Calidad ósea de ponedoras cuya dieta contenía aflatoxina, fumonisina y adsorbente

Introducción

Las micotoxinas en el alimento representan uno de los principales factores que deprimen la productividad de las aves así como la calidad de sus productos. Cerca del 25% de los granos producidos en todo el mundo está contaminado con micotoxinas (Mannon y Jonhson, 1985), por lo que el control de su impacto es fundamental para evitar pérdidas económicas.

El grupo de micotoxinas con mayor distribución en todo el mundo es el de las aflatoxinas, las cuales son producidas por los hongos Aspergillus flavus, A. parasiticus y A. nominus (Kurtzman et al., 1987), que se desarrollan en clima cálido y húmedo. La intoxicación con aflatoxinas en pollos de engorde se caracteriza por disminución en concentración sanguínea de proteína total, albúmina, colesterol, glucosa, ácido úrico, fósforo inorgánico y calcio, así como por un aumento en la actividad de las enzimas indicadoras de lesiones hepáticas (Amer et al., 1998). También se sabe que las aflatoxinas interfieren con el metabolismo de la vitamina D, contribuyendo a reducir la resistencia ósea, lo cual debilita las piernas (Hamilton, 1984).

Algunos estudios también han demostrado que las aflatoxinas afectan directa o indirectamente el metabolismo de calcio y fósforo en las aves (Glahn et al., 1991), dos nutrimentos inorgánicos importantes que representan el 95 % de la matriz ósea mineral. El calcio, el fósforo y la vitamina D son elementos íntimamente relacionados en el metabolismo del animal, muchas veces combinados entre sí, principalmente en la formación ósea (Vargas et al., 2004).

Glahn et al. (1991) explicaron que los efectos de las aflatoxinas sobre el calcio y el fósforo pueden estar relacionados con alteraciones del metabolismo de la vitamina D y de la paratohormona (PTH), pues esta micotoxina puede disminuir sus síntesis endógena y modificar la sensibilidad renal a esta hormona, pudiendo incluso reducir la síntesis de 1.25-dihidroxi vitamina D, causando disminución en la excreción renal del fósforo y en la del calcio. La aflatoxina reduce la absorción intestinal de vitamina D y los daños causados al hígado impiden su conversión a la forma activa, 25-hidroxicolecalciferol. Sin embargo no está claro si las micotoxinas crean una deficiencia metabólica específica de vitamina D3 o de otros nutrimentos o si simplemente afectan al ave debido a que reducen el consumo de alimento. En raciones contaminadas con micotoxinas, especialmente cuando hay presencia de Fusarium, se recomienda aumentar los niveles de vitamina D3.

Las fumonisinas son citotóxicas y carcinogénicas para los animales y su principal efecto es la inhibición de la síntesis de esfingolípidos, importantes para la integridad de la membrana celular y para el transporte iónico en la célula (Santurio, 2000). Las ponedoras son capaces de tolerar concentraciones relativamente altas de fumonisina B1 (FB1) durante largos períodos, sin afectar la salud ni el rendimiento de los animales (Kubena et al., 1999).

El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto nocivo de la aflatoxina, la fumonisina y la combinación de ambas sobre la calidad ósea de ponedoras comerciales, así como analizar la eficacia del adsorbente glucano en promover la reducción y/o eliminación total de estos efectos.

Material y Métodos

El experimento se realizó en la Cámara Bioclimática de la FMVZ, UNESP, Campus Botucatu, Brasil. Se utilizaron 168 hembras Hisex Brown de 37 semanas de edad al inicio del experimento. Se siguió un diseño completamente al azar bajo un esquema factorial 3 x 2 + 1 (3 tratamientos con adición de micotoxina: aflatoxina (AF), fumonisina (FU) y ambas (AF+FU); tratamientos con y sin adsorbente (ADS) y un alimento testigo sin la adición de micotoxinas ni adsorbente), totalizando 7 tratamientos con 6 repeticiones cada uno. La unidad experimental estuvo constituida por una jaula de cuatro aves y el experimento tuvo una duración de 56 días, comprendiendo dos ciclos de 28 días. La dosis de intoxicación utilizada en el experimento fue 1 ppm de aflatoxina y 25 ppm de fumonisina, mientras que el adsorbente utilizado fue el glucano, derivado de la pared celular de levaduras, a la dosis de 2 Kg/Tonelada de alimento.

Los huevos se recolectaron dos veces al día para calcular el porcentaje de postura. Para el estudio de la calidad ósea se sacrificaron seis aves por tratamiento (una por repetición), removiendo las tibias izquierdas y congelándolas para analizarlas posteriormente. Los huesos se mantuvieron en su estado natural, apenas descarnados manualmente para el análisis de la resistencia ósea, que se realizó por medio de una celda específica acoplada al equipo Texture Analyser TA. XT Plus, que se utilizó para medir la fuerza necesaria para lograr quebrar el total de los huesos.

Posteriormente al análisis de resistencia ósea, los huesos se calcinaron en una mufla a 800ºC durante 3 horas para obtener las cenizas óseas. La cuantificación del calcio y el fósforo en las muestras de hueso se realizó mediante espectrometría de absorción atómica y espectrofotometría ultra violeta visible después de la desmineralización de las muestras (Neves et al., 2009; Moraes et al.,2009).

Para el análisis estadístico de los resultados se estudió la varianza mediante el procedimiento del modelo lineal general (GLM), con el programa estadístico del Statistical Analysis System (SAS, 2002) y cuando la prueba F resultó significativa (P<0.05), las medias entre los tratamientos se compararon utilizando las pruebas de Tukey (medias entre tratamientos) y Dunnett (medias de los tratamientos comparadas con el grupo testigo).

Resultados y Discusión

Los valores medios del porcentaje de postura, porcentaje de cenizas, materia seca, concentración de fósforo y calcio, y resistencia a la fractura se presentan en el Cuadro 1. No se observaron efectos (P>0.05) de las micotoxinas ni del adsorbente sobre el porcentaje de cenizas ni sobre la resistencia a la fractura. Las de los tratamientos AF presentaron menores porcentajes (P = 0.0594) de postura y estos resultados están de acuerdo con los de Oliveira et al. (2002), para las concentraciones de 100, 300 y 500 μg/Kg de AF y con Iqbal et al. (1983) para las concentraciones de 100 a 500 μg/Kg de AFB1.

Cuadro 1. Porcentaje de postura y características de la calidad ósea de las ponedoras comerciales en los diferentes tratamientos

			MICOTOXINA		VALORES DE P
TRAT¹	CONT	ADS	AF	FU	AF+FU	Media	ADS	MICO	INT	CONT	CV (%)
Postura (%)	94.79	Sin	76.72	86.76	77.38	80.29	0.5828	0.0594	0.5793	0.0430	14.77
Con	83.93	90.77	73.51*	82.74
Media	80.33 ab	88.77 a	75.45 b
Cenizas (%)	41.75	Sin	43.82	42.21	45.43	43.82	0.2805	0.1223	0.9415	0.3054	8.12
Con	43.07	40.78	43.70	42.44
Media	43.44	41.50	44.64
MS (%)	60.91	Sin	64.93	64.03	61.88 B	63.61	0.3067	0.9830	0.0465	0.0583	4.65
Con	63.38	64.00	66.61 A	64.55
Media	64.16	64.02	64.03
P (mg/l)	0.159	Sin	0.177	0.210 B	0.166	0.184	0.6549	0.7713	0.0283	0.0708	16.94
Con	0.184	0.164 A	0.190	0.179
Media	0.181	0.187	0.177
Ca (mg/l)	3.37	Sin	3.44	3.90	3.88	3.74	0.9845	0.0351	0.1355	0.0844	11.72
Con	3.64	4.13	3.43	3.76
Media	3.54 b	4.02 a	3.67 ab
Resistencia a la fractura (Kgf/mm)	9.12	Sin	11.22	10.16	10.12	10.50	0.2678	0.2362	0.0630	0.0837	20.79
Con	10.16	10.35	13.59	11.24
Media	10.69	10.26	11.70

^{¹ Tratamientos: CONT: control (testigo); AF: tratamiento con aflatoxina; FU: tratamiento con fumonisina; AF+FU: tratamiento con aflatoxina más fumonisina; ADS: adsorbente; MICO: micotoxina; INT: interacción.
* Difiere del tratamiento testigo según la prueba de Dunnett (P<0.05);
a, b Las medias en una línea seguidas de letras minúsculas distintas son diferentes entre sí según la prueba de Tukey (P<0.05);
A, B Las medias en una columna seguidas de letras mayúsculas distintas son diferentes sí según la prueba de Tukey (P<0.05).}

Existió interacción (P<0.05) entre la inclusión de micotoxinas y adsorbente para el porcentaje de materia seca (MS), pues el tratamiento AF+FU con ADS presentó un mayor porcentaje (66.61%) que el mismo tratamiento sin ADS (61.88%). El porcentaje de reducción de la postura que se observó con el este último tratamiento (73.51%) movilizó menos tejido óseo, lo que puede explicar el mayor porcentaje de MS en la tibia. De hecho, existen estudios que demuestran que la movilización ósea está relacionada con la producción de huevo (Whitehead, 2004). Se observó interacción (P<0.05) también en la concentración de fósforo con el tratamiento FU, que presentó mayor valor (0.210 mg/l) en ausencia del ADS. La concentración de calcio en la tibia difirió entre las micotoxinas, siendo que en las aves del tratamiento FU se presentaron mayores concentraciones (4.016 mg/l) que en las del tratamiento AF (3.54 mg/l).

Se sabe que la AF afecta al hígado y los riñones, órganos que participan en la biosíntesis de vitamina D activa (Hamilton, 1984) que es la responsable de transferir el calcio y el fósforo del alimento al torrente sanguíneo. Dado el efecto tóxico de la AF y, por consiguiente, la reducción en la vitamina D activa se presenta una disminución en la absorción intestinal de calcio y en el depósito de éste en el hueso. Siendo así, se presentó una mayor movilización del calcio óseo para formar el cascarón del huevo, lo que puede explicar el menor contenido de calcio en los huesos de las aves del grupo AF.

La fumonisina parece no tener efecto sobre la síntesis de vitamina D activa y, en este estudio, la absorción intestinal del calcio y el fósforo del alimento garantizarían el aporte de los requerimientos para formar el cascarón, permitiendo una mayor concentración de estos dos minerales en los huesos de las aves tratadas con FU pero sin ADS. El uso del adsorbente produjo una tendencia a aumentar la postura, lo que puede estar asociado con la mayor demanda de calcio y fósforo para el huevo. Sin embargo, la baja concentración de FU utilizada en el presente trabajo tal vez no permitió demostrar efectos mayores de esta micotoxina.

Conclusión

Los cambios observados en el porcentaje de postura son indicativos de intoxicación con aflatoxina a la concentración de 1 ppm. Las micotoxinas ya sea separadas o en combinación no influenciaron la calidad del hueso. El uso del adsorbente glucano en el alimento a la concentración de 2 Kg/Tonelada no fue suficiente para revertir los efectos de las micotoxinas sobre la postura y no afectó la calidad ósea.

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EV Siloto¹*, DRS Sartori², EFA Oliveira³, JR Sartori⁴, VB Fascina⁵¹Alumna de doctorado del Programa de Posgrado de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, UNESP, Botucatu, SP, Brasil; ²Profra. del Departamento de Fisiología del Instituto de Biociencias, UNESP, Botucatu, SP, Brasil; ³Zootecnista, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, UNESP, Botucatu, SP, Brasil; ⁴Profr. del Departamento de Mejoramiento y Nutrición Animal, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, UNESP, Botucatu, SP, Brasil; ⁵Alumno de doctorado del Programa de Posgrado de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, UNESP, Botucatu, SP, Brasil

Calidad ósea de ponedoras cuya dieta contenía aflatoxina, fumonisina y adsorbente

Residuos de Zearalenona, Toxina T-2, Deoxinivalenol y Fumonisinas, en Alimentos de Origen Animal (leche, huevos, carne y otros tejidos comestibles)

VICAM