los resultados observados comparadas con la ayuda del software BioEstat 5.0 y usando la prueba complementaria de Tukey.
 
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
La población de larvas del parásito se redujo en 61.9% atribuido al nematodo depredador Butlerius sp. Los hongos A. musiformis, T. esau, C. rosea y D. flagrans redujeron, en 90.4, 66.7, 61.9 y 85.7% el la poblacion de larvas en pasto. Los promedios y la desviación estándar de larvas recuperadas de las macetas muestran una diferencia estadísticamente significativa (p> 0.05) entre los grupos tratados y el grupo control (Tabla 1 y grafico 1), pero entre los tratamientos no fue observada diferencia estadística (p> 0.05). El nematodo depre- dador Butlerius sp redujo 61.9%, la población larval en las macetas. En el período de estudio la temperatura media registrada fue de 23.6 oC, variando de 16 a 32 oC, la humedad relativa del aire observada fue 53%, variando de 27.2 a 68.9% y 6.4 mm de precipitación media diaria. Estas condiciones ambientales se consi- deran ideales para el desarrollo de las larvas de parásitos animales (Hernández, 2011) y hongos nematófa- gos (Dhingra y Sinclair, 1995). El hongo A. musiformis mostró la mayor eficacia entre los aislados probados, la reduciendo 90.4% de las L3 de H. contortus (Tabla 1). Este resultado se corrobora con los observados por Graminha et al. (2001) que encontraron 94,44% de reducción in vitro de las larvas infectantes de H. contor- tus por esta especie de hongos y también por Graminha et al. (2005) que observaron 95,5% de reducción in vitro en el número de e L3 de H. contortus, pero no encontró ninguna diferencia estadísticamente significa- tiva en el número de huevos por gramo de heces entre los grupos de tratamiento y de control en el ensayo in vivo realizado en ovinos. Acevedo-Ramírez et al. (2011) observaron en una cepa de A. musiformis aislada en México, aproximadamente el 50% de reducción en el número de L3 H. contortus en pruebas in vitro. Chauhan et al. (2005) observaron después de pasar por el tracto gastrointestinal de ovinos naturalmente infectados el aislado A. musiformis y D. flagrans utilizados de forma aislada fueron eficaces en la captura y la reduc- ción del número de larvas infectantes de H. contortus en pruebas in vitro. En un trabajo similar se observó que después del paso de clamidosporas por tracto gastrointestinal de los ovinos infectados naturalmente, D. flagrans fue capaz de reducir en más de 95% el número de L3 de tricostrongilideos (Cruz et al. 2008). Arthrobotrys ha demostrado en pruebas de invernadero poseer una importante habilidad para disminuir las infecciones en jitomae y la población parasitaria del nematodo Meloydogyne javanica (J2) mostrando reducciones del 85% en Juveniles (J2). Mientras que Trichoderma harsianum redujo en un 25% la viabilidad de huevos y en J2 redujo en un 74% (Jamshidnejad et al 2013). Por otra parte, en el presente estudio se observó que el hongo C. rosea redujo en 61.9% el número de larvas infectantes de H. contortus (Tabla 1), lo que es semejante a los resultados reportados por Jiménez, (2013) que observaron reducciones del 84.2 y 59.5%, con dos aislamientos C. rosea (cepa Yucatán) y Clonostachys sp. (Cepa Campeche), respectivamente. Resultados similares fueron descritos por Baloyi et al. (2011) que observaron reducciones de 69,9 y 89,3%, con dos cepas de C. rosea en la población del número de larvas de tricostronglideos, respectívamente. En otro estudio, llevado a cabo en heces de ovinos y en agua, se observaron reducciones de 71.9, 94.7, 92.7, 100 y 87.7%, en los nematodos Rhabitis sp., C. elegans, P. redivivus, Butlerius sp. y H. contortus, respectivamente (Martínez, 2011).
 
CONCLUSIONES
El nematodo depredador Butlerius sp, así como los aislados fúngicos de A. musiformis, T. esau, C. rosea y D. flagrans fueron eficaces en la reducción de larvas infectantes de H. contortus en maceta mantenidos a la intemperie. Este estudio muestra evidencia de que tanto el nematodo depredador Butlerius sp., como los hongos nematófagos evaluados poseen una actividad depredadora importante y son candidatos potenciales de control biológico de la hemoncosis ovina.
 
Tabla 1. Media y desviación estándar de L3 H. contortus recuperadas en microparcelas y porcentaje de re- ducción de las larvas después de 12 días de interacción con diferentes hongos nematófagos.
 
 
LITERATURA CITADA
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Biocontrol Science and Technology. Published on line: http://www.tandfonline.com/doi/abs/10.1080/0958 3157.2013.853727#.UoqAY6VgxFQ
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Pedro Mendoza
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Miguel Ángel Mercado Uriostegui
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Miguel Ángel Mercado Uriostegui
Universidad Autónoma de Querétaro - México
23 de mayo de 2017
Te paso mi correo: miguel.mercado.uriostegui@hotmail.com
Edgar Mauricio Mojica
22 de mayo de 2017
Es muy interesante esta propuesta de control Biológico, alguien tiene el contacto y cepas estos hongos para realizar pruebas de campo, directamente en potreros y establos con el fin de medir y verificar su eficacia?
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