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Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa

Publicado el: 18/08/2009
Autor/es: Carlos Vasquez, Médico Veterinario, Consultor para Latinoamerica en Avicultura. Perú
En los 90 las herramientas diagnosticas del tipo serológico que mas frecuentábamos era AGP, HI, en tanto las pruebas de ELISA que eran para ese entonces prohibitivas en su costo, sobre todo para empresas de con poca producción además que no había una gran experiencia de interpretación y manejo de la técnica;  por ello asumo que la  curva d...
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
18/08/2009 | Felicito al Dr. Vasquez por la practicidad e importancia de los datos proporcionados.
La serologia es una importante herramienta para el diagnostico, pero el conocimiento de las diferentes patologias y especialmente el criterio profesional son los complementos ideales
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
18/08/2009 | Me parece una buena introducción al tema de la rutina serológica de las empresas de explotación avícola. Hay que corregir un par de errores, para evitar confusiones:

Al inicio se menciona que es una prueba indirecta ya que lee los antígenos, cuando es indirecta por determinar más bien los anticuerpos.

El promedio geométrico se refiere no a raíces cuadradas de productos de valores de título, sino a raíces n-ésimas del producto de n valores sin embargo, el uso y la importancia están claros.

Muy importante el artículo.
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Fernando Sanabria
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Bucaramanga, Santander, Colombia
Médico Veterinario Zootecnista
Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
18/08/2009 | Muy interesante el articulo publicado, sin embargo es necesario tener en cuenta una serie de detalles al momento de interpretarlos como es la realización de la prueba en un mismo laboratorio ya que la temperatura, puede ser un causante de diversos resultados en la misma muestra. Indespensable tener la linea base en la granja para comparar resultados, como lo dice el autor es necesario la toma de muestras en el momento del problema y la toma posterior para su evaluación, igualmente es útil para comprobar la efectividad o no de las vacunas aplicadas. Cordial saludo.
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
19/08/2009 | Excelente articulo!
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
19/08/2009 | Interesante y práctico artículo de un tema del cual se ha escrito y hablado mucho, pero que sin embargo siempre hay dudas y, en el momento de ir a hacer un análisis de campo, siempre hay controversia.
Definitivamente es importante la familiaridad del técnico de campo con el kit que se utiliza, el seguimiento clínico del lote de aves, el historial de la granja y el conocimiento epidemiólogo del sector, para llegar a hacer un diagnóstico lo más acertado posible.
Cordial saludo.
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Jaime Garcia Ardila
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Bucaramanga, Santander, Colombia
Administrador de Empresas Agropecuarias
Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
19/08/2009 | MUY BUEN ARTICULO, DE GRAN AYUDA.
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
20/08/2009 | Saludos! Muy interesante y de gran importancia el manejar las herramientas de laboratorio. Me permito corregir solo unos puntos La prueba de ELISA es inidirecta por que detecta Anticuerpos formados contra un Antigeno. Es importante conocer el laboratorio que vende las placas de ELISA y conocer el antigeno que estas placas contienen (para no tener confusiones y problemas posteriores), es importante tener un parametro anterior (formado por remuestreos anteriores), existen enfermedades en donde la seroconversion es muy lenta o las IgS que participan en la defensa nos son del tipo serica, si no del tipo IgS secretoras y por lo tanto no son detectadas en una prueba serològica y por ùltimo la sero conversion tarda hasta 15 dias en alcanzar niveles detectables. Por lo que es necesario apoyarse con el resto de herramientas de laboratorio.
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
20/08/2009 | muy bueno el comentario seria muy importante que los tecnicos se interioricen sobre el tes e introduscan en muestros galpones ,como una buena arma para detectar los problemas de los lotes ,que son varias ,gracias y exitos
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
21/08/2009 | Muy interesante el artículo, es una buena intruducción al tema de la rutina serológica, para todas las empresas que se dedican a la explotación avícola, hay que tener en cuenta muchos factores, comenzando desde la misma toma de las muestras en granja, el laboratorio y el kit que se va a utilizar, los problemas epidemiológicos de la zona donde este hubicada la granja etc. para la interpretación de los resultados, bajo la linea base de la granja, para comparar y realizar el más acertado diagnostico, muy interesante el articulo.

felicitaciones Dr Vasquez.
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Julio González
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San Carlos, Panama, Panamá
Ing. Agrónomo Zootecnista
Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
22/08/2009 | Saludos:

Dr. Carlos Vasquez. Este artículo es bastante completo, ya que cada punto esta bien detallado y tiene un ejemplo de cada característica mencionada y los resultados de cada caso. Pero de cierta forma en lo referente hace énfasis en degradar la prueba de ELISA, luego como que contradice de cierta forma lo dicho sobre la prueba de ELISA, sobre su utilidad y lo resultados obtenidos con la misma. Pero como usted mismo escribe esta prueba tiene su función especifica sobre niveles de anticuerpos y que ayuda en el diagnostico.
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David Boutier
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Santa Cruz de la Sierra, Santa Cruz, Bolivia
Veterinario Zootecnista
Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
24/08/2009 | los saludos de manera cordial...
ahora yo pregunto. COSTO - BENEFICIO
muestrear cada 3 meses para elisa o hacer test en placa para algunas enfermedades como ser MG - MS en campo (en reproductoras pesadas).
antes y despues de la vacunacion.
espero comentarios.
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
25/08/2009 | Srs. Foristas agradezco su participación en este foro, lo importante es iniciar intercambios de opiniones que servirán para ir redondeando el uso de esta herramienta diagnostica y que está claro que hay muchas otras variables que tenemos que considerar y una de ellas es el técnico a cargo re direccionar su diagnostico presuntivo, luego con los resultados históricos(línea de base) y los actuales emitir una opinión, por tanto está claro que un resultado individual no dice mucho, lo que tenemos que aspirar es a conservar y procesar la data histórica y observar el comportamiento o los movimientos de las barras del histograma.

En cuanto al MG MS, son enfermedades no deseables en reproductoras, ya que su convivencia con estas significan un gran desembolso de dinero para hacer los tratamientos mensuales tanto en reproductoras y en pollos con cualquiera antibiótico de ellos sea: tiamulina, 3-acetyl-4´´isovaleriltylosina, tilosina, doxiciclina, tilmicosina, leucomicina, lincomicinas etc etc etc….

La experiencia que he tenido de manejar aves reproductoras con MG MS no son las mejores, pues todo conduce a procesos respiratorio a término en pollos, por tanto baja productividad, des uniformidad, mortalidad, alta cantidad de pollo industrial.
Un diagnostico con MG en reproductoras, particularmente recomiendo el rifle sanitario, y MS es una carga fuerte sobre los procesos respiratorios en pollos, por ello hay que evaluar la productividad.

Las vacunas MG MS particularmente las recomiendo en Gallinas ponedoras, y en cuanto a reproductoras lo meditaría bastante y si la usaría bajo ciertas condiciones. Si llegaras a un diagnostico de estas enfermedades todo el programa de Bioseguridad nunca funciono, y vas a tener que medicar, medicar ¿y la resistencia a los antibióticos?.

En cuanto a los lotes vacunados, según la indicación de la vacuna TS 11 para MG un gran porcentaje son positivas al HI, en tanto la vacuna 6/85 según su indicación la serología debería ser negativa por lo menos en aglutinación en placa en tanto que en ELISA también debe ser negativa. Esto nos generaría una gran confusión, por tanto la gran receta es bioseguridad, bioseguridad, bioseguridad, y dentro del programa de bioseguridad también se contempla el uso de la herramienta de ELISA.

Por tanto si justifica un monitoreo de MG MS en reproductoras cada 3 meses por lo menos, por ejemplo si cargas un lote en 3 galpones solo recomiendo tomar por lo menos 24 muestras de 1 galpón de de ellos, obviamente si tienes algún problema respiratorio se deben hacer los monitoreo mas frecuentes de los lotes involucrados si o si.
Saludos cordiales.

Carlos Vasquez

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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
25/08/2009 | Estimado David
En cuanto a la prueba en placa tiene el inconveniente de falsos positivos, por tanto no te recomiendo hacer ese tipo de evaluación, como mencione antes lo importante es generar una data histórica y que mejor que con ELISA, ademas tienen un software para procesar data historica, que te ayudara mucho cuando lo domines en su uso, para MG MS me satisface mas el uso del KIT Simbiotic, y justamente en el articulo hay un caso real que podrías estudiarlo con detenimiento y veras que es una herramienta útil.
No dude si tiene alguna otra inquietud.
Saludos y éxitos
Carlos Vasquez
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Renny Arcia
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Tocuyito, Carabobo, Venezuela
Médico Veterinario
Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
02/09/2009 | Estimado Dr.

Muy buen articulo que ayuda a orientar a los tecnicos de campo sobre la utilidad de esta herramienta en los programas de medicina preventiva.
Sin embargo siempre surge alguna polemica con respecto a la marca comercial de kits que se utiliza, he recibido comentarios de veterinarios que solo interpretan resultados de una marca determinada y no valoran los de otras casas comerciales.
Difiere la tecnica de elisa dependiendo de la marca comercial, hay diferencias,
Cual seria su recomendacion al respecto

Atte.

Renny Arcia
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
02/09/2009 | Estimado dr. Carlos, lo felicito por su exposiciòn, aunque el diagnòstico de las enfermedades respiratorias que son endèmicas como New Castle y Bronquitis por el sistema Elisa no es mas que una orientaciòn para ser confirmada, usando otra herramienta como el test de Inhibiciòn de la hemaglutinaciòn, y aun asì , si los valores son altos en este test, el diagnòstico se completa con el aislamiento viral y la historia clìnica de la parvada.
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
02/09/2009 | Estimado Renny:

En relación a los tipos de Kits ELISA, lo deseable sería que trabajemos con un solo laboratorio, pues justamente como menciono en el artículo, los titer group para NDV IBD IBV REO por ejemplo para Simbiotic van del 0 al 14 en tanto que para Idexx los titer group van del 0 hasta 18, por lo tanto los valores de los rangos de cada uno de los grupos serán diferentes, y cuando trabajamos data histórica es importante que evaluemos unidades similares.

Por ejemplo si tenemos data para Newcastle una año atrás y hemos determinado que mi línea de base para un mismo programa de vacunación y resultados productivos aceptables, significan entre 2000 y 2800 de titulo, y un coeficiente de variación entre 25 y 45, y de pronto mi lote actual al cual estoy evaluando los títulos se van en promedio hasta 4000 a mas, ya tengo un argumento para sospechar que hay un desafío de campo, para ello debo revisar en primer lugar los procedimientos de vacunación, reforzarlos si es necesario entre otras medidas importantes a considerar como es la Bioseguridad.

Un detalle a tener en cuenta, es que hay kit para Gumboro convencional y Gumboro XR ó extendido, para el caso de Simbiotic y Idexx en los XR ó extendidos la expresión en títulos será mucho mayor si lo comparas con el kit Gumboro convencional.

Para el caso de laboratorio Biocheck su lectura para Gumboro será siempre más alta vs los kit Simbiotic é Idexx incluso en su versión normal por características propias del kit, Por tanto si no tienes en cuenta estos detalles se distorsionará la interpretación.

En todo caso todas estas herramientas son útiles como ayuda al diagnostico y mucho ayuda el expertiz que vayas teniendo en el tiempo.

Sin otro particular quedo a tus ordenes para cualquier otra duda.
Saludos y éxitos.
Carlos Vasquez
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
02/09/2009 | Estimadísima Dra. Jenny Pinto.

Gracias por su comentario, y estoy de acuerdo con usted, que hay otras herramientas diagnosticas, y que finalmente se completa con el aislamiento viral.

Para el caso de elegir entre ELISA ó HI, particularmente considero que la pruebas de ELISA tiene mayor sensibilidad y consistencia en los resultados.

Por otro lado considero que es importante que los técnicos de campo estén capacitados para hacer las evaluaciones anatopatologico, así mismo evaluaciones de la productividad, para que una vez resumida toda la historia del lote nos lleve a un diagnostico definitivo.

Saludos.
Carlos Vasquez.
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Andres Geovanny Zuluaga Leon
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Pereira, Risaralda, Colombia
Médico Veterinario Zootecnista
Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
23/09/2009 | En muchas ocasiones los muestreos serologicos a estas enfermedades respiratorias no son 100% confiables, he visto casos de lotes de animales vacunados adecuadamente con sintomatologia respiratoria y otras lesiones que al realizar el analisis serologico sale negativo por ejemplo a Newcastle pero cuando tu haces el aislamiento viral te das la sorpresa que son positivos. Entonces hay casos que al hacer solo pruebas serologicas como la elisa se pasa un brote en un lote o granja como falsos negativos.
Por eso lo ideal es un conjunto de pruebas y empezando por un buen historial clinico, desde el punto de vista epidemiologico puedes optener muchas pistas solo con la informacion que tu puedes recolectar, ademas de un buen analisis medico de las aves, necropsia, serologia, aislamiento viral, histopatologia, etc.
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
24/09/2009 | Estimado Dr. Vasquez:

Amén de felicitarlo por tan buen artículo, y sus comentarios, deseo preguntarle lo siquiente:
Como Ud. bien señala, la cepa 6/85 de Mg no produce seroconversión. En el caso de pneumovirus ¿Una vacuna ocular debiera producir seroconversión?

Hemos registrados casos de lotes vacunados concienzudamente, que no muestran títulos, 3 semanas después de vacunados. En una primera etapa, estamos mandando realizar nuevas serologías, de muestras pareadas en dos laboratorios diferentes para confirmar ó descartar, fallas laboratoriales.

¿Alguna otra sugerencia?

Atentos saludos.
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Re: Algunas consideraciones para la interpretación serológica en Elisa
25/09/2009 | Estimado Andrés

Las experiencias que he tenido con ELISA para Newcastle, es que son confiables, siempre y cuando se haga la toma de muestra en el tiempo que se ha producido la seroconversión, lo indicado es hacer la primera toma de muestra al encontrar algunas evidencias de problemas sanitarios, luego repetir la los 15 días, te podría asegurar que si es un desafío de campo la seroconversión se dará en ese plazo, la cantidad suficiente como para emprender evaluaciones complementarias como PCR ó un aislamiento viral.

Estoy de acuerdo contigo que tenemos que hacer una adecuada anamnesis de lote para poder hacer un adecuado diagnostico, con la finalidad de tomar medidas preventivas.

Saludos y éxitos

Carlos Vasquez
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