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Detección de harina de carne en la alimentación de ponedoras con el uso de los isótopos estables de δ13C Y δ15N

Publicado: 20 de octubre de 2011
Por: LA Madeira1, JC Denadai1*, JR Sartori1, C Ducatti2, ESPB Saldanha3, MMP Sartori2 - Universidad Estatal Paulista, FMVZ, DMNA Botucatu, SP1; Universidad Estatal Paulista, IBB, CIE, Botucatu, SP2, APTA, Unidad de Investigación y Desarrollo de Brotas, SP
Resumen

El objetivo de este trabajo fue verificar si la inclusión de otros ingredientes como salvado de trigo, gluten de máiz y levadura en la dieta de las ponedoras puede interferir con la rastreabilidad de la harina de carne y hueso de bovino (HCHB) en los huevos mediante la técnica de isótopos estables de carbono y nitrógeno. Se utilizaron 256 gallinas ponedoras Bovans Goldline distribuidas aleatoriamente en ocho tratamientos con cuatro repeticiones. Los tratamientos consistieron en una dieta testigo a base de maíz, torta de soya y salvado de trigo, mientras que las demás dietas recibieron la adición de gluten de maíz y/o 2.5% de HCHB y/o levadura. El día 56 se tomaron al azar 8 huevos por tratamiento, de los cuales ocho se usaron para tomar muestras de yema y albúmina. Los resultados de los isótopos δ13C y δ15N se sometieron a análisis multivariado discriminante lineal. utilizando el programa estadístico Minitab. El uso de 3.0% de gluten de maíz en la ración de las ponedoras no permite la diferenciación de los valores isotópicos de δ13C y δ15N en la albúmina ni la yema de estos grupos que poseen 2.5% de harina de carne y hueso de bovino.
Palabras Clave: Carbono-13, Nitrógeno-15, Gallinas, Rastreabilidad, Isótopos estables.

Introducción
Debido a las exigencias del mercado internacional que son cada vez más rigurosas para la importación de productos brasileños, y al interes dl consumidor por contar con información sobre los productos alimenticios, se hace necesario atender las exigencias de los mercados consumidores, averiguando y asegurando la calidad del alimento exportado. La rastreabilidad se ha convertido en una herramienta importante para asegurar la calidad del producto a los consumidores. El uso de harina de carne y hueso de bovino (HCHB) sirve como fuente de proteína y, principalmente, minerales (en este fósforo) para las aves. No existiendo restricciones en el mercado interno sobre el uso de subproductos de origen animal en la alimentación de pinedoras, la producción comercial se ha realizado con y sin la inclusión de HCHB en las dietas.
Debido a los acontecimientos recientes en el mundo relacionados con productos de origen animal en los alimentos pecuarios, entre los cuales podemos citar a la crisis de Dioxina en Bélgica (1999) y Alemania (2000/2001) y diversos casos de encefalopatía esponjiforme bovina (EEB) en diversos países europeos, Canadá, Estados Unidos y Japón (Fernandes Filho y Queiroz, 2001; Cerutti, 2002), su uso quedó prohibido para exportación a países europeos.
En un intento de identificar y cuantificar la utilización de subproductos de origen animal en la alimentación de aves, se han venido realizando estudios conla utilización de la técnica de isótopos estables de carbono y nitrógeno. La integración de la composición isotópica del carbono-13 incorporado al cuerpo del animal junto con la merma por espiración y excreción, debe ser igual a la composición isotópica de carbono de la dieta (DeNiro y Epstein, 1976, 1978). Con respecto al nitrógeno-15 ocurre un enriquecimiento medio de 3‰ en cada elevación del nivel trófico (Kock et al., 1994). La proporción isotópica de carbono (13C/12C) en asociación con la proporción isotópica de nitrógeno (15N/14N) permitió rastrear en el producto final la HCHB en la alimentación de pollos de engorde (Carrijo et al., 2006). Harina de vísceras de aves en la alimentación de pollos de engorde y codornices (Oliveira et al., 2010; Móri et al., 2007), harina de vísceras de aves junto con levadura y salvado de trigo en la alimentación de pollos de engorde (Gottmann et al., 2008) y HCHB en la alimentación de ponedoras (Denadai et al., 2009).
Por lo anterior, el objetivo del presente trabajo fue evaluar si la inclusión de otros ingredientes como salvado de trigo, gluten de maíz y levadura en la dieta de las ponedoras puede interferir con la rastreabilidad de la HCHB en los huevos mediante la técnica de isótopos estables de carbono y nitrógeno.
Material y Métodos
El experimento se desarrolló en el Sector de Avicultura de la Unidad de Investigación y Desarrollo de Brotas, Departamento de Descentralización y Desarrollo, Agencia Paulista de Tecnología de los Agronegocios, Secretaría de Agricultura y Abastecimiento del Estado de São Paulo, Brasil. Se utilizaron 256 gallinas ponedoras Bovans Goldline distribuidas aleatoriamente en 8 tratamientos con 4 repeticiones. A los 56 días se tomaron al azar 8 huevos por tratamiento. Los tratamientos consistieron en una dieta testigo elaborada a base de maíz, torta (psta o harina) de soya (soja) y salvado de trigo (MST) y las demás dietas recibieron la adición de gluten de maíz (G) y/o HCHB (2.0%) y /o levadura (L). Las muestras se analizaron en el Centro de Isótopos Estables (CIE) del Instituto de Biociencias de la UNESP, campus Botucatu. La albúmina se separó de la yema manualmente, se seco por 24 horas en la estufa con ventilación forzada a 56ºC y se molió criogénicamente para estudiarla en el analizador elemental (EA 1108 - CHN - Fisons Instruments, Rodano, Italia) acoplado aun espectrofotómetro de masas de proporciones isotópicas (Delta S - Finnigan MAT, Bremen, Alemania). Los resultados de los análisiss se expresaron en delta por mil (δ) de la proporción isotópica de la muestra en relación a los estándares internacionales Peedee Belemnite (PDB) y nitrógeno atmosférico (N2), para ls elementos de carbono y nitrógeno, respectivamente, de acuerdo con la expresión:
δ(muestra, estándar) = 1000[(R muestra y R estándar)/R estándar],
en donde R representa la proporción (razón) entre el isótopo más pesado y el más liviano, en particular 13C/12C y 15N/14N.
Los resultados isotópicos de δ13C y δ15N se sometieron a análisis multivariado discriminatorio lineal, con auxilio del programa estadístico Minitab.
Resultados y Discusión
Los grupos formados de acuerdo con los valores isotópicos de δ13C y δ15N de las muestras de yema y albúmina recolectadas a los 56 días se presentan en las Figuras 1 y 2.
Figura 1. Gráfica de los principales componentes de carbono-13 y nitrógeno-15 en la yema, a los 56 días.
Detección de harina de carne en la alimentación de ponedoras con el uso de los isótopos estables de δ13C Y δ15N - Image 1
 
Según indican los datos de yema (Figura 1), el análisis discriminatorio presentó tres grupos distintos de respuesta, en donde a la izquierda de la gráfica se ve que el grupo formado por los tratamientos testigo a base de maíz, soya y trigo (MST) y el tratamiento con la adición de 2.5% de harina de carne (MSTFC) y el tratamiento con la adición de levadura (MSTL). Al centro de la gráfica se formó un segundo grupo en el cual todos los tratamientos llevan la adición de gluten de maíz (MSTG, MSTGFC y MSTGL) con excepción del tratamiento con la adición de levadura y 2.5% de harina de carne (MSTLFC), que también se colocó en el mismo grupo. En el lado derecho de la gráfica se encuentra el tercer grupo, formado por los tratamientos que contenían gluten, levadura y 2.5% de harina de carne (MSTGLFC). Posiblemente, la inclusión de 3% de gluten no permitió la detección de 2.5% de harina de carne. Sin embargo, Denadai (2008) detectó en la yema la inclusión a partir de 3.0% de harina de carne y hueso de origen bovino en la alimentación de la ponedoras, pero detectó un nivel menor en la albúmina (1.5% de harina de carne y hueso de bovino).
Figura 2. Gráfica de los principales componentes de carbono-13 y nitrógeno-15 en la albúmina a los 56 días.

Detección de harina de carne en la alimentación de ponedoras con el uso de los isótopos estables de δ13C Y δ15N - Image 2 
Con respecto a la albúmina (Figura 2) se observaron dos grupos distintos de respuesta, colocados del lado izquierdo de la gráfica: el grupo sin la adición de gluten de maíz (MST, MSTFC y MSTL), y un segundo grupo formado por los tratamientos (MSTLFC, MSTG, MSTGL y el MSTGLFC), que se traslapan, no permitiendo la diferenciación entre ellos, lo que concuerda con Denadai et al. (2009) que afirman que la adición de un ingrediente C4, gluten de maíz y levadura causa un aumento en el enriquecimiento, distanciando todavía más los valores isotópicos de los huevos y sus fracciones de los del grupo testigo.
No fue posible detectar el gluten, posiblemente por el nivel bajo de inclusión de harina de carne (2.5%), pero el nivel utilizado en la industria es de 4.5 a 5.0%. Podemos subrayar la necesidad de realizar otras pruebas en conjunto con las dietas, pues la señal isotópica de la dieta se refleja en el producto final, en este caso el huevo, confirmando la expresión de orden general de DeNiro y Epstein (1978), que afirman que "el animal es lo que consume ± 1‰ para el carbono-13" y ± 3‰ (de 2 a 5‰) para el nitrógeno-15, por cada elevación en el nivel trófico.
Conclusiones
El uso de 3.0% de gluten de maíz en la ración de ponedoras no permite la diferenciación de los valores isotópicos de δ13C y δ15N en la albúmina ni la yema de estos grupos que recibieron 2.5% de harina de carne y hueso de bovino.
Agradecimientos
Programa Nacional de Posdoctorado, PNPD, de la Fundación de Coordinación y Perfeccionamiento de Personal al Nivel Superior, CAPES, por la beca concedida al primer autor y por el financiamiento del proyecto.
A Evandro Tadeu Silva, funcionario del Centro de Isótopos estables por la realización de los análisis isotópicos.
A la APTA, de la Secretaría de Agricultura y Abastecimiento del Estado de São Paulo, por ceder el sector de avicultura para la realización del estudio.
Bibliografía
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Cerutti M. 2002. Aplicação de um programa de rastreabilidade na cadeia de frangos de corte. In: Simpósio Sobre Manejo E Nutrição De Aves E Suínos E Tecnologia Da Produção De Rações, 2002, Campinas. Anais...Campinas: Colégio Brasileiro de Nutrição Animal. p. 253-264.
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Denadai JC, Ducatti C, Sartori JR, Pezzato AC, Móri C, Gottmann R, Mituo MAO. 2009. Rastreabilidade da farinha de carne e ossos bovinos em ovos de poedeiras alimentadas com ingredientes alternativos. Pesquisa agropecuária brasileira 44(1):1-7.
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Móri C, Garcia EA, Ducatti C, Denadai JC, Pelicia K, Gottmann R, Mituo MAO, Bordinhon AM. 2007. Traceability of animal by products in quail (Coturnix coturnix japonica) tissues using carbon (13C/12C) and nitrogen (15N/14N) stable isotopes. Brazilian Journal of Poultry Science 9(4):263-269.
Oliveira RP, Ducatti C, Pezzato AC, Denadai JC, Cruz VC, Sartori JR, Carrijo AS & Caldara FR. 2010. Traceability of poultry offal meal in broiler feeding using isotopic analysis (δ13C and δ15N) of different tissues. Revista Brasileira de Ciência Avícola / Brazilian Journal of Poultry Science 12:13-20.
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